本文關(guān)鍵詞：激動型CD40單克隆抗體體外抑制結(jié)腸癌細胞增殖的實驗研究

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【摘要】：目的:探討激動型CD40單克隆抗體(CD40 monoclonal antibody,CD40m Ab)體外對負載腫瘤抗原的樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)激活情況,進而研究DCs誘導(dǎo)活化的腫瘤特異性效應(yīng)T淋巴細胞對人結(jié)腸癌細胞HCT116增殖的抑制作用。方法:應(yīng)用反復(fù)凍融法制備腫瘤抗原,密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(PBMCs),貼壁培養(yǎng)分離DCs前體細胞和T淋巴細胞,體外rh GM-CSF和rh IL-4聯(lián)合誘導(dǎo)DCs前體細胞定向分化成未成熟的DCs后予腫瘤抗原負載,在不同條件下激活促進其成熟,不同實驗條件分組為:空白陰性對照組、陽性對照TNF-α組和激動型CD40m Ab組,不同條件處理后應(yīng)用流式細胞儀檢測激活后各組DCs表面分子表達情況,ELISA檢測各組細胞培養(yǎng)液上清中細胞因子IL-12(p70)分泌情況;進而將各組DCs分別與T淋巴細胞混合培養(yǎng),誘導(dǎo)產(chǎn)生腫瘤特異性效應(yīng)T淋巴細胞,MTT法檢測DCs誘導(dǎo)T淋巴細胞分化增殖能力;將不同條件誘導(dǎo)產(chǎn)生的腫瘤特異性效應(yīng)T淋巴細胞分別與結(jié)腸癌細胞HCT116混合培養(yǎng),MTT法檢測效應(yīng)T淋巴細胞對HCT116細胞增殖的抑制作用。結(jié)果:成功制備可溶性腫瘤凍融抗原,濃度為2.01mg/ml;從PBMCs中可以分離獲得DCs前體細胞和T淋巴細胞;激動型CD40m Ab激活的負載腫瘤抗原DCs表面分子CD80(92.5%±6.7%)、CD83(22.4%±5.3%)、CD86(81.3%±7.5%)和HLA-DR(87.8%±3.7%)的表達率及細胞培養(yǎng)液上清中IL-12(p70)分泌濃度(716.80±53.43pg/ml)明顯高于空白陰性對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與陽性對照TNF-α組相比無明顯差異(P0.05);激動型CD40m Ab組DCs誘導(dǎo)T淋巴細胞分化增殖后測得刺激指數(shù)(SI)為2.0062±0.4383顯著高于空白陰性對照組(1.3650±0.2098),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與陽性對照TNF-α組(1.9778±0.3704)相比無明顯差異(P0.05);激動型CD40m Ab激活的DCs所誘導(dǎo)的效應(yīng)T淋巴細胞對結(jié)腸癌細胞的殺傷率為66.08%±0.41%,明顯高于空白陰性對照組(46.60%±1.10%),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與陽性對照TNF-α組(66.21%±1.73%)相比無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:1、激動型CD40m Ab在體外可以更好的激活負載腫瘤抗原的DCs并促進其成熟。2、激動型CD40m Ab激活的DCs能夠顯著增強T淋巴細胞分化增殖活性并誘導(dǎo)活化腫瘤特異性效應(yīng)T淋巴細胞。3、激動型CD40m Ab激活的DCs誘導(dǎo)活化的腫瘤特異性效應(yīng)T淋巴細胞在體外對結(jié)腸癌細胞增殖具有顯著的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤免疫 CD40 激動型抗體 樹突狀細胞 結(jié)腸癌
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、材料和方法14-30
• 二、結(jié)果30-40
• 三、討論40-47
• 四、結(jié)論47-48
• 參考文獻48-59
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明59-60
• 綜述 CD40信號系統(tǒng)與腫瘤免疫的研究進展60-74
• 參考文獻66-74
• 致謝74

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：710251