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RASSF1A基因?qū)θ宋赴┘?xì)胞裸鼠成瘤及EMT的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-08-21 03:00

  本文關(guān)鍵詞:RASSF1A基因?qū)θ宋赴┘?xì)胞裸鼠成瘤及EMT的影響


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【摘要】:目的:在課題組前期研究的基礎(chǔ)上,建立胃癌細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,進(jìn)一步研究RASSF1A基因?qū)θ宋赴┘?xì)胞裸鼠成瘤及EMT的影響。方法:1)分別培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901細(xì)胞及MGC-803細(xì)胞,Western Blot檢測(cè)人胃癌MGC-803細(xì)胞轉(zhuǎn)染RASSF1A后E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表達(dá)的變化。2)建立人胃癌細(xì)胞SGC-7901及MGC-803裸鼠異種移植瘤模型,分別分為3組:未轉(zhuǎn)染組、pc DNA3.1(+)空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)-RASSF1A質(zhì)粒組,觀察皮下腫瘤生長(zhǎng),繪制瘤體生長(zhǎng)曲線圖,4-6w后提取瘤體組織,分別比較各組瘤體體積及重量,HE染色,觀察病理學(xué)變化;Western-blot檢測(cè)瘤體組織蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail表達(dá)的變化。結(jié)果:1)人胃癌MGC-803細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染RASSF1A基因后Western Blot結(jié)果表明,與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組及未轉(zhuǎn)染組相比,陽(yáng)性質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組中E-cadherin蛋白表達(dá)上調(diào),而Vimentin、Snail蛋白的表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組與未轉(zhuǎn)染組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2)成功建立穩(wěn)定了高表達(dá)RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901細(xì)胞及MGC-803細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組、未轉(zhuǎn)染組相比,陽(yáng)性質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組的裸鼠皮下移植瘤體積、瘤重均顯著小于空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染及未轉(zhuǎn)染組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組裸鼠皮下瘤體積、瘤重與未轉(zhuǎn)染組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);顯微光鏡下顯示:各瘤體組織學(xué)形態(tài)均符合腺癌,轉(zhuǎn)染后的裸鼠移植瘤較未轉(zhuǎn)染及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組移植瘤癌細(xì)胞異型性降低;提取瘤體組織蛋白后Western Blot結(jié)果顯示:與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組及未轉(zhuǎn)染組相比,陽(yáng)性質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組中E-cadherin蛋白表達(dá)上調(diào),而Vimentin、Snail蛋白的表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組與未轉(zhuǎn)染組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1)RASSF1A基因可顯著抑制胃癌細(xì)胞的成瘤能力。2)RASSF1A基因能夠抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞及MGC-803細(xì)胞EMT的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:RASSF1A基因 胃癌細(xì)胞 EMT 裸鼠成瘤
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R735.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 主要英文縮略語(yǔ)索引10-11
  • 第1章 緒論11-15
  • 第2章 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備15-19
  • 2.1 細(xì)胞株15
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
  • 2.3 主要試劑15-16
  • 2.4 儀器及設(shè)備16-19
  • 第3章 實(shí)驗(yàn)方法19-29
  • 第4章 結(jié)果29-43
  • 第5章 討論43-47
  • 第6章 結(jié)論47-49
  • 參考文獻(xiàn)49-53
  • 綜述53-59
  • 參考文獻(xiàn)56-59
  • 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果59-61
  • 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 沈克平;王海永;胡兵;劉威;;胃腸安對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞TGF-β_1誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2011年23期

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本文編號(hào):710397

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