本文關(guān)鍵詞：AQP4在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)展中的作用

  更多相關(guān)文章： 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 AQP4

【摘要】：多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma multiforme, GBM)是人中最常見也是惡性程度最高的一種原發(fā)腦部腫瘤,屬于WHO IV級腫瘤。多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤可以簡稱為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。目前針對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療方法主要是手術(shù)切除,放射療法和化學(xué)療法。但是經(jīng)過治療的病人大部分會經(jīng)歷復(fù)發(fā),平均生存期僅有一年左右。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中發(fā)現(xiàn)了腫瘤干細(xì)胞的存在,稱為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(glioma stem cell, GSC)。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞可以無限增殖,自我更新,多向分化,具有在體內(nèi)重現(xiàn)原腫瘤的組織學(xué)特征、分子遺傳特征的能力。膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在整個腫瘤中所占的比例很小,但是它們卻在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中具有關(guān)鍵地位和作用,是研究和治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的重要靶點(diǎn)。所以我們著重對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞進(jìn)行研究,找到在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中起到重要作用的基因,希望通過研究這些基因在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的作用找到清除膠質(zhì)瘤干細(xì)胞進(jìn)而治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的新的方法。Aquaporin 4 (AQP4)是一種水通道蛋白,屬于水通道蛋白家族。AQP4是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system, CNS)中參與和維持水和各種離子平衡的最主要和最關(guān)鍵的水通道蛋白。此外,AQP4還參與了細(xì)胞遷移,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等過程。并且在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中檢測出了AQP4高表達(dá)。我們從TCGA(The Cancer Genome Atlas)下載了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤病人的數(shù)據(jù),分析了病人體內(nèi)AQP4的表達(dá)。發(fā)現(xiàn)AQP4高表達(dá)的病人的生存時(shí)間比低表達(dá)病人的生存時(shí)間短,說明AQP4的表達(dá)量和病人的生存時(shí)間有關(guān),猜測AQP4是否在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中起到了某種作用。我們檢測了小鼠正常神經(jīng)干細(xì)胞和小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中AQP4的表達(dá),發(fā)現(xiàn)AQP4在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的表達(dá)量比正常神經(jīng)干細(xì)胞明顯增多。以上證據(jù)提示AQP4可能在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中起到了某些作用。我們通過shRNA的方法敲降膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中AQP4的表達(dá)觀察AQP4表達(dá)量降低是否對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的特性產(chǎn)生影響。我們首先敲降膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的AQP4,結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的狀態(tài)發(fā)生變化,和對照相比狀態(tài)變差甚至死亡。說明AQP4對于維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的正常生存必不可少。腫瘤干細(xì)胞的增殖能力對于腫瘤在體內(nèi)的生長與發(fā)展至關(guān)重要。我們在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中敲降A(chǔ)QP4后進(jìn)行增殖實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)AQP4敲降后膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的增殖能力受到抑制。說明AQP4能夠影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的增殖能力。腫瘤干細(xì)胞的遷移能力是腫瘤干細(xì)胞的一個重要特征。遷移能力的強(qiáng)弱可以影響到腫瘤在體內(nèi)的擴(kuò)散、侵襲和轉(zhuǎn)移。我們敲降膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的AQP4后做細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證AQP4敲降后膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的遷移能力受到抑制。說明AQP4能夠影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的遷移能力。腫瘤干細(xì)胞的自我更新能力是腫瘤能夠在體內(nèi)復(fù)發(fā)的關(guān)鍵。我們做了軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證AQP4敲降后膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的自我更新能力受到抑制。說明AQP4可以影響膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的自我更新能力。以上是通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了AQP4在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的作用。我們又做了體內(nèi)移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明AQP4敲降后膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的體內(nèi)致瘤能力減弱。通過以上實(shí)驗(yàn)證實(shí)AQP4對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的生長,增殖,自我更新和遷移能力有影響。說明了AQP4在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中具有一定的地位,對于維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的特性起到了重要作用,未來可能能為抑制膠質(zhì)瘤干細(xì)胞功能的一個重要的靶向基因。為進(jìn)一步深入研究AQP4在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的作用提供了重要的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 AQP4
【學(xué)位授予單位】：安徽大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第一章 前言10-21
• 1.1 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤10-16
• 1.1.1 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的癥狀、病因及診斷10-11
• 1.1.2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的特征11-14
• 1.1.3 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療14-16
• 1.2 AQP416-19
• 1.2.1 水通道蛋白的基本特征、結(jié)構(gòu)和功能16-17
• 1.2.2 大腦中AQP4的表達(dá)與調(diào)節(jié)17-18
• 1.2.3 AQP4在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的功能與神經(jīng)系統(tǒng)疾病18-19
• 1.3 課題的研究內(nèi)容及意義19-21
• 第二章 材料與方法21-48
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及配制21-28
• 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材28-30
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法30-48
• 2.4.1 制備感受態(tài)大腸桿菌30-31
• 2.4.2 轉(zhuǎn)化31
• 2.4.3 堿裂解法提取質(zhì)粒31-33
• 2.4.4 質(zhì)粒酶切鑒定33
• 2.4.5 瓊脂糖凝膠電泳33-34
• 2.4.6 shRNA質(zhì)粒中抽34-36
• 2.4.7 包裝質(zhì)粒大抽36-38
• 2.4.8 細(xì)胞培養(yǎng)38-39
• 2.4.9 病毒包裝39-41
• 2.4.10 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞培養(yǎng)41-42
• 2.4.11 病毒感染細(xì)胞42
• 2.4.12 qPCR檢測敲降效率42-44
• 2.4.13 克隆形成實(shí)驗(yàn)44-45
• 2.4.14 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)45
• 2.4.15 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)45-46
• 2.4.16 移植瘤實(shí)驗(yàn)46-48
• 第三章 結(jié)果與討論48-62
• 3.1 AQP4在膠質(zhì)瘤病人和膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中的表達(dá)48-49
• 3.1.1 AQP4表達(dá)量的高低與膠質(zhì)瘤病人生存時(shí)間有關(guān)48
• 3.1.2 AQP4在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中高表達(dá)48-49
• 3.2 AQP4表達(dá)降低對人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的影響49-52
• 3.2.1 人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后其狀態(tài)發(fā)生變化49-51
• 3.2.2 人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后抑制其克隆形成能力51-52
• 3.3 AQP4表達(dá)降低對小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的影響52-58
• 3.3.1 小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后其狀態(tài)發(fā)生變化52-54
• 3.3.2 小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后抑制其增殖能力54-56
• 3.3.3 小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后抑制其克隆形成能力56-57
• 3.3.4 小鼠膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后抑制細(xì)胞遷移能力57-58
• 3.4 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞敲降A(chǔ)QP4后抑制其體內(nèi)致瘤能力58-60
• 3.5 結(jié)果討論60-62
• 第四章 結(jié)論62-65
• 第五章 參考文獻(xiàn)65-71
• 主要縮略詞71-72
• 致謝72

