本文關(guān)鍵詞：基于工具酶及納米材料的新型腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法研究

  更多相關(guān)文章： 腫瘤細(xì)胞 過(guò)氧化物模擬酶 前列腺特異性抗原 生物傳感器 DNA機(jī)器

【摘要】：在惡性腫瘤的臨床篩查和診斷中,腫瘤細(xì)胞和腫瘤標(biāo)志物的早期高靈敏檢測(cè)十分重要。構(gòu)建針對(duì)腫瘤疾病的特異性生物傳感器具有很多如簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)良特性,因此被廣泛地用于小分子蛋白、核酸、大分子蛋白甚至是腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)。新型的具有類過(guò)氧化物活性的納米材料有易于儲(chǔ)存、成本低、高的底物專一性、高催化活性等優(yōu)良性能,加之DNA具有化學(xué)穩(wěn)定性好、容易標(biāo)記,以及序列可設(shè)計(jì)等優(yōu)勢(shì),把它們用于生物傳感器構(gòu)建吸引了越來(lái)越多的學(xué)者高度關(guān)注。本論文致力于運(yùn)用電化學(xué)方法和熒光法作為檢測(cè)手段,基于具有類過(guò)氧化物酶活性的復(fù)合納米材料還有核酸工具酶、DNA擴(kuò)增技術(shù),構(gòu)建基于新型類過(guò)氧化物酶復(fù)合材料及DNA工具酶多重等溫循環(huán)策略的新型的生物傳感器用于腫瘤細(xì)胞和腫瘤標(biāo)志物的高靈敏檢測(cè)。本論文主要包括以下內(nèi)容:1.基于石墨烯、鐵卟啉、金納米棒的新型類過(guò)氧化物酶復(fù)合材料用于細(xì)胞表面糖基的高靈敏檢測(cè)本文利用簡(jiǎn)單方法合成了一種新穎的具有類過(guò)氧化物酶活性的石墨烯家族三重復(fù)合物。這種基于石墨烯的三重復(fù)合物首次被報(bào)道,且其表面修飾富有大量正電荷的金納米棒,通過(guò)石墨烯的優(yōu)良電子轉(zhuǎn)移性能及三種材料的協(xié)同作用,大大提高了石墨烯家族納米材料類過(guò)氧化酶的催化活性。實(shí)驗(yàn)表明這種方法合成的石墨烯三重復(fù)合物(H-RGO-Au NRs)與單純石墨烯(GO),石墨烯-鐵卟啉復(fù)合物(H-RGO)以及表面修飾球形納米金結(jié)構(gòu)的H-RGO-Au納米材料復(fù)合物相比具有更好的電催化性能。將這種過(guò)氧化物模擬酶用于K562細(xì)胞表面糖基的檢測(cè),獲得了低至10個(gè)細(xì)胞的低檢測(cè)限。此項(xiàng)發(fā)現(xiàn)提供了一種新的合成具有類過(guò)氧化物酶活性的石墨烯類功能復(fù)合納米材料的新方法,并有希望廣泛應(yīng)用于簡(jiǎn)單、靈敏和高選擇性的生物傳感器的構(gòu)建中,通過(guò)H2O2的簡(jiǎn)單催化反應(yīng)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)外的核酸、蛋白等重要生命物質(zhì)。2.基于DNA多重等溫循環(huán)放大策略靈敏檢測(cè)前列腺特異性抗原前列腺特異性抗原(PSA),是用于前列腺癌的術(shù)前診斷最重要的血清生物標(biāo)志物。本文提出了一種簡(jiǎn)單的基于DNA多重等溫循環(huán)反應(yīng)的放大策略,用于靈敏檢測(cè)PSA。DNA多重等溫循環(huán)放大策略與未使用相比其檢出限降低了400多倍,并且這種方法可以實(shí)現(xiàn)大多數(shù)沒(méi)有相應(yīng)適體的蛋白質(zhì)生物分子標(biāo)志物的檢測(cè)。這種策略已經(jīng)應(yīng)用到蛋白質(zhì)抗原的檢測(cè),并發(fā)展成一種非常簡(jiǎn)單便利的檢測(cè)PSA抗原的傳感方法。這種傳感方法不僅避免了納米材料合成的復(fù)雜和不穩(wěn)定性,而且有很強(qiáng)的放大效應(yīng)。此項(xiàng)發(fā)現(xiàn)提供了一種非常有發(fā)展前景的方法,運(yùn)用DNA多重等溫循環(huán)放大策略,通過(guò)改變相應(yīng)的抗體,也可以應(yīng)用到人體血清的其他抗原的檢測(cè)。在精確微創(chuàng)臨床診斷學(xué)中,為人類血清蛋白的檢測(cè)提供了一種高智能傳感策略。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤細(xì)胞 過(guò)氧化物模擬酶 前列腺特異性抗原 生物傳感器 DNA機(jī)器
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R730.43
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 第一章 緒論10-33
• 1.1 腫瘤標(biāo)志物10-11
• 1.2 納米材料11-22
• 1.2.1 基于納米材料的生物傳感器及其在腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用12-14
• 1.2.2 具有模擬酶功能的納米材料14-16
• 1.2.3 基于具有模擬酶功能的納米材料的傳感器16-22
• 1.2.3.1 基于模擬酶功能的石墨烯復(fù)合物傳感器16-19
• 1.2.3.2 基于模擬酶功能的碳納米管傳感器19-20
• 1.2.3.3 基于磁性納米材料模擬酶的傳感器20-22
• 1.3 DNA工具酶和基于DNA工具酶的信號(hào)放大22-26
• 1.4 本論文的研究目的、意義26-28
• 參考文獻(xiàn)28-33
• 第二章 基于石墨烯、hemin、金納米棒的新型類過(guò)氧化物酶復(fù)合材料用于細(xì)胞表面糖基的高靈敏檢測(cè)33-55
• 2.1 引言33-34
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備34-35
• 2.2.1 試劑與材料34-35
• 2.2.2 主要儀器設(shè)備35
• 2.3 實(shí)驗(yàn)部分35-39
• 2.3.1 細(xì)胞的培養(yǎng)及處理35
• 2.3.2 石墨烯三重復(fù)合物(H-RGO-Au NRs)的制備35-36
• 2.3.3 探針(Con A-H-RGO-Au NRs)的制備36-37
• 2.3.4 金電極金納米薄膜 (AuNF) 的制備37
• 2.3.5 生物傳感器的制備37-38
• 2.3.6 單糖抑制試驗(yàn)38-39
• 2.3.7 電化學(xué)檢測(cè)39
• 2.4 結(jié)果與討論39-50
• 2.4.1 石墨烯三重復(fù)合物(H-RGO-Au NRs)的表征39-41
• 2.4.2 H-RGO-Au NRs的類過(guò)氧化物酶活性的檢測(cè)41-44
• 2.4.3 生物傳感器構(gòu)建過(guò)程中的電化學(xué)表征44-46
• 2.4.4 構(gòu)建生物傳感器條件的優(yōu)化46-47
• 2.4.5 傳感器對(duì)細(xì)胞濃度的定量檢測(cè)47-48
• 2.4.6 傳感器對(duì)的特異性48-50
• 2.5 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 第三章 基于DNA多重等溫循環(huán)放大策略靈敏檢測(cè)前列腺特異性抗原55-72
• 3.1 引言55-56
• 3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備56-58
• 3.2.1 試劑與材料56-57
• 3.2.2 主要儀器設(shè)備57-58
• 3.3 實(shí)驗(yàn)部分58-59
• 3.3.1 金電極上的三明治夾心免疫反應(yīng)58
• 3.3.2 Nb.BtSI的固定與DNA機(jī)器的操作58
• 3.3.3 熒光測(cè)量和電化學(xué)檢測(cè)58-59
• 3.4 結(jié)果與討論59-66
• 3.4.1 傳感機(jī)制的構(gòu)建59-60
• 3.4.2 傳感器的可行性和選擇性60-62
• 3.4.3 構(gòu)建傳感器條件的優(yōu)化62-63
• 3.4.4 傳感器對(duì)PSA的檢測(cè)63-64
• 3.4.5 實(shí)際樣品的檢測(cè)64-65
• 3.4.6 對(duì)比實(shí)驗(yàn)65-66
• 3.5 結(jié)論66-68
• 參考文獻(xiàn)68-72
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果72-73
• 致謝73

