本文關(guān)鍵詞：Th17細(xì)胞在TL1A調(diào)控結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌中作用的初步研究

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【摘要】：隨著我國(guó)炎癥性腸病(Inflammatory bowel disease,IBD)發(fā)病率的不斷攀升,對(duì)其機(jī)制及并發(fā)癥防治的研究也正日益成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。這其中結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌(colitis associated colorectal cancer,CAC)是一種與IBD密切相關(guān),最令人擔(dān)憂的遠(yuǎn)期并發(fā)癥,其發(fā)生與病變范圍、炎癥程度、發(fā)病年齡、患病時(shí)間和結(jié)直腸癌家族史等因素有關(guān)。研究其發(fā)病機(jī)制能為臨床上有效防治結(jié)直腸癌提供有力幫助。CAC是腸道在反復(fù)的炎癥刺激基礎(chǔ)上,不斷地增生修復(fù)最終由異型增生轉(zhuǎn)變?yōu)榘┑臐u進(jìn)過(guò)程。這其中炎癥是其始動(dòng)因素。作為體內(nèi)重要促炎因子的白細(xì)胞介素17(Interleukin-17,IL-17)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白細(xì)胞介素6(Interleukin-6,IL-6),除了參與多種炎癥性疾病和自身免疫性疾病的發(fā)生外還對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有重要影響。在圍繞結(jié)腸炎誘發(fā)癌變分子激活的機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn):細(xì)胞因子可以通過(guò)與特異性受體結(jié)合,增強(qiáng)包括NF-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、WNT、STAT3等在內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子活性,從而發(fā)揮對(duì)CAC的調(diào)控作用。腫瘤壞死因子樣配體1A(TNF-like ligand 1 aberrance,TL1A)是新發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤壞死因子超家族成員,體內(nèi)、體外的研究均已證實(shí)TL1A可以通過(guò)促進(jìn)T細(xì)胞和APCs的表型活化,增強(qiáng)單個(gè)核細(xì)胞分泌Th17型細(xì)胞因子活性,上調(diào)IL-17、TNF-α和IL-6的表達(dá),促進(jìn)腸黏膜炎癥的發(fā)生,參與IBD的起病。那么它作為T(mén)細(xì)胞的免疫增強(qiáng)子是否會(huì)通過(guò)促進(jìn)炎癥反應(yīng)而影響CAC的發(fā)生呢?目前尚未有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,為此我們利用TL1A過(guò)表達(dá)的轉(zhuǎn)基因(LCK-CD2-TL1A-GFP-transgenic,L-Tg)小鼠和野生型(wild type,WT)C57BL/6小鼠,建立實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌模型,研究TL1A在其中的作用以期尋找問(wèn)題的答案。目的:建立炎癥誘導(dǎo)的小鼠結(jié)直腸癌模型,了解TL1A在結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌中的作用。方法:①采用real-time Q-PCR方法進(jìn)行LCK-CD2-TL1A-GFP基因型小鼠的鑒定與篩選。②通過(guò)誘變劑AOM與致炎劑DSS聯(lián)合誘導(dǎo)的方式建立實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌模型,將L-Tg小鼠與C57BL/6 WT小鼠(8-12周)分別隨機(jī)分為Control組、AOM組、DSS組和AOM+DSS組,共8組,每組10只。Control組正常飲食;AOM組在實(shí)驗(yàn)第一天接受10 mg/Kg AOM單劑量腹腔注射后正常飲食;DSS組先連續(xù)飲用7天濃度為2.5%的DSS,隨后14天飲用蒸餾水,以此為一個(gè)循環(huán),共飲用4個(gè)循環(huán);AOM+DSS組單劑量腹腔注射AOM 10 mg/Kg聯(lián)合間斷飲用4個(gè)循環(huán)的2.5%DSS。③結(jié)腸黏膜炎癥程度的評(píng)估包括體重變化(Body weight,BW)、疾病活動(dòng)指數(shù)(Disease activity index,DAI)、結(jié)腸形態(tài)學(xué)變化、組織病理學(xué)評(píng)分和髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)檢測(cè)。④腫瘤形成情況的評(píng)估包括計(jì)算腫瘤的數(shù)目、直徑、成瘤率并對(duì)異型增生程度進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)估。⑤應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測(cè)結(jié)腸組織中IL-17A、TNF-α和IL-6蛋白的定量表達(dá)。⑥將MPO活性和IL-17A、TNF-α、IL-6的相對(duì)表達(dá)量分別與腫瘤的數(shù)目、大小和異型增生評(píng)分做相關(guān)性分析。結(jié)果:①根據(jù)基因LCK-CD2-TL1A-GFP序列測(cè)定小鼠DNA,Tg小鼠目的基因成像在192 bp位置,而WT小鼠基因測(cè)定成像,在192 bp位置未檢測(cè)到目的基因,據(jù)此篩選鑒定Tg小鼠;②與Control組和AOM組相比,轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠的DSS組和AOM+DSS組小鼠體重均有減輕,DAI評(píng)分顯著升高,AOM+DSS/Tg組比AOM+DSS/WT組升高更明顯(2.3±0.76 vs 1.28±0.47,P0.05);大體形態(tài)顯示:DSS組結(jié)腸腸壁充血、水腫,AOM+DSS組腸壁增厚并出現(xiàn)腸腔狹窄、扭曲;光鏡下可見(jiàn)DSS組結(jié)腸組織有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),黏膜上皮破壞形成淺潰瘍,病理評(píng)分顯著增加,AOM+DSS組可見(jiàn)腺體扭曲變形,細(xì)胞大小不等,形態(tài)不一,核大深染,呈異型性增生。MPO結(jié)果顯示:WT和Tg小鼠的Control組和AOM組間MPO活性均無(wú)明顯差異,而與Control組和AOM組相比,DSS組、AOM+DSS組小鼠結(jié)腸MPO明顯升高,DSS/Tg、AOM+DSS/Tg較DSS/WT、AOM+DSS/WT組升高更明顯;③計(jì)算腫瘤的數(shù)目、大小和成瘤率,與野生型鼠比較,AOM+DSS/Tg組瘤體數(shù)目增多(5.62±1.30 vs 3.5±1.19,P0.05)、直徑增大(2.98±0.79 vs 2.08±0.37,P0.05),成瘤率明顯增高(88.9%vs 66.7%)且異型增生的組織病理學(xué)評(píng)分明顯增高(2.75±0.5 vs 1.7±0.8,P0.05);④用Western blot檢測(cè)IL-17A、TNF-α和IL-6表達(dá),結(jié)果顯示:與Control組和AOM組相比,WT和Tg小鼠的DSS組、AOM+DSS組IL-17A、TNF-α和IL-6表達(dá)水平顯著升高(P0.05),AOM+DSS/Tg組比AOM+DSS/WT升高明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)⑤MPO活性與腫瘤的數(shù)目、大小呈正相關(guān)(r=0.6,r=0.55,P0.05);IL-17A、TNF-α、IL-6的相對(duì)表達(dá)量均與腫瘤的數(shù)目和異型增生評(píng)分呈顯著性正相關(guān)(P0.05),IL-17A、TNF-α同時(shí)還與腫瘤的大小呈正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:TL1A過(guò)表達(dá)會(huì)促進(jìn)結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌的進(jìn)程,其機(jī)制可能與TL1A促進(jìn)Th17細(xì)胞分泌炎癥因子IL-17A、TNF-α和IL-6有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤壞死因子樣配體1A 炎癥性腸病 結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌 炎癥因子 Th17細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.34;R574.62
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫(xiě)11-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-24
• 結(jié)果24-28
• 附圖28-37
• 討論37-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 綜述 細(xì)胞因子及相關(guān)信號(hào)通路在結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌中的作用與機(jī)制研究新進(jìn)展45-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 致謝54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

