發(fā)布時(shí)間：2017-08-24 20:28

  本文關(guān)鍵詞：姜黃素對(duì)5-FU誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡作用的增強(qiáng)效應(yīng)與機(jī)理研究

  更多相關(guān)文章： 姜黃素 5-FU 胃癌 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期 實(shí)驗(yàn)研究

【摘要】：目的1.探討姜黃素與5-FU聯(lián)合應(yīng)用對(duì)體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用;了解一定劑量姜黃素與較低劑量5FU聯(lián)用對(duì)SGC-7901細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用能否達(dá)到較高劑量5-FU單用的效果。2.探討姜黃素與5-FU聯(lián)合應(yīng)用對(duì)體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用;了解一定劑量姜黃素與較低劑量5FU聯(lián)用誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡的作用能否達(dá)到較高劑量5-FU單用的效果。3.探討姜黃素與5-FU聯(lián)合應(yīng)用對(duì)體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞的周期影響作用;了解姜黃素與較低劑量5-FU聯(lián)用誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞周期的影響能否達(dá)到較高劑量5-FU單用的效果。4.初步揭示姜黃素與5-FU聯(lián)用誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的的作用機(jī)制,為臨床上聯(lián)合應(yīng)用姜黃素和5-FU治療胃癌、提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1.利用基于酶標(biāo)儀的MTT方法檢測(cè)姜黃素(20μmol/L)和5-FU(10、20、40μmol/L)單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用對(duì)體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖的影響。2.利用PI單染的流式細(xì)胞檢測(cè)法和基于AV-FITC/PI雙染的流式細(xì)胞檢測(cè)法分析姜黃素及其聯(lián)合5-FU對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡和增殖周期的影響。3.利用基于酶標(biāo)儀的比色法檢測(cè)姜黃素及其聯(lián)合5-FU對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8活性的影響。4.利用Western blot方法檢測(cè)姜黃素及其與5-FU聯(lián)用對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)的影響。結(jié)果1、姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用:與對(duì)照組相比,各實(shí)驗(yàn)組能顯著抑制SGC-7901細(xì)胞增殖(*P0.05);姜黃素聯(lián)合低劑量5-FU的抑制率高于中劑量的5-FU單用(*P0.05);姜黃素聯(lián)合中劑量5-FU的抑制率高于高劑量的5-FU單用(*P0.05)。2、姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞凋亡的影響:各實(shí)驗(yàn)組SGC-7901細(xì)胞的凋亡率都顯著高于對(duì)照組(*P0.05);姜黃素聯(lián)合低劑量5-FU組細(xì)胞的凋亡率為39.3%,顯著高于中劑量5-FU單用組的26.4%(*P0.05);姜黃素聯(lián)合中劑量5-FU組細(xì)胞的凋亡率為43.9%,顯著高于高劑量5-FU單用組的31.9%(*P0.05)。3、姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖周期的影響:與對(duì)照組相比,姜黃素和5-FU均可引起SGC-7901細(xì)胞在S期的阻滯(*P0.05);姜黃素聯(lián)合低劑量5-FU組與中劑量5-FU單用組相比,處于S期的細(xì)胞比例由41.2%上升至42%(*P0.05);姜黃素聯(lián)合中劑量5-FU組與高劑量5-FU單用組相比,處于S期的細(xì)胞比例由的45.6%上升至53.8%(*P0.05)。