本文關(guān)鍵詞：腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞通過H3K18ac促進(jìn)肺癌干性

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【摘要】：研究背景：肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,也是全世界死亡率最高的腫瘤之一。隨著腫瘤研究不斷深入,研究人員發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境(Cancer Microenvironment, CME)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著十分重要的作用。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer associated fibroblasts, CAFs)作為腫瘤微環(huán)境中的重要間質(zhì)成分,為腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移提供了有效支持,針對CAFs靶向研究可以為腫瘤治療提供新的策略。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展不僅取決于遺傳因素,同時也受表觀遺傳修飾的影響。表觀遺傳主要通過DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑等來實現(xiàn)對基因表達(dá)的控制。乙�；墙M蛋白的一種重要修飾方式,組蛋白乙酰化失衡可引起相應(yīng)染色體結(jié)構(gòu)和基因轉(zhuǎn)錄水平的改變,并可導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。目前CAFs對肺癌的作用研究主要集中在遺傳水平,而CAFs對肺癌的表觀遺傳改變研究甚少。本研究試從組蛋白乙�；淖兦闆r探究肺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞對非小細(xì)胞肺癌影響及相關(guān)機(jī)制。研究方法：1.分離并純化腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)和癌旁成纖維細(xì)胞(NFs)將人肺腺癌組織與癌旁組織剪碎,膠原酶IV消化完全后梯度離心得到CAFs和NFs,利用表達(dá)上皮標(biāo)志Epcam磁珠純化原代分離的成纖維細(xì)胞。2.建立CAFs與肺癌細(xì)胞共培養(yǎng)體系體外原代培養(yǎng)肺CAFs,將其與肺腺癌細(xì)胞株小室共培養(yǎng)3天,Real-time PCR、 Western blot檢測腫瘤細(xì)胞干性相關(guān)因子的變化,流式檢測干性標(biāo)志變化。篩選肺癌細(xì)胞株與CAF共培養(yǎng)后組蛋白乙�；瘶�(biāo)志變化。3.Western blot,免疫組織化學(xué)法檢測臨床肺癌組織標(biāo)本H3K18ac的表達(dá)。4.構(gòu)建3號組蛋白18位賴氨酸殘基突變成丙氨酸(H3K18A)的細(xì)胞株,檢測突變株干性及致瘤性改變。實驗結(jié)果：1.CAFs相較于NFs高表達(dá)a-SMA與FSP-1。2.CAFs可促使肺癌細(xì)胞株的干性增強,致瘤性增強。3.CAFs與肺癌細(xì)胞株共培養(yǎng)后,肺癌細(xì)胞株H3K18ac表達(dá)增強。4.H3K18ac在肺腺癌組織標(biāo)本中高表達(dá)。5.相較于未突變的肺癌細(xì)胞株,H3K18A突變的肺癌細(xì)胞干細(xì)胞標(biāo)志表達(dá)下降。6.轉(zhuǎn)化生長因子β (transforming growth factor-β, TGF-β)處理肺腺癌細(xì)胞后可引起肺腺癌細(xì)胞H3K18ac表達(dá)增強。實驗結(jié)論：CAF可能通過分泌TGF-β引起肺癌H3K18ac表達(dá)增強,從而導(dǎo)致干性增強,最終促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展。提示H3K18ac可能是促進(jìn)肺癌發(fā)生發(fā)展的潛在表觀標(biāo)志。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤相關(guān)性成纖維 非小細(xì)胞肺癌 腫瘤干性 組蛋白3賴氨酸殘基18乙�；�
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 縮略詞表10-12
• 1. 前言12-14
• 2. 實驗材料和方法14-22
• 2.1 實驗材料14-18
• 2.2 實驗方法18-22
• 3. 實驗結(jié)果22-33
• 3.1. CAFs和NFs的鑒定22-23
• 3.2 CAFs促進(jìn)肺癌細(xì)胞株的干性增強,致瘤性增強23-26
• 3.3 肺癌細(xì)胞株與CAFs共培養(yǎng)后,H3K18ac表達(dá)增強26-27
• 3.4. H3K18ac在肺腺癌組織標(biāo)本中高表達(dá)27-30
• 3.5 H3K18A突變的肺癌細(xì)胞株30-31
• 3.6. TGF-β能使肺癌細(xì)胞株H3K18ac的表達(dá)增加31-33
• 4. 討論33-35
• 參考文獻(xiàn)35-36
• 綜述36-48
• 參考文獻(xiàn)42-48
• 作者簡介48

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Run-Long Lin;Lu-Jun Zhao;;Mechanistic basis and clinical relevance of the role of transforming growth factor-β in cancer[J];Cancer Biology & Medicine;2015年04期

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本文編號：686385