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐建X,徐庚;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療進(jìn)展[J];神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生;2005年01期

2 張帆;;立體適形放療在治療腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤術(shù)后患者的應(yīng)用[J];中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2007年02期

3 劉向輝;張之營;李鴻源;申斌;;顱內(nèi)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的術(shù)前診斷[J];山東醫(yī)藥;2008年36期

4 周及彤;王士杰;周建;;原發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤1例分析[J];中國誤診學(xué)雜志;2008年10期

5 劉維生;肖新如;王碩;;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中腦組織特異性血管生成抑制因子1的研究進(jìn)展[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2008年01期

6 楊培業(yè);膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的放射線治療[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料.神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊;1976年05期

7 吳超權(quán);膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放射抵抗的可能解釋[J];國外醫(yī)學(xué)(臨床放射學(xué)分冊);1984年03期

8 周東,馬大程,郭京,黃輝;7例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[J];中國腫瘤臨床與康復(fù);1998年S1期

9 白茫茫,張劍寧,章翔;炎性肉芽腫轉(zhuǎn)變?yōu)槟z質(zhì)母細(xì)胞瘤1例[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年01期

10 秦德興,墨浩,歐廣飛,宋永文,康恭禮,胡郁華,谷銑之;腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放化療療效觀察[J];中華腫瘤雜志;2001年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃丙倉;耿道穎;紀(jì)毅敏;李郁新;朱莉;尹波;鮑奕仿;;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤磁共振成像的一個重要征象——“絲瓜瓤樣壞死征”[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國放射學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

