發(fā)布時(shí)間：2017-08-25 04:34

  本文關(guān)鍵詞：RACK1在胃癌組織中的表達(dá)及其對胃癌細(xì)胞生長增殖的影響與機(jī)制探討

  更多相關(guān)文章： 蛋白激酶1活化受體RACK1 β-catenin Wee1 胃癌 HGC27細(xì)胞

【摘要】：目的研究蛋白激酶1活化受體(Receptor of activated C Kinase 1,RACK1),在胃癌組織中的表達(dá)及其與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。探討RACK1過表達(dá)對胃癌細(xì)胞生長增殖的影響與作用機(jī)制。本研究可望為尋找胃癌新的治療靶點(diǎn)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法1、采用免疫組化SP法檢測RACK1和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)在70例胃癌組織標(biāo)本中的表達(dá)水平以及在30例距癌組織邊緣10cm以上的癌旁胃組織中的表達(dá)水平,分析RACK1在胃癌組織標(biāo)本中的表達(dá)情況及其與胃癌臨床病理特征的關(guān)系。2、體外培養(yǎng)人低分化胃癌細(xì)胞株HGC27,通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù)過表達(dá)RACK1基因,觀察RACK1基因上調(diào)對胃癌細(xì)胞株生長增殖的影響。轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)分為未處理組、空載體轉(zhuǎn)染組、RACK1基因轉(zhuǎn)染組。采用MTT法檢測各組細(xì)胞增殖情況。采用RT-PCR和Western blot方法分別檢測各組細(xì)胞RACK1和Wee1基因m RNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。3、免疫共沉淀證實(shí)RACK1與Wee1在胃癌細(xì)胞內(nèi)是否存在相互作用。間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)觀察RACK1與Wee1在HGC27胃癌細(xì)胞內(nèi)是否存在共定位。結(jié)果1、RACK1在胃癌組織中的表達(dá)水平明顯低于癌旁正常胃組織(p0.05),且表達(dá)水平的高低與TNM分期、腫瘤的分化程度、以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。2、β-catenin膜表達(dá)的缺失率也與胃癌組織的分化程度、TNM分期以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),且Rack1和β-catenin呈顯著負(fù)相關(guān)。3、胃癌細(xì)胞HGC27中RACK1的m RNA和蛋白表達(dá)水平明顯低于正常胃黏膜細(xì)胞GESY,過表達(dá)RACK1基因可下調(diào)Wee1蛋白表達(dá),并抑制HGC27胃癌細(xì)胞株生長增殖。4、免疫共沉淀證實(shí)RACK1與Wee1在胃癌細(xì)胞內(nèi)存在相互作用,免疫熒光觀察RACK1與Wee1共定位在HGC27胃癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。結(jié)論1、RACK1在胃癌組織中的異常表達(dá)可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān),本研究提示低表達(dá)RACK1可能是胃癌預(yù)后不良的一個(gè)重要指標(biāo)。2、過表達(dá)RACK1抑制人低分化HGC27胃癌細(xì)胞株的生長增殖,其機(jī)制可能與RACK1和Wee1相互作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：蛋白激酶1活化受體RACK1 β-catenin Wee1 胃癌 HGC27細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語8-9
• 前言9-10
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-26
• 結(jié)果26-35
• 討論35-37
• 結(jié)論37-38
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 附錄42-57
• 一、文獻(xiàn)綜述 支架蛋白R(shí)ACK1的生物學(xué)功能及其與腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展42-54
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 二、在學(xué)期間科研成績54-55
• 三、致謝55-56
• 四、個(gè)人簡歷56-57

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本文編號(hào)：735101