4、姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8活性的影響:與對(duì)照組相比,姜黃素和5-FU組均可引起SGC-7901細(xì)胞Caspase-3、Caspase-8相對(duì)活性的顯著增加;姜黃素聯(lián)合低劑量5-FU組與中劑量5-FU單用組相比,Caspase-3的相對(duì)活性百分比由0.14倍(1.14±0.08)增加至0.18倍(1.18±0.09),Caspase-8的相對(duì)活性百分比由0.10倍(1.10±0.09)增加至0.13倍(1.13±0.07)(*P0.05);姜黃素聯(lián)合中劑量5-FU組與高劑量5-FU單用組相比,Caspase-3、Caspase-8相對(duì)活性分別由原來(lái)的0.35倍(1.35±0.03)、0.19倍(1.19±0.01)增加至0.4倍(1.40±0.03)、0.28倍(1.28±0.09)(*P0.05)。5、姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax表達(dá)的影響:與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的Bax蛋白表達(dá)顯著增加,而(*P0.05);姜黃素聯(lián)合低劑量5-FU組與中劑量5-FU單用組相比,Bax蛋白表達(dá)顯著增加(相對(duì)值分別為2.56±0.09;1.33±0.01),而B(niǎo)cl-2蛋白表達(dá)顯著降低(相對(duì)值分別為0.76±0.04;0.88±0.05);姜黃素聯(lián)合中劑量5-FU組與高劑量5-FU單用組相比,Bax蛋白表達(dá)顯著增加(相對(duì)值分別為3.27±0.06;2.19±0.05),而B(niǎo)cl-2蛋白表達(dá)顯著降低(相對(duì)值分別為0.33±0.01;0.53±0.02)(*P0.05)。結(jié)論1、姜黃素與低劑量5-FU聯(lián)用對(duì)體外培養(yǎng)的胃癌SGC-7901細(xì)胞的的生長(zhǎng)抑制和促凋亡作用能夠達(dá)到高劑量5-FU單用的效果;2、姜黃素與低劑量5-FU聯(lián)用對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞的凋亡蛋白酶Caspase-3和Caspase-8相對(duì)活性的增強(qiáng)效應(yīng)顯著高于高劑量5-FU單用的效果;3、姜黃素與低劑量5-FU聯(lián)用與高劑量5-FU單用對(duì)體外培養(yǎng)的胃癌SGC-7901細(xì)胞的Bax蛋白表達(dá)顯著增加、Bcl-2蛋白表達(dá)顯著降低。
【關(guān)鍵詞】：姜黃素 5-FU 胃癌 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期 實(shí)驗(yàn)研究
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-13
• 中英文對(duì)照縮略詞表13-14
• 前言14-17
• 材料與方法17-34
• 1、藥物與試劑17
• 2、主要儀器17-18
• 3、主要試劑的配制18-20
• 4、細(xì)胞株20
• 5、主要研究方法20-34
• 5.1、人胃癌SGC-7901 細(xì)胞的培養(yǎng)20-21
• 5.2、對(duì)實(shí)驗(yàn)用藥濃度的確立——基于酶標(biāo)儀的MTT法21-23
• 5.3、對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用的檢測(cè)——基于酶標(biāo)儀的MTT法23-24
• 5.4、胃癌細(xì)胞凋亡的檢測(cè)—基于AV-FITC/PI雙染的流式細(xì)胞檢測(cè)法24-26
• 5.5、胃癌細(xì)胞細(xì)胞周期的檢測(cè)—基于PI單染的流式細(xì)胞檢測(cè)法26-28
• 5.6、凋亡蛋白酶Caspase-3 與Caspase-8 活性檢測(cè)——基于酶標(biāo)儀的比色法28
• 5.7、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的檢測(cè)——基于Western blot法28-34
• 結(jié)果34-40
• 1. 姜黃素聯(lián)合 5-FU對(duì)SGC-7901 細(xì)胞增殖的抑制作用34-35
• 2. 姜黃素聯(lián)合 5-FU對(duì)SGC-7901 細(xì)胞凋亡的影響35-36
• 3. 姜黃素聯(lián)合 5-FU對(duì)SGC-7901 細(xì)胞周期的影響36-38
• 4. 姜黃素聯(lián)合5-FU對(duì)SGC-7901細(xì)胞Caspase-3、Caspase-8 活性的影響38-39
• 5. 姜黃素聯(lián)合 5-FU對(duì)SGC-7901 細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響39-40
• 討論40-49
• 結(jié)語(yǔ)49-50
• 參考文獻(xiàn)50-55
• 附錄 綜述55-68
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 在校期間論文發(fā)表情況68-69
• 致謝69

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本文編號(hào)：732981