2 顧金海;李剛;蘇雨行;申杰;李蓉暉;賀峭偉;鄧林;;STAT3 Decoy ODN抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤增殖實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

3 秦立森;梁徑山;石瓊;于如同;;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中強(qiáng)化與壞死比例與信號傳導(dǎo)相關(guān)性的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 熊劍;章翔;程光;林洪;費(fèi)舟;;Ardipusilloside Ⅰ誘導(dǎo)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡的研究[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

5 張成龍;李康印;郝曉東;陳虎義;高崎煒;強(qiáng)海霞;;兒童多發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤一例[A];2005年全國醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會議西部論壇論文匯編[C];2005年

6 顏偉;張偉;游贛;王永志;劉彥偉;楊沛;江濤;;甲基鳥嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶蛋白表達(dá)和促進(jìn)甲基化在中國膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者中的臨床關(guān)系[A];2011中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

7 江濤;陳寶師;袁芳;李桂林;李少武;邱曉光;王忠誠;;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床治療經(jīng)驗(yàn)[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第二屆全國代表大會論文匯編[C];2007年

8 鄭秀玨;黃欣;李谷;曹飛;龔江標(biāo);;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤術(shù)后同步放化療的臨床分析[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

9 路翠平;;四十例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤術(shù)后護(hù)理體會[A];2011中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

10 賀虎;李明武;牛朝詩;;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞能夠分化為內(nèi)皮細(xì)胞以促進(jìn)腫瘤血管生成[A];2011中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 匡遠(yuǎn)深;治療首次術(shù)后腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 放化療同步優(yōu)于單純放療[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

2 吳劍鵬;南方醫(yī)院牽手多家醫(yī)院聯(lián)合開展膠質(zhì)母細(xì)胞瘤研究[N];科技日報(bào);2014年

3 煒聞;Avastin獲準(zhǔn)用于治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

4 谷文;FDA批準(zhǔn)Avastin 用于治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

5 王小龍;一種化合物可引發(fā)癌細(xì)胞“自爆”[N];科技日報(bào);2014年

6 孫行之邋(編譯);抵御腫瘤,疫苗將成為利器[N];第一財(cái)經(jīng)日報(bào);2008年

7 Tracy Staton 編譯 石軍;羅氏公開數(shù)據(jù)證“有效”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 岳琪;調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的預(yù)后作用及分化機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 陳鑫;CKS2在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其對腫瘤生物學(xué)行為的影響和機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 呂磊;阿西替尼對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤及其腫瘤干細(xì)胞治療作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

4 周濟(jì);NTS/NTR1信號對人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞自我更新及侵襲能力的影響及機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 李紅偉;KAP調(diào)節(jié)ROCK2和Cdk2在RNA激活的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤侵襲途徑[D];鄭州大學(xué);2014年

6 紀(jì)祥軍;Nrf2在人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤血管生成中的作用研究[D];南京大學(xué);2013年

7 熊劍;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤誘導(dǎo)凋亡治療及其機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

8 楊曉亮;實(shí)驗(yàn)性分子靶向治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

9 孫種夷;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤預(yù)后評價(jià)的數(shù)學(xué)模型[D];中南大學(xué);2013年

10 丁麗娟;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞的培養(yǎng)及其對TRAIL耐藥機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉婷婷;AQP4在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)展中的作用[D];安徽大學(xué);2016年

2 杜池剛;擴(kuò)散因子受體對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)影響的相關(guān)研究[D];山東大學(xué);2009年

3 馬揚(yáng);膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者術(shù)前預(yù)后評分的研究[D];山東大學(xué);2012年

4 許豪;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤術(shù)后放化療與單純手術(shù)治療方案的療效觀察[D];山東大學(xué);2014年

5 郭欣茹;腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤血漿差異蛋白質(zhì)分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2014年

6 王宗寶;秋水仙堿對小鼠膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療初步研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

7 師惠;人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中白藜蘆醇代謝產(chǎn)物及其代謝相關(guān)酶表達(dá)的分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

8 淦作松;三氧化二砷誘導(dǎo)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡作用的研究[D];江西醫(yī)學(xué)院;2004年

9 趙朝輝;人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中NFKBIA多態(tài)性的分析研究[D];蘇州大學(xué);2014年

10 時(shí)光;老年膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者規(guī)范化治療療效及安全性分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號：705053