本文關(guān)鍵詞：BRD4在預測非小細胞性肺癌預后中的作用及其機制研究

  更多相關(guān)文章： BRD4 非小細胞性肺癌 增殖 凋亡 侵襲 預后

【摘要】：BRD4是布羅莫結(jié)構(gòu)蛋白BET家族中的一員。跟其他的BET家族成員一樣,BRD4也包含兩個可識別乙酰賴氨酸殘基的布羅莫結(jié)構(gòu)域。BRD4是BET家族中研究得最徹底的一員,研究發(fā)現(xiàn)BRD4通過其布羅莫結(jié)構(gòu)域在很多生物學進程中扮演重要角色。尤為重要的是,研究發(fā)現(xiàn)BRD4的激活表達跟黑色素瘤、肝癌、多發(fā)性骨髓瘤、Burkitt’s淋巴瘤、急性髓性白血病及乳腺癌的生存預后及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。另外,BRD4的異位融合產(chǎn)物BRD4-NUT跟半數(shù)以上侵襲性腫瘤相關(guān)。我們前期的實驗也發(fā)現(xiàn)BRD4與非小細胞性肺癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力關(guān)系密切,因此,BRD4可作為非小細胞性肺癌的一個潛在預后指標。本實驗檢測了BRD4蛋白在非小細胞性肺癌及對應(yīng)癌旁組織中的表達水平,并且利用組織微陣列分析技術(shù),驗證了BRD4蛋白表達水平與非小細胞性肺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系及其預后診斷價值。此外,通過小干擾技術(shù)抑制非小細胞肺癌細胞系中BRD4的蛋白表達后,我們發(fā)現(xiàn)其與非小細胞性肺癌的增殖、侵襲遷移和凋亡密切相關(guān)。因此,我們得出結(jié)論,BRD4具有潛在預后預測價值并可作為靶向治療的新靶點,為非小細胞性肺癌的診治帶來新的曙光。第一部分BRD4在非小細胞性肺癌中高表達目的:探究BRD4蛋白在非小細胞性肺癌及對應(yīng)癌旁組織中的表達情況,初步分析其在非小細胞性肺癌發(fā)生發(fā)展中扮演的角色。方法:qRT-PCR、Western Blot及免疫組化方法檢測BRD4蛋白在非小細胞性肺癌患者癌與對應(yīng)癌旁組織中的表達情況。結(jié)果:上述各方法的結(jié)果一致顯示BRD4在非小細胞性肺癌患者癌組織中的表達量高于其在對應(yīng)癌旁組織中的表達量,兩者間有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:BRD4在非小細胞性肺癌患者癌組織中表達升高,可能在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。第二部分BRD4的預后診斷價值目的:探究BRD4與非小細胞性肺癌臨床參數(shù)的關(guān)系及其預后診斷價值。方法:免疫組化方法檢測208例非小細胞性肺癌患者癌與對應(yīng)癌旁組織中BRD4蛋白的表達情況,用SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析BRD4與肺癌患者臨床參數(shù)及預后的關(guān)系。結(jié)果:研究結(jié)果顯示BRD4蛋白高表達與非小細胞性肺癌患者中的肺鱗癌、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及腫瘤分化程度等密切相關(guān)(P0.05),且BRD4高表達組術(shù)后總體生存期明顯比BRD4低表達組短(P0.05);單因素及多因素分析結(jié)果顯示BRD4蛋白表達是非小細胞性肺癌患者獨立的預后預測因子。結(jié)論:BRD4與非小細胞性肺癌的病理類型、TNM分期、淋巴轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度密切相關(guān),具有預測預后的診斷價值。第三部分BRD4對非小細胞性肺癌細胞生物學行為的影響目的:研究BRD4蛋白表達水平的改變對非小細胞性肺癌細胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力及凋亡的影響。方法:應(yīng)用小干擾技術(shù)下調(diào)BRD4蛋白在非小細胞性肺癌細胞株A549與95-D中的表達,經(jīng)Western Blot、流式細胞術(shù)驗證干擾效率后,應(yīng)用細胞劃痕試驗檢測細胞遷移能力變化,Transwell小室侵襲實驗檢測細胞侵襲能力變化,CCK-8及BrdU免疫熒光檢測細胞增殖能力變化,流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡變化。結(jié)果:vshRNA干擾后A549、95-D細胞株BRD4蛋白表達明顯下調(diào),且BRD4表達下調(diào)伴隨著非小細胞性肺癌細胞增殖、侵襲遷移能力明顯減弱,且凋亡率增加(P0.05)。結(jié)論:BRD4具有促進非小細胞性肺癌細胞增殖、侵襲遷移的能力,且能抑制腫瘤細胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：BRD4 非小細胞性肺癌 增殖 凋亡 侵襲 預后
