發(fā)布時間：2017-08-25 22:11

  本文關(guān)鍵詞：CastPCR法檢測EGFR驅(qū)動突變在肺癌中的初步應(yīng)用探討

  更多相關(guān)文章： 肺癌 個體化治療 體細胞突變 EGFR基因 castPCR

【摘要】：目的：非小細胞肺癌患者的EGFR基因突變狀態(tài)是臨床使用EGFR TKIs的重要療效預(yù)測分子標志物。因此,臨床治療前對肺癌患者進行基因突變檢測,可指導(dǎo)患者個體化用藥,減輕患者經(jīng)濟負擔,同時也可使EGFR TKIs的療效最大化。在治療過程中如能對患者的EGFR突變狀態(tài)實時監(jiān)測,有利于早期療效及預(yù)后判斷。臨床上穩(wěn)定、高效的分子檢測平臺的建立是實現(xiàn)上述目標的關(guān)鍵所在。本實驗的主要目的：采用castPCR方法檢測腫瘤組織EGFR基因突變,研究初治肺腺癌患者EGFR基因突變狀況,初步系統(tǒng)評價castPCR法檢測]EGFR突變在NSCLC患者中的應(yīng)用價值并探討其與患者臨床生物學(xué)行為的相關(guān)性。由于部分晚期腫瘤患者難以取得合適的腫瘤組織標本進行分子檢測,以及在EGFR TKIs治療中獲得性耐藥的存在,外周血清/血漿中的游離核酸以其蘊含的豐富分子生物學(xué)信息吸引了廣泛關(guān)注。本研究中采用已知的突變細胞系DNA模擬外周血檢測的情況,初步分析論證了castPCR法檢測EGFR相關(guān)突變位點的敏感性,為后續(xù)基于肺癌患者外周血游離核酸中EGFR驅(qū)動突變的檢測奠定了基礎(chǔ)。方法：1、收集2010年11月至2014年12月南京大學(xué)附屬鼓樓醫(yī)院103例初治的肺腺癌患者的臨床病理資料、腫瘤組織及配對的治療前外周血標本。使用castPCR法檢測患者腫瘤組織標本EGFR基因突變(外顯子19 de12235-2249和de12236-2250；外顯子20 T790M；外顯子21 L858R)。探討EGFR基因突變狀態(tài)與103例NSCLC患者臨床生物學(xué)行為之間的相關(guān)性。2、將EGFR基因突變細胞DNA按照一定比例稀釋到EGFR野生型DNA中,用castPCR法檢測突變,獲得檢測EGFR基因突變的敏感性。為后續(xù)檢測血漿游離核酸中EGFR驅(qū)動突變奠定基礎(chǔ)。結(jié)果：103例肺腺癌患者腫瘤組織中共有54例檢出了存在至少一個位點的EGFR基因突變(突變率52.43%),其中敏感突變(外顯子19和／或外顯子21)為45人(43.69%),外顯子20突變?yōu)?1人(10.68%)。同時我們的研究發(fā)現(xiàn)部分患者存在敏感突變與敏感突變、敏感突變與耐藥突變共存的現(xiàn)象,其中外顯子19和20共突變2人,外顯子19和21共突變4人,外顯子20和21共突變1人。體外細胞實驗表明castPCR法檢測EGFR基因外顯子19和外顯子21突變的敏感性為0.1%,外顯子20突變的敏感性為1%。結(jié)論：本實驗我們采用靈敏性高、特異性好的方法,通過對103例肺腺癌患者腫瘤組織EGFR基因突變狀態(tài)的檢測,初步論證了該方法在肺癌EGFR驅(qū)動突變檢測方面的臨床可行性。同時,通過對模擬外周血游離核酸中微量突變存在的檢測,證實了該方法后續(xù)進一步檢測患者配對血漿游離核酸中EGFR突變的可行性。
【關(guān)鍵詞】：肺癌 個體化治療 體細胞突變 EGFR基因 castPCR
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 常用英文縮略詞5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 緒論10-20
• 前言10
• 惡性腫瘤的個體化治療10-16
• 參考文獻16-20
• 第一部分 CastPCR法檢測肺腺癌患者腫瘤組織EGFR基因突變20-38
• 前言20-23
• 材料和方法23-27
• 結(jié)果27-30
• 討論30-34
• 參考文獻34-38
• 第二部分 CastPCR法檢測游離核酸中驅(qū)動突變的探討38-50
• 前言38-39
• 材料和方法39-44
• 結(jié)果和討論44-48
• 參考文獻48-50
• 全文總結(jié)50-51
• 綜述51-63
• 參考文獻58-63
• 研究生期間發(fā)表的文章63-64
• 致謝64-65

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本文編號：738403