本文關(guān)鍵詞：Msi-1在大腸癌細(xì)胞中的作用及與大腸腫瘤病理特征的相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： Msi1 Msi-1 Musashi-1 大腸癌 大腸腫瘤 侵襲轉(zhuǎn)移 臨床

【摘要】：目的:研究大腸癌組織中Msi-1基因的表達(dá)情況,結(jié)合所收集病人的病理特征,進(jìn)一步明確Msi-1基因與大腸癌生長(zhǎng)的關(guān)系。探討沉默Msi-1基因表達(dá)對(duì)人大腸癌LOVO細(xì)胞周期、增殖、凋亡、侵襲與轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性的作用及其機(jī)制的影響。方法:培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞HT-29、DLD-1、LOVO,篩選出表達(dá)適中的細(xì)胞;針對(duì)Msi-1mRNA序列設(shè)計(jì)合成干擾RNA,轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞,流式細(xì)胞儀觀察轉(zhuǎn)染效率,熒光定量PCR和Western Blot方法檢測(cè)基因干擾后Msi-1 mRNA和蛋白的表達(dá)。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖,Transwell腫瘤細(xì)胞遷移侵襲試驗(yàn),分析沉默后腫瘤增殖、遷移侵襲的差異性;流式細(xì)胞機(jī)器測(cè)定Msi-1基因沉默后的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的狀況。Western blot檢測(cè)OPN蛋白、CD44及與Msi-1的共表達(dá)情況。結(jié)果:免疫組化顯示結(jié)直腸癌組織中的Msi-1表達(dá)含量比正常大腸粘膜中Msi-1的表達(dá)量增加很多。LOVO細(xì)胞中Msi-1基因的表達(dá)量適中,干擾RNA序列621組的沉默效率最高,轉(zhuǎn)染干擾序列后,Msi-1基因在RNA水平和蛋白水平的表達(dá)明顯下降,大腸癌細(xì)胞LOVO在干擾后,細(xì)胞增殖能力、遷移能力和侵襲能力均明顯下降,大腸癌細(xì)胞中OPN及CD44在RNA水平和蛋白水平表達(dá)均下調(diào)。結(jié)論:利用siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,可發(fā)現(xiàn)大腸癌LOVO細(xì)胞中Msi-1基因的表達(dá)明顯受到抑制。Msi-1基因被沉默后,可抑制人大腸癌LOVO細(xì)胞生長(zhǎng),促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的凋亡,使細(xì)胞周期G0/G1期的細(xì)胞增多,具有遏制作用,還在大腸癌轉(zhuǎn)移中起到一定的作用。
【關(guān)鍵詞】：Msi1 Msi-1 Musashi-1 大腸癌 大腸腫瘤 侵襲轉(zhuǎn)移 臨床
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 主要符號(hào)表8-9
• 第一章 前言9-10
• 第二章 材料與方法10-18
• 2.1 儀器與試劑10-11
• 2.2 方法11-18
• 第三章 結(jié)果18-26
• 3.1 Msi-1 在大腸癌中的表達(dá)18
• 3.2 大腸癌中Msi-1的表達(dá)情況與病理特性的聯(lián)系18-19
• 3.3 Western Blot檢測(cè)大腸癌組織中Msi-1 蛋白的表達(dá)19-20
• 3.4 RT-PCR測(cè)三種大腸癌細(xì)胞的mRNA表達(dá)20
• 3.5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率20-21
• 3.6 實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)siRNA沉默效率21
• 3.7 流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞凋亡和周期21-23
• 3.8 CCK-8實(shí)驗(yàn)23
• 3.9 Transwell實(shí)驗(yàn)測(cè)侵襲和遷移23
• 3.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot測(cè)相關(guān)基因23-26
• 第四章 討論26-31
• 第五章 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文36-37
• 致謝37

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：751397