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 英文縮略詞11-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 BRD4在非小細胞性肺癌組織中高表達14-24
• 2.1 材料與方法14-19
• 2.1.1 材料14-15
• 2.1.1.1 組織標本14
• 2.1.1.2 試劑14-15
• 2.1.1.3 儀器15
• 2.1.2 方法15-19
• 2.1.2.1 組織RNA的提�。═rizol法）15-16
• 2.1.2.2 cDNA的合成（逆轉(zhuǎn)錄法）16
• 2.1.2.3 實時熒光定量PCR16-17
• 2.1.2.4 組織蛋白的提取17
• 2.1.2.5 蛋白免疫印跡17-18
• 2.1.2.6 免疫組織化學18-19
• 2.1.2.7 免疫組化結(jié)果判定19
• 2.2 結(jié)果19-20
• 2.2.1 qRT-PCR、Western Blot檢測BRD4在肺癌及其對應(yīng)癌旁中的表達19-20
• 2.2.2 免疫組化法檢測BRD4在非小細胞性肺癌及其對應(yīng)癌旁中的表達20
• 2.3 討論20-21
• 2.4 結(jié)論21-22
• 2.5 參考文獻22-24
• 第三章 BRD4的預后診斷價值24-31
• 3.1 材料與方法24-25
• 3.1.1 材料24
• 3.1.1.1 組織標本24
• 3.1.1.2 試劑24
• 3.1.1.3 儀器24
• 3.1.2 方法24-25
• 3.1.2.1 組織芯片制作24
• 3.1.2.2 免疫組織化學24
• 3.1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析24-25
• 3.2 結(jié)果25-29
• 3.2.1 組織芯片技術(shù)進一步研究BRD4在肺癌及其癌旁中的表達25
• 3.2.2 本實驗中非小細胞性肺癌患者的臨床病理參數(shù)25-26
• 3.2.3 統(tǒng)計分析BRD4與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系26-27
• 3.2.4 BRD4高表達與非小細胞性肺癌的差預后成正相關(guān)27-28
• 3.2.5 非小細胞性肺癌亞型分析進一步明確BRD4與肺癌患者預后的關(guān)系28-29
• 3.3 討論29-30
• 3.4 結(jié)論30
• 3.5 參考文獻30-31
• 第四章 BRD4對非小細胞性肺癌細胞生物學行為的影響31-43
• 4.1 材料與方法31-35
• 4.1.1 材料31-32
• 4.1.1.1 細胞株31
• 4.1.1.2 細胞培養(yǎng)材料31
• 4.1.1.3 試劑31
• 4.1.1.4 儀器31-32
• 4.1.2 方法32-35
• 4.1.2.1 細胞培養(yǎng)32
• 4.1.2.2 細胞總RNA提取32
• 4.1.2.3 cDNA的合成32
• 4.1.2.4 熒光定量PCR32-33
• 4.1.2.5 細胞蛋白提取33
• 4.1.2.6 蛋白免疫印跡33
• 4.1.2.7 小干擾試驗33
• 4.1.2.8 干擾效果鑒定33-34
• 4.1.2.9 細胞劃痕實驗34
• 4.1.2.10 Transwell小室侵襲實驗34
• 4.1.2.11 流式細胞凋亡檢測34-35
• 4.1.2.12 腫瘤細胞增殖能力檢測35
• 4.1.2.13 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析35
• 4.2 結(jié)果35-40
• 4.2.1 非小細胞性肺癌細胞系中BRD4的表達情況35-36
• 4.2.2 BRD4干擾效果檢測36-37
• 4.2.3 BRD4對腫瘤細胞遷移能力的影響37-38
• 4.2.4 BRD4對腫瘤細胞侵襲能力的影響38-39
• 4.2.5 BRD4對腫瘤細胞凋亡的影響39
• 4.2.6 BRD4對細胞增殖能力的影響39-40
• 4.3 討論40-41
• 4.4 結(jié)論41
• 4.5 參考文獻41-43
• 致謝43-44
• 攻讀學位期間的研究成果44-45
• 綜述45-54
• 參考文獻51-54