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1 王漢濤 ,Kraemer M.;隨訪危險(xiǎn)因素分析:復(fù)發(fā)和非復(fù)發(fā)結(jié)直腸癌的比較[J];中國(guó)實(shí)用外科雜志;2001年12期

2 蘇森;患結(jié)直腸癌婦女后代癌癥的危險(xiǎn)性增加[J];中國(guó)腫瘤;2001年06期

3 汪一虹;在確定的法國(guó)人群中年齡<45歲結(jié)直腸癌病人與≥45歲結(jié)直腸癌病人的比較[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(消化系疾病分冊(cè));2002年01期

4 李會(huì)晨;結(jié)直腸癌解剖位置的連續(xù)性右向遷移[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊(cè);2003年03期

5 李志霞;結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的綜合治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年06期

6 何建苗,蒲永東,曹志宇,劉衛(wèi)平;老年人結(jié)直腸癌186例的外科治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

7 保紅平,方登華,高瑞崗,李奎,張雪松,劉天錫;青年人結(jié)直腸癌臨床病理分析[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2004年01期

8 章江;;監(jiān)測(cè)結(jié)直腸癌非常必要[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);2004年04期

9 郜文秀,楊艷芳,梁小波,李耀平,李佩珍;細(xì)胞粘附分子變異體在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及預(yù)后[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2005年07期

10 Nozawa T. ,Enomoto T. ,Koshida Y. ,M. Kuranami,王志宇;人結(jié)直腸癌黏膜下血小板源性內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子特異性增強(qiáng)表達(dá)[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2005年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭樹(shù);;結(jié)直腸癌預(yù)后與轉(zhuǎn)移相關(guān)因素分析[A];2005年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議全國(guó)大腸癌轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的診治研討會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2005年