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1 楊輝;劉超;;納米材料毒理學(xué)研究進(jìn)展[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2007年03期

2 田志環(huán);;納米材料的毒理學(xué)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2008年18期

3 李淼;金義光;;納米材料毒性的體外評(píng)價(jià)[J];國(guó)際藥學(xué)研究雜志;2010年01期

4 王翔,閆蕾,賈光,王生;納米材料潛在健康影響的研究進(jìn)展[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;2005年01期

5 黎燕;盧偉;;納米材料生物安全性評(píng)價(jià)的研究進(jìn)展[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);2007年03期

6 張靜姝;喬珊珊;;納米材料風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)影響因素的研究進(jìn)展[J];中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué);2007年04期

7 夏萍萍;郭新彪;;納米材料安全性的國(guó)內(nèi)外研究動(dòng)向[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2007年05期

8 賈光;鄭玉新;;充分認(rèn)識(shí)納米材料安全性研究的重要意義[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2007年02期

9 劉揚(yáng);高愈希;吳剛;陳春英;;典型納米材料生物效應(yīng)及其毒理學(xué)研究的進(jìn)展[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2007年02期

10 王虎中;喬學(xué)亮;王翔;郭家平;石詠梅;唐瑛;王早堂;;脫鈣牙納米材料的制備與細(xì)胞毒性研究[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年11期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王少?gòu)?qiáng);邱化玉;;納米材料在造紙領(lǐng)域中的應(yīng)用[A];'2006（第十三屆）全國(guó)造紙化學(xué)品開(kāi)發(fā)應(yīng)用技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

