本文關(guān)鍵詞：Elongator對(duì)肝癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的影響及其分子機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 肝癌 Elp3 Elp4 DNA損傷 DNA修復(fù)

【摘要】：目的:在肝癌細(xì)胞HepG2中,研究Elp3和Elp4在~(60)Coγ射線輻照引起的DNA損傷修復(fù)中的功能,并對(duì)其分子機(jī)制進(jìn)行探討。方法:1.以O(shè)TM為指標(biāo),通過彗星電泳檢測(cè)抑制劑LY294002處理的輻照后各組細(xì)胞的損傷情況。2.通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)抑制劑LY294002處理的輻照后各組細(xì)胞的凋亡率。3.通過CCK8檢測(cè)抑制劑LY294002處理的輻照后各組細(xì)胞的增殖情況。4.通過Western blot檢測(cè)抑制劑LY294002處理的輻照后各組細(xì)胞中RAD50、Ku70、Mre11這些損傷修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。5.通過裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Elp3對(duì)移植瘤生長(zhǎng)的影響。6.免疫組織化學(xué)法檢測(cè)移植瘤中損傷修復(fù)、增殖、凋亡這些相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:1.LY294002處理組與對(duì)照組相比較,HepG2組、Elp3過表達(dá)組和Elp4過表達(dá)組中OTM值顯著增加,而Elp3干擾組和Elp4干擾組中OTM值沒有顯著變化。2.LY294002處理組與對(duì)照組相比較,HepG2組、Elp3過表達(dá)組和Elp4過表達(dá)組中的凋亡率顯著增加,而Elp3干擾組和Elp4干擾組的凋亡率沒有顯著變化。3.LY294002處理組與對(duì)照組相比較,HepG2組、Elp3過表達(dá)組和Elp4過表達(dá)組中的增殖顯著減少,而Elp3干擾組和Elp4干擾組的細(xì)胞增殖沒有顯著變化。4.LY294002處理組與對(duì)照組相比較,HepG2組、Elp3過表達(dá)組和Elp4過表達(dá)組中的Mre11、Ku70這些損傷修復(fù)蛋白的表達(dá)顯著減少,而Elp3干擾組和Elp4干擾組中的這些蛋白表達(dá)沒有顯著變化。5.裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Elp3過表達(dá)組移植瘤體積顯著大于對(duì)照組,Elp3干擾組移植瘤體積顯著小于對(duì)照組。6.免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示Elp3過表達(dá)組損傷修復(fù)和增殖相關(guān)基因表達(dá)顯著高于對(duì)照組,Elp3干擾組損傷修復(fù)和增殖相關(guān)基因表達(dá)顯著低于對(duì)照組,Elp3過表達(dá)組凋亡相關(guān)基因表達(dá)顯著低于對(duì)照組,Elp3干擾組凋亡相關(guān)基因表達(dá)顯著高于對(duì)照組。結(jié)論:1.在~(60)Coγ射線輻照引起的HepG2細(xì)胞DNA損傷中,Elp3和Elp4能夠促進(jìn)DNA損傷修復(fù),抑制凋亡,促進(jìn)增殖。2.Elp3和Elp4通過PI3K/AKT途徑調(diào)節(jié)DNA損傷修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 Elp3 Elp4 DNA損傷 DNA修復(fù)
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-14
• 材料與方法14-24
• 1 材料14
• 2 主要儀器設(shè)備14-15
• 3 實(shí)驗(yàn)方法15-24
• 3.1 細(xì)胞培養(yǎng)15
• 3.2 照射條件15-16
• 3.3 彗星電泳檢測(cè)Elongator對(duì)肝癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的影響16-17
• 3.4 Annexin-V/PI雙染檢測(cè)細(xì)胞凋亡17
• 3.5 CCK-8 細(xì)胞增殖分析17-18
• 3.6 Western blot檢測(cè)處理后的各組細(xì)胞損傷修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況18-21
• 3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21
• 3.8 Elp3對(duì)裸鼠肝癌移植瘤生長(zhǎng)的影響21-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-37
• 1 LY294002抑制ELP3和ELP4對(duì)肝癌細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的促進(jìn)作用24-27
• 2 LY294002抑制ELP3和ELP4對(duì)輻照后肝癌細(xì)胞的抑凋亡作用27-29
• 3 LY294002抑制ELP3和ELP4對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用29-31
• 4 LY294002抑制ELP3和ELP4對(duì)DNA損傷修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)31-34
• 5 ELP3對(duì)裸鼠肝癌移植瘤生長(zhǎng)的影響34-37
• 討論37-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 展望45-46
• 綜述：在腫瘤細(xì)胞應(yīng)對(duì)放射的過程中磷脂酰肌醇 （PI3K）/AKT信號(hào)通路作為一個(gè)關(guān)鍵的中介物46-80
• 參考文獻(xiàn)58-80
• 攻讀學(xué)位期間本人出版或公開發(fā)表的論著、論文80-81
• 本論文受下列課題資助81-82
• 縮略詞表82-83
• 致謝83-84

