本文關鍵詞：腦膜瘤中HER2、p-AKT、脂肪酸合酶及Ki-67的表達關系及其臨床意義

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【摘要】：一、研究背景腦膜瘤是常見的中樞神經系統(tǒng)腫瘤,起源于蛛網膜絨毛細胞,可以附在硬膜上生長,也有發(fā)生于腦表面或腦深部以及腦室內,大部分是界限清楚、包膜完整的腫瘤,可以出現(xiàn)軟骨、骨、脂肪和血管等化生。腦膜瘤在中樞神經系統(tǒng)腫瘤中約占13-26%,居顱內腫瘤發(fā)病率第二位。腫瘤的形狀可因所在的位置不同而不同,最常見的是球形,多位于腦和腦室內,顱底腦膜瘤可呈厚度不均勻的扁平形,啞鈴型,馬鞍型,位于椎管內者可以為圓條狀,環(huán)形等。腫瘤多表面光滑,質韌或硬,也有囊性變、鈣化、骨化等,但不多見。腫瘤多呈膨脹性生長,可能引起鄰近顱骨骨質增生,壓迫周圍腦組織,部分腫瘤會有穿破腦膜浸潤顱骨、浸潤腦實質、侵入血管血竇等臨床侵襲性行為,甚至可轉移到肺、肝和骨。但浸潤顱骨的腦膜瘤不一定是高病理等級腦膜瘤,良性腦膜瘤也可以,有文獻報導盡管轉移到顱外的腦膜瘤中高級別腫瘤較多,但顱外轉移的也存在分化良好的低級別腫瘤。緩慢、無浸潤性生長的良性WHOⅠ級腫瘤占了腦膜瘤很大一部分,非典型性WHOⅡ級和惡性WHOⅢ級腦膜瘤分別占其總量的15%-20%和1%-2%。腦膜瘤主要是壓迫周圍血管、神經、腦實質等引起頭痛、頭暈、嘔吐、肢體無力、視力下降或喪失、嗅覺喪失、聽力下降、引起發(fā)作性抽搐、走路欠穩