2 宋云揚(yáng);余濤;李艷軍;;納米材料的毒理學(xué)安全性研究進(jìn)展[A];2010中國(guó)環(huán)境科學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集(第四卷)[C];2010年

3 ;全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（上卷）[C];2001年

4 鐘家湘;葛雄章;劉景春;;納米材料改造傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)的實(shí)踐與建議[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（上卷）[C];2001年

5 高善民;孫樹(shù)聲;;納米材料的應(yīng)用及科研開(kāi)發(fā)[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（上卷）[C];2001年

6 ;全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第二屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（下卷）[C];2001年

7 金一和;孫鵬;張穎花;;納米材料的潛在性危害問(wèn)題[A];中國(guó)毒理學(xué)通訊[C];2001年

8 張一方;呂毓松;任德華;陳永康;;納米材料的二種制備方法及其特征[A];第四屆中國(guó)功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2001年

9 古宏晨;;納米材料產(chǎn)業(yè)化重大問(wèn)題及共性問(wèn)題[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第三屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（上卷）[C];2003年

10 馬玉寶;任憲福;;納米科技與納米材料[A];納米材料和技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展——全國(guó)第三屆納米材料和技術(shù)應(yīng)用會(huì)議論文集（上卷）[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 記者 周建人;我國(guó)出臺(tái)首批納米材料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[N];中國(guó)建材報(bào);2005年

2 記者 王陽(yáng);上海形成納米材料測(cè)試服務(wù)體系[N];上�？萍紙�(bào);2004年

3 ;納米材料七項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái)[N];世界金屬導(dǎo)報(bào);2005年

4 通訊員 韋承金邋記者 馮國(guó)梧;納米材料也可污染環(huán)境[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

5 廖聯(lián)明;納米材料 利弊皆因個(gè)頭小[N];健康報(bào);2009年

6 盧水平;院士建議開(kāi)展納米材料毒性研究[N];中國(guó)化工報(bào);2009年

7 郭良宏 中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心研究員 江桂斌 中國(guó)科學(xué)院院士;納米材料的環(huán)境應(yīng)用與毒性效應(yīng)[N];中國(guó)社會(huì)科學(xué)報(bào);2010年

8 記者 任雪梅　莫璇;中科院納米材料產(chǎn)業(yè)園落戶佛山[N];佛山日?qǐng)?bào);2011年

9 實(shí)習(xí)生 高敏;納米材料：小身材涵蓋多領(lǐng)域[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

10 本報(bào)記者 李軍;納米材料加速傳統(tǒng)行業(yè)升級(jí)[N];中國(guó)化工報(bào);2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊楊;功能化稀土納米材料的合成及其生物成像應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 王艷麗;基于氧化鈦和氧化錫納米材料的制備及其在能量存儲(chǔ)中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 吳勇權(quán);含銪稀土納米材料的功能化及其生物成像應(yīng)用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 曹仕秀;二硫化鎢(WS_2)納米材料的水熱合成與光吸收性能研究[D];重慶大學(xué);2015年

5 廖蕾;基于功能納米材料的電化學(xué)催化研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 胥明;一維氧化物、硫化物納米材料的制備，，功能化與應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 李淑煥;納米材料親疏水性的實(shí)驗(yàn)測(cè)定與計(jì)算預(yù)測(cè)[D];山東大學(xué);2015年

8 范艷斌;亞細(xì)胞水平靶向的納米材料的設(shè)計(jì)、制備與應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

9 丁泓銘;納米粒子與細(xì)胞相互作用的理論模擬研究[D];南京大學(xué);2015年

10 駱凱;基于金和石墨烯納米材料的生物分子化學(xué)發(fā)光新方法及其應(yīng)用[D];西北大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 向蕓頡;卟啉納米材料的制備及其應(yīng)用研究[D];重慶大學(xué);2010年

2 張潔;ZnO基納米材料的制備及其性質(zhì)研究[D];安徽大學(xué);2015年

3 溫俊濤;磷化鈷納微米材料的合成及性能研究[D];陜西科技大學(xué);2015年

4 張洲;電荷轉(zhuǎn)移鹽雜化納米材料的可控制備和性質(zhì)的研究[D];燕山大學(xué);2015年

5 韓林;鉑基異質(zhì)結(jié)構(gòu)納米材料及其電催化性能[D];中國(guó)地質(zhì)大學(xué)(北京);2015年

6 程莎;可控形貌氧化鋁的制備及吸附性能的研究[D];陜西科技大學(xué);2015年

7 陳中輝;聚合物納米材料的合成及其對(duì)有機(jī)染料吸附性能的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

8 宋懿朋;一種多功能聚合物納米材料的生物學(xué)效應(yīng)的研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢物理與數(shù)學(xué)研究所);2015年

9 張文濤;食品功能因子/二維納米材料復(fù)合物的制備及其抗腫瘤活性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

10 萬(wàn)丹;基于功能性納米材料的肽組學(xué)富集及蛋白質(zhì)高效酶解的新方法研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

本文編號(hào)：736006