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 MA Wen li;DNA Diagnosis and Gene Therapy:Advances and Prospects in the 21st Century[J];深圳大學(xué)學(xué)報(bào);2000年04期

2 葛學(xué)銘,陸應(yīng)麟,付生法,范文紅,劉爽;A NOVEL HUMAN DNA SEQUENCE WITH TUMOR METASTASIS SUPPRESSIVE ACTIVITY[J];Chinese Journal of Cancer Research;2000年02期

3 曹暉,劉玉萍,小松かつ子,畢培曦,邵鵬柱;DNA Molecular Profiling:A New Approach to Quality Control of Chinese Drugs[J];Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine;2000年01期

4 ;DNA REPAIR CAPACITY IN LUNG CANCER PATIENTS[J];癌變.畸變.突變;2001年04期

5 黃力拉,朱剛勁;被拐賣及失蹤兒童采血驗(yàn)DNA前的心理問題及對(duì)策[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年03期

6 安小惠 ,王一理 ,來寶長(zhǎng) ,耿一萍 ,司履生;CONSTRUCTION OF HUMAN INTERLUEKIN-18 DNA VACCINE AND IT'S EXPRESSION IN MAMMALIAN CELLS[J];Journal of Xi'an Medical University;2001年02期

7 ;A Study of PCR with DNA Extracted from Single Cell Isolated from Histological Sections[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年01期

8 王軍陽(yáng),范桂香,勝利,袁育康;THE CONSTRUCTION AND PRELIMINARY APPRAISEMENT OF HSV-2 gD GENE DNA VACCINE[J];Academic Journal of Xi'an Jiaotong University;2002年02期

9 董菁 ,成軍 ,王勤環(huán) ,施雙雙 ,王剛 ,斯崇文;CLONING AND ANALYSIS OF THE GENOMIC DNA SEQUENCE OF AUGMENTER OF LIVERR EGENERATION FROM RAT[J];Chinese Medical Sciences Journal;2002年02期

10 ;Real time observation of the photocleavage of single DNA molecules[J];Chinese Science Bulletin;2003年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 Michael J.Siefkes;Cory O.Brant;Ronald B.Walter;;A novel real-time XL-PCR for DNA damage detection[A];漁業(yè)科技創(chuàng)新與發(fā)展方式轉(zhuǎn)變——2011年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2011年

2 ;Hormonal Regulation and Tumorigenic Role of DNA Methyltransferase[A];2011中國(guó)婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省計(jì)劃生育與生殖醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)暨生殖健康講習(xí)班論文匯編[C];2011年

3 Dongmei Zhao;Fan Jin;Yuli Qian;Hefeng Huang;;Expression patterns of Dnmtl and Dnmt3b in preimplantational mouse embryos and effects of in-vitro cultures on their expression[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議婦科內(nèi)分泌會(huì)場(chǎng)（婦科內(nèi)分泌學(xué)組、絕經(jīng)學(xué)組、計(jì)劃生育學(xué)組）論文匯編[C];2012年

4 姜東成;蔣稼歡;楊力;蔡紹皙;K.-L.Paul Sung;;在聚吡咯微點(diǎn)致動(dòng)下的DNA雜交行為[A];2008年全國(guó)生物流變學(xué)與生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2008年

5 白明慧;翁小成;周翔;;聯(lián)鄰苯二酚類小分子作為DNA交聯(lián)劑的研究[A];第六屆全國(guó)化學(xué)生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

6 張曄;杜智;楊斌;高英堂;;檢測(cè)外周血中游離DNA的應(yīng)用前景(綜述)[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

7 周紅;鄭江;王良喜;丁國(guó)富;魯永玲;潘文東;羅平;肖光夏;;CpG DNA誘導(dǎo)全身炎癥反應(yīng)綜合征的作用及其機(jī)制研究[A];全國(guó)燒傷創(chuàng)面處理、感染專題研討會(huì)論文匯編[C];2004年

8 ;EFFECTS OF Ku70-DEFICIENT ON ARSENITE-INDUCED DNA DOUBLE STRAND BREAKS, CHROMOSOMAL ALTERATIONS AND CELL CYCLE ARREST[A];海峽兩岸第三屆毒理學(xué)研討會(huì)論文摘要[C];2005年

