本文關(guān)鍵詞：乳腺癌組織中HOTAIR基因表達(dá)及其甲基化的研究

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【摘要】：目的：通過分析長鏈非編碼RNA基因HOTAIE在乳腺癌及癌旁組織中的表達(dá)水平,應(yīng)用甲基化特異性PCR(methylation-specificPCR, MSP)技術(shù),分析乳腺癌及癌旁組織中HOTAIE基因DNA的甲基化狀態(tài),探討HOTAIE基因DNA甲基化與其表達(dá)的關(guān)系。方法：收集乳腺癌及癌旁正常組織30對,癌旁正常組織選取距離癌組織腫塊邊緣至少5cm以上的乳腺組織作為癌旁乳腺組織。分別提取總RNA,采用實(shí)時熒光定量PCR檢測HOTAIR基因的表達(dá)。取30例乳腺癌組織及癌旁正常組織,分別提取基因組DNA,用亞硫酸鹽處理,設(shè)計相應(yīng)的甲基化和非甲基化序列引物并行PCR擴(kuò)增,通過瓊脂糖凝膠電泳分析,確定與引物互補(bǔ)的DNA序列的甲基化狀態(tài)。所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果：1.在對乳腺癌及相匹配正常組織進(jìn)行實(shí)時熒光定量檢測后我們發(fā)現(xiàn)：乳腺癌組織中HOTAIR表達(dá)量為11.16±3.97,癌旁正常組織中HOTAIR的表達(dá)量為5.02±2.58,P=0.000,P0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.經(jīng)過MSP檢測,我們發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中HOTAIR出現(xiàn)非甲基化27例,甲基化3例；而癌旁組織中出現(xiàn)未甲基化17例,甲基化13例,P=0.0040.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：1.乳腺組織中可檢測到HOTAIR處于活性表達(dá)狀態(tài)；在乳腺癌組織中,HOTAIR的表達(dá)量明顯高于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。以上結(jié)果提示：HOTAIR的高表達(dá)可能與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)聯(lián)。2.乳腺癌組織中以及癌旁正常組織中可見HOTAIR基因啟動子CpG島非甲基化水平高于癌旁組織,且經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析后證實(shí)二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004)。以上結(jié)果提示：DNA非甲基化可能是HOTAIR基因在乳腺癌組織中高表達(dá)的原因之一。3.本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),基因HOTAIR啟動子CpG島的非甲基化狀態(tài)與該基因在乳腺癌組織中高表達(dá)有關(guān),可能在乳腺癌的發(fā)生過程中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為HOTAIR基因甲基化水平成為檢測乳腺癌的新的特異性指標(biāo)提供了理論依據(jù),并可能成為治療乳腺癌的特異性潛在生物靶點(diǎn)。但是由于HOTAIR啟動區(qū)具有多個甲基化區(qū)域,要深入研究還需要對多個區(qū)域進(jìn)行定量和定性分析,以最終確定HOTAIR甲基化水平與乳腺癌的具體關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：HOTAIR 長鏈非編碼 RNA 甲基化 乳腺癌
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 英文縮略詞表9-11
• 前言11-13
• 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法13-28
• 結(jié)果28-32
• 討論32-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 附錄44-47
• 綜述47-54
• 參考文獻(xiàn)52-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況54-55
• 致謝55-56

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1 宮政;乳腺癌組織中HOTAIR基因表達(dá)及其甲基化的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

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本文編號：685779