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡華成,任少華;非小細胞性肺癌的治療近況[J];實用內(nèi)科雜志;1991年01期

2 Eckart Laack,Dieter Kurt Hossfeld,廖永德;非小細胞性肺癌的治療[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2000年06期

3 王艷;靶向治療——非小細胞性肺癌的新療法[J];中華醫(yī)學信息導報;2005年03期

4 何偉鳳;;中西醫(yī)結(jié)合治療晚期非小細胞性肺癌30例臨床觀察[J];中醫(yī)藥導報;2011年06期

5 Halmes EC ,王風展 ,包興才;非小細胞性肺癌的輔助治療[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1993年02期

6 劉江,王穎,孫黎飛,李勇;P~(53)蛋白表達與非小細胞性肺癌的臨床關(guān)系[J];前衛(wèi)醫(yī)藥雜志;1997年01期

7 李育強,張紅梅;老君仙靈芝口服液配合化療治療中晚期非小細胞性肺癌56例臨床研究[J];中國腫瘤生物治療雜志;1997年03期

8 李育強,程建淵,李寶華;老君仙靈芝口服液配合化療治療中晚期非小細胞性肺癌56例[J];山東醫(yī)藥;1998年03期

9 張石峰;崔建華;彭勇;吳瓊輝;黎亞芳;;中西醫(yī)結(jié)合治療中晚期非小細胞性肺癌臨床療效觀察[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2013年10期

10 羅平 ,譚麗娟;非小細胞性肺癌患者血清硫酸粘多糖片段的檢測及其臨床意義[J];廣西醫(yī)學;2003年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 毛偉敏;;老年及高齡非小細胞性肺癌治療中的問題與對策[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學會腫瘤專業(yè)委員會第六次學術(shù)年會暨省級繼續(xù)教育學習班資料匯編[C];2005年

2 關(guān)金芳;王大慶;鄧新娜;;晚期非小細胞性肺癌治療新進展(英文)[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文集[C];2006年

3 于保法;關(guān)長江;馬振祿;張敬泉;楊光明;;緩釋庫療法加放療治療晚期非小細胞性肺癌回顧性分析[A];2007第六屆全國放射腫瘤學學術(shù)年會論文集[C];2007年

4 牛立志;郭子倩;周強;徐克成;;不能手術(shù)切除非小細胞性肺癌的多療法序貫治療——85例前瞻性研究[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會第十五次全國消化系統(tǒng)疾病學術(shù)研討會論文匯編[C];2003年

5 牛立志;何衛(wèi)兵;郭子倩;張述平;劉超英;賀軼松;左建生;徐克成;;經(jīng)皮冷消融治療局部進展型非小細胞性肺癌[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會第十六次全國消化系統(tǒng)疾病學術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 本報記者 楊博;歐盟七年來首次批準抗胰腺癌新藥[N];中國證券報;2014年

2 袁松范;Aventis公司上半年銷售增長21%[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2000年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 廖云飛;BRD4在預測非小細胞性肺癌預后中的作用及其機制研究[D];南昌大學;2016年

2 夏文進;人類XRCC3-241單核苷酸多態(tài)性與肺癌的易感性研究[D];浙江大學;2008年

3 張毅敏;非小細胞性肺癌ERCC1的表達與生存的關(guān)系研究[D];浙江大學;2008年

4 廖琴;磁共振擴散加權(quán)成像及ADC值測量對非小細胞性肺癌肺門縱隔淋巴結(jié)的鑒別診斷價值[D];南昌大學;2011年

，

本文編號：758620