9 李經(jīng)建;冀中華;蔡生民;;小溝結(jié)合方式中的DNA媒介電荷轉(zhuǎn)移[A];第十三次全國(guó)電化學(xué)會(huì)議論文摘要集（下集）[C];2005年

10 ;The interaction between Levofloxacine Hydrochloride and DNA mediated by Cu~(2+)[A];湖北省化學(xué)化工學(xué)會(huì)2006年年會(huì)暨循環(huán)經(jīng)濟(jì)專家論壇論文集[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 袁滿;平安：把“領(lǐng)先”作為DNA[N];經(jīng)濟(jì)觀察報(bào);2006年

2 舒放;編織一個(gè)DNA納米桶[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

3 閆潔;英兩無罪公民起訴要求銷毀DNA記錄[N];新華每日電訊;2008年

4 何德功;日本制成診斷魚病的“DNA書”[N];農(nóng)民日?qǐng)?bào);2004年

5 本報(bào)記者 張巍巍;DNA樣本也能作假[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

6 周斌偉　鄒巍;蘇州警方應(yīng)用DNA技術(shù)一年偵破案件1887起[N];人民公安報(bào);2011年

7 本報(bào)記者 楊天笑;揭秘“神探”DNA[N];蘇州日?qǐng)?bào);2011年

8 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室教授 李福洋;破除法老DNA的咒語(yǔ)[N];東方早報(bào);2011年

9 常麗君;DNA電路可檢測(cè)導(dǎo)致疾病的基因損傷[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

10 常麗君;效率和質(zhì)量：“DNA制造業(yè)”兩大障礙被攻克[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 唐陽(yáng);基于質(zhì)譜技術(shù)的基因組DNA甲基化及其氧化衍生物分析[D];武漢大學(xué);2014年

2 池晴佳;DNA動(dòng)力學(xué)與彈性性質(zhì)研究[D];重慶大學(xué);2015年

3 胡璐璐;哺乳動(dòng)物DNA去甲基化過程關(guān)鍵酶TET2的三維結(jié)構(gòu)與P暬蒲芯縖D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 馬寅洲;基于滾環(huán)擴(kuò)增的DNA自組裝技術(shù)的研究[D];南京大學(xué);2014年

5 黃學(xué)鋒;精子DNA碎片的臨床意義：臨床和實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

6 隋江東;APE1促進(jìn)DNA-PKcs介導(dǎo)hnRNPA1磷酸化及其在有絲分裂期端粒保護(hù)中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 劉松柏;結(jié)構(gòu)特異性核酸酶FEN1在DNA復(fù)制及細(xì)胞周期過程中的功能性研究[D];浙江大學(xué);2015年

8 王璐;哺乳動(dòng)物中親本DNA甲基化的重編程與繼承[D];中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

9 齊文靖;染色質(zhì)改構(gòu)蛋白BRG1在DNA雙鏈斷裂修復(fù)中的作用及機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

10 龍湍;水稻T-DNA插入突變?nèi)后w側(cè)翼序列的分離分析和OsaTRZ2的克隆與功能鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 董洪奎;面向可視化納米操作的DNA運(yùn)動(dòng)學(xué)建模及誤差實(shí)時(shí)校正方法[D];沈陽(yáng)理工大學(xué);2014年

2 聞金燕;水溶性羧基和吡啶基咔咯大環(huán)與DNA和人血清蛋白的相互作用[D];華南理工大學(xué);2015年

3 江懌雨;水溶性羧酸卟啉及其配合物與DNA和人血清蛋白的相互作用[D];華南理工大學(xué);2015年

4 高志森;比較外周游離循環(huán)腫瘤DNA與癌胚抗原監(jiān)測(cè)非小細(xì)胞肺癌根治術(shù)前后腫瘤負(fù)荷變化的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 丁浩;血漿循環(huán)DNA完整性及多基因甲基化對(duì)肺癌診斷價(jià)值的研究[D];河北大學(xué);2015年

6 王鵬;基于碳點(diǎn)@氧化石墨烯復(fù)合材料DNA生物傳感器的構(gòu)建及用于PML/RARα基因檢測(cè)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

7 李海青;轉(zhuǎn)堿篷和鹽角草總DNA的耐鹽紫花苜蓿的選育[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

8 李婷婷;小鼠DNA模式識(shí)別重要受體的分子結(jié)構(gòu)特征及其功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

9 劉瑞斯;抗癌藥物奧沙利鉑與DNA相互作用的原子力顯微鏡觀察研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

10 熊忠;芳香二肽與一價(jià)金屬離子間相互作用及DNA切割活性的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：686983