2 鄒一峰;吳小劍;蘭平;;結(jié)直腸癌免疫治療新進(jìn)展[A];第十一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合大腸肛門(mén)病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 郁寶銘;;結(jié)直腸癌治療的進(jìn)展及其新理念[A];2006年浙江省肛腸外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

4 王錫山;;結(jié)直腸癌治療的困惑之我見(jiàn)[A];第九屆全國(guó)腫瘤轉(zhuǎn)移學(xué)術(shù)大會(huì)暨2011年黑龍江省醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)年會(huì)報(bào)告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的結(jié)直腸癌預(yù)防[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)肛腸學(xué)會(huì)第五屆學(xué)術(shù)交流會(huì)暨新技術(shù)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 高文慶;陳會(huì)林;童蕾;陸松春;;老年梗阻性結(jié)直腸癌診療體會(huì)(附42例報(bào)告)[A];首屆“之江中醫(yī)藥論壇”暨浙江省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

7 王啟遠(yuǎn);周長(zhǎng)江;高云飛;徐巖;李坤;;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與結(jié)直腸癌[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第八屆組稿會(huì)暨急診醫(yī)學(xué)首屆青年論壇論文匯編[C];2009年

8 巴一;;結(jié)直腸癌靶向治療進(jìn)展[A];第三屆中國(guó)腫瘤內(nèi)科大會(huì)教育集暨論文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;結(jié)直腸癌的生物治療[A];2009年浙江省腫瘤外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤外科規(guī)范化診治學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

10 萬(wàn)德森;;進(jìn)一步提高結(jié)直腸癌療效的思考[A];2009年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)主任委員 顧晉;分期不精確 致結(jié)直腸癌過(guò)度治療[N];健康報(bào);2012年

2 本報(bào)記者 賈巖;跨線治療成結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

3 本報(bào)記者 賈巖;跨線治療構(gòu)筑結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

4 本報(bào)記者 林琳;結(jié)直腸癌：可以治愈的癌癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

5 記者 張妍　通訊員 熊靜帆 朱品磊;深圳結(jié)直腸癌發(fā)病高于全國(guó)[N];深圳商報(bào);2013年

6 本報(bào)記者 孫剛;預(yù)防結(jié)直腸癌：請(qǐng)管住嘴[N];解放日?qǐng)?bào);2013年

7 上海市中醫(yī)醫(yī)院腫瘤科 侯鳳剛 副主任醫(yī)師;中醫(yī)藥在結(jié)直腸癌治療中的作用和特色[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2014年

8 李華虹 孫瑜淼 記者 李麗云 實(shí)習(xí)生 陰浩;專家呼吁：結(jié)直腸癌應(yīng)多學(xué)科規(guī)范化診療[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

9 ;降低結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)有新療法[N];人民日?qǐng)?bào);2003年

10 韓自力;新化療方案可高效治療結(jié)直腸癌[N];健康報(bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳濤;MicroRNA-31/FIH-1調(diào)控關(guān)系在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 任翡;MYBL2基因在結(jié)直腸癌的表達(dá)及機(jī)制的初步探討[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 吳朋;結(jié)直腸癌中microRNA-615基因甲基化及其生物學(xué)特性探究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 李澤武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因調(diào)控結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 徐興遠(yuǎn);低分子肝素對(duì)結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及相關(guān)機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 梁洪亮;miR-454在結(jié)直腸癌中的功能及其作用機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

7 金鵬;MMR蛋白在雌激素致結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡中的作用及SEPT9檢測(cè)結(jié)直腸癌的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

8 珠珠;云南省Lynch綜合征候選基因標(biāo)志物研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

9 周智航;SEMA3F通過(guò)下調(diào)ASCL2-CXCR4軸而抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 王林;MiRNA-300對(duì)結(jié)直腸癌腫瘤侵襲和增殖的影響及其調(diào)控機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 顏斐斐;術(shù)后結(jié)直腸癌患者癌因性疲乏與影響因素的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

2 李斌;結(jié)直腸癌患者就診延遲分析[D];中南大學(xué);2009年

3 葉建杰;慈溪市結(jié)直腸癌危險(xiǎn)因素病例對(duì)照研究[D];浙江大學(xué);2008年

4 趙波;結(jié)直腸癌危險(xiǎn)因素及臨床流行病學(xué)特征的調(diào)查與分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 宋艷敏;PAQR3基因甲基化水平與結(jié)直腸癌關(guān)系的研究[D];河北大學(xué);2015年

6 黎江;Oct4B1在結(jié)直腸癌干細(xì)胞中的表達(dá)及其與Twist的相關(guān)性研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

7 楊文婷;PD-L1、SIRT1在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

8 羅佳;二代測(cè)序分析散發(fā)性結(jié)直腸癌和息肉的基因突變[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

9 崔慧鵬;精氨酸琥珀酸合成酶（ASS1）高表達(dá)與結(jié)直腸癌惡性進(jìn)展的相關(guān)性研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

10 崔娟娟;p53和nm23在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

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