胡椒堿通過線粒體通路誘導(dǎo)人胃癌BGC-823細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:胡椒堿通過線粒體通路誘導(dǎo)人胃癌BGC-823細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
更多相關(guān)文章: 胡椒堿 人胃癌細(xì)胞株BGC-823 細(xì)胞抑制 細(xì)胞凋亡 線粒體凋亡通路
【摘要】:研究目的:本實驗旨在探討胡椒堿對人胃癌細(xì)胞株BGC-823的抑制作用誘導(dǎo)及其驗證其是否可能通過線粒體凋亡通路誘導(dǎo)凋亡;研究方法:①采用四甲基偶氮唑藍(lán)顯色法,檢測胡椒堿對體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞株BGC-823不同濃度的增殖能力的抑制作用及其時間的相關(guān)性;②采用劃痕實驗法檢測胡椒堿對體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞株BGC-823遷移能力的影響及其時間相關(guān)性;③采用小室侵襲實驗檢測胡椒堿對體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞株BGC-823侵襲能力的影響及其時間相關(guān)性;④采用流式細(xì)胞儀檢測胡椒堿對人胃癌細(xì)胞株BGC-823凋亡的影響及其濃度相關(guān)性;⑤采用羅丹明檢測法胡椒堿對人胃癌細(xì)胞株BGC-823線粒體電位變化的影響及其濃度相關(guān)性;⑥采用RT-PCR檢測法檢測胡椒堿對人胃癌細(xì)胞株BGC-823線粒體凋亡通路上相關(guān)基因的表達(dá)及其濃度相關(guān)性;⑦運(yùn)用Western法檢測胡椒堿對線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白表達(dá)的干預(yù)及其濃度相關(guān)性。研究結(jié)果:①胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823后,細(xì)胞的增殖的能力明顯減小,并且呈濃度依賴性及時間相關(guān)性;②胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823后,人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞的遷移能力明顯下降,并且呈現(xiàn)濃度依賴性及時間相關(guān)性;③胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823后,穿越transwell小室的細(xì)胞數(shù)量較對照組明顯減少,其侵襲抑制率呈明顯的濃度依賴性及時間相關(guān)性;④胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823 2 4h后出現(xiàn)明顯的細(xì)胞凋亡,并呈一定的濃度依賴性;⑤胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823 24h后,線粒體電位明顯下降,并呈濃度依賴性;⑥胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823 24h后,細(xì)胞線粒體通路凋亡相關(guān)基因Bax、Bak隨著胡椒堿濃度升高,其表達(dá)量越高;Bcl-2、Survivin隨著胡椒堿濃度的升高,其表達(dá)量越低;⑦胡椒堿作用于人胃癌細(xì)胞株BGC-823 24h后,線粒體凋亡通路相關(guān)蛋白Bax、 cleave-caspase9隨胡椒堿濃度濃度升高,其表達(dá)量越高;Bcl-2、隨著胡椒堿濃度升高,其表達(dá)量越低;研究結(jié)論:胡椒堿能抑制人胃癌細(xì)胞株BGC-823增殖,遷移及侵襲能力;胡椒堿可誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞凋亡;胡椒堿誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞株BGC-823凋亡可能是通過線粒體通路實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:胡椒堿 人胃癌細(xì)胞株BGC-823 細(xì)胞抑制 細(xì)胞凋亡 線粒體凋亡通路
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.2
【目錄】:
- 摘要8-10
- Abstract10-12
- 前言12-13
- 第一章 理論研究13-17
- 1. 胃癌發(fā)病的病因病機(jī)14-15
- 1.1 脾陽虛弱14
- 1.2 瘀血內(nèi)結(jié)14
- 1.3 癌毒14-15
- 2. 胡椒堿藥理學(xué)研究進(jìn)展15-17
- 2.1 抗氧化作用15
- 2.2 對消化系統(tǒng)的作用15
- 2.3 抗抑郁作用15-16
- 2.4 調(diào)節(jié)免疫的作用16
- 2.5 藥代動力學(xué)16
- 2.6 胡椒堿的構(gòu)效關(guān)系研究16-17
- 第二章 實驗研究17-38
- 1. MTT法檢測胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823增殖的抑制作用17-20
- 1.1 實驗材料17-18
- 1.2 方法及步驟18
- 1.3 結(jié)果18-20
- 1.4 討論20
- 2. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823遷移能力的影響20-22
- 2.1 實驗材料20
- 2.2 方法及步驟20
- 2.3 結(jié)果20-22
- 2.4 討論22
- 3. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823侵襲能力的影響22-26
- 3.1 實驗材料22-23
- 3.2 方法及步驟23
- 3.3 結(jié)果23-26
- 3.4 討論26
- 4. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823凋亡的影響26-28
- 4.1 實驗材料26
- 4.2 方法及步驟26-27
- 4.3 結(jié)果27-28
- 4.4 討論28
- 5. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823線粒體電位的影響28-30
- 5.1 實驗材料28
- 5.2 方法及步驟28-29
- 5.3 結(jié)果29-30
- 5.4 討論30
- 6. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823線粒體凋亡通路相關(guān)基因的表達(dá)影響30-32
- 6.1 實驗材料30
- 6.2 方法及步驟30-31
- 6.3 結(jié)果31-32
- 6.4 討論32
- 7. 胡椒堿體外對人胃癌細(xì)胞株BGC-823凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)的影響32-38
- 7.1 實驗材料32-34
- 7.2 方法與步驟34-35
- 7.3 結(jié)果35-36
- 7.4 討論36-38
- 第三章 討論38-42
- 1 中藥抗胃癌作用的研究思路與方法概述38-39
- 1.1 實驗類型分類38
- 1.2 中藥類型38-39
- 1.3 按研究思路來源分類39
- 1.4 按研究目的進(jìn)行分類39
- 2. 胡椒堿抑制人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞凋亡的作用及相關(guān)機(jī)制39-41
- 2.1 胡椒堿對胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞增殖的抑制作用39-40
- 2.2 胡椒堿對人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞遷移能力的影響40
- 2.3 胡椒堿對胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞侵襲能力的抑制作用40
- 2.4 胡椒堿對胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞凋亡的影響40
- 2.5 胡椒堿對胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞線粒體電位變化的影響40-41
- 2.6 胡椒堿對胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞線粒體凋亡通路相關(guān)基因及蛋白的表達(dá)影響41
- 3. 本研究的創(chuàng)新點及意義41
- 4. 問題與展望41-42
- 第四章 結(jié)語42-43
- 參考文獻(xiàn)43-46
- 附錄46-48
- 附錄1 部分英文縮寫語的中英文對照46-47
- 附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果47-48
- 致謝48
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