研究目的:探討槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞體外增殖與凋亡作用的影響,為肝癌的藥物治療提供新的依據。研究方法:(1)細胞培養(yǎng):人肝癌SMMC-7721細胞用含10%胎牛血清的DMEM,在37℃、5%CO₂飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3d更換培養(yǎng)基,取對數(shù)生長期細胞進行后續(xù)實驗。(2)細胞處理及實驗分組:取上述細胞,經胰酶消化后離心,棄上清,用培養(yǎng)液重懸后,調整細胞密度約為1*10⁴個/mL接種于96孔板中,100μL每孔,于37℃、5%CO₂的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜使細胞充分貼壁,將細胞隨機分為6組,對照組細胞不做處理,處理組按加入的槐定堿濃度不同分為5組,槐定堿濃度分別為0.5 mmol/L,1 mmol/L,2 mmol/L,4mmol/L,8mmol/L,每組設6個平行孔。繼續(xù)培養(yǎng)48h后,采用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化。(3)運用CCK8實驗檢測不同濃度槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞增殖的影響。(4)運用流式細胞法檢測不同濃度槐定堿對肝癌SMMC-7721細胞凋亡的影響。(5)運用免疫印跡法檢測凋亡相關蛋白Bcl-...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫索引
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 研究目的及意義
    1.3 實驗技術
    1.4 實驗方案設計
第二章 槐定堿對肝癌細胞SMMC-7721 增殖與凋亡的影響
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.1.1 細胞復蘇
            2.2.1.2 細胞傳代培養(yǎng)
            2.2.1.3 細胞凍存
        2.2.2 實驗分組并通過倒置顯微鏡下觀察不同濃度的槐定堿對肝癌SMMC-7721 細胞形態(tài)學影響
        2.2.3 CCK8 實驗檢測不同濃度槐定堿對SMMC-7721 細胞增殖的影響
        2.2.4 流式細胞術檢測不同濃度槐定堿對SMMC-7721 細胞凋亡的影響
        2.2.5 免疫印跡法檢測不同濃度槐定堿對肝癌細胞凋亡相關蛋白表達水平的影響
        2.2.6 統(tǒng)計學處理
    2.3 實驗結果
        2.3.1 槐定堿對肝癌細胞形態(tài)學的影響
        2.3.2 槐定堿對肝癌細胞增殖的影響
        2.3.3 槐定堿對肝癌細胞凋亡的影響
        2.3.4 槐定堿對肝癌細胞凋亡相關蛋白表達水平的影響
    2.4 討論
    2.5 參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
碩士在讀期間發(fā)表的學術論文



本文編號：3997518