發(fā)布時間：2017-09-08 15:26

  本文關(guān)鍵詞：回收自體血中腦膜瘤干細(xì)胞檢測的初步研究

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【摘要】：目的通過回收腦膜瘤手術(shù)野流失的血液,并進(jìn)行抗凝、濾過、離心、洗滌及凈化,將得到的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察和流式細(xì)胞儀檢測,明確紅細(xì)胞懸液中腦膜瘤干細(xì)胞的含量,評估自體血回輸技術(shù)的安全性,為其在腦膜瘤手術(shù)治療中的臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。方法選取2014年06月~2015年12月,于鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院擇期進(jìn)行手術(shù)治療的腦膜瘤患者89例,其中因患者及家屬拒絕使用自體血回輸、合并顱內(nèi)感染或ASA分級Ⅲ級以上等原因剔除19例,最終入選腦膜瘤患者70例。自手術(shù)切皮至縫皮實(shí)施血液回收,嚴(yán)格遵照血液回收、清洗、回輸流程進(jìn)行操作。選取分離切除腦膜瘤時的腫瘤組織出血(B1)、儲血罐內(nèi)收集的血液(B2)、經(jīng)離心及洗滌后的血液(B3)三組標(biāo)本,用推片法將三組血液標(biāo)本分別制成血細(xì)胞單層排列的血涂片,干燥后在光學(xué)顯微鏡下觀察并辨認(rèn)細(xì)胞形態(tài)。制備B1、B2及B3血液標(biāo)本,分別使用流式細(xì)胞術(shù)直接免疫熒光法檢測其CD133、CDl66的陽性表達(dá)情況,并建立二維點(diǎn)圖。術(shù)中取腫瘤組織,固定、石蠟包埋并切片,應(yīng)用蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)進(jìn)行免疫組化染色,在鏡下觀察、診斷腫瘤組織類型,并采集圖像。結(jié)果70例患者平均年齡52.87±17.29歲,男性37例(52.86%),女性33例(47.14%)。ASAⅡ級患者22例(31.43%),ASAⅢ級患者48例(68.57%)。術(shù)中共回收自體血25176ml,每例患者平均回收自體血359.66±169.72ml。在光學(xué)顯微鏡下可見:B1血涂片含有大量的組織碎片、破壞的細(xì)胞基質(zhì)、游離的血紅蛋白等組織,但未觀察到異常形態(tài)的腫瘤細(xì)胞。B2血涂片中組織碎片、破壞的細(xì)胞基質(zhì)、游離的血紅蛋白等組織顯著減少,但含有部分形態(tài)異常的紅細(xì)胞。B3血涂片紅細(xì)胞大小一致,變化均一,鏡下未見其它異常形態(tài)細(xì)胞及組織碎片等。所有患者的病理結(jié)果均為腦膜瘤,腦膜瘤病理分型不同,其鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)亦存在相應(yīng)差異。經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測分析顯示:B1血標(biāo)本中,CD133的陽性表達(dá)率為0.54%,CD166的陽性表達(dá)率為3.46%,CD133及CD166均為陽性的表達(dá)率為零;B2血標(biāo)本中,CD133的陽性表達(dá)率為0.43%,CD166的陽性表達(dá)率為3.58%,兩者均為陽性的表達(dá)率同樣為零;B3血標(biāo)本中,CD133的陽性表達(dá)率為0.39%,CD166的陽性表達(dá)率為2.75%,CD133及CD166兩者均為陽性的表達(dá)率為零。結(jié)論經(jīng)自體血回收機(jī)過濾、離心、分離、洗滌及凈化后收集到的紅細(xì)胞懸浮液中,未發(fā)現(xiàn)腦膜瘤干細(xì)胞,初步認(rèn)為回輸給患者具有一定的安全區(qū)間;回收式自體血回輸技術(shù)在腦膜瘤手術(shù)中的應(yīng)用,可以有效節(jié)省血液資源,緩解目前血源緊張的局面,值得臨床推廣。
【關(guān)鍵詞】：自體血回輸 腦膜瘤 流式細(xì)胞術(shù) CD133 CD166
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.45
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 引言10-12
• 2 材料與方法12-16
• 3 結(jié)果16-18
• 4 討論18-22
• 5 結(jié)論22-23
• 附圖23-26
• 參考文獻(xiàn)26-29
• 綜述 回收式自體血回輸概述及在腫瘤手術(shù)治療中的研究進(jìn)展29-44
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 個人簡歷、碩士在讀期間已發(fā)表論文44-45
• 致謝45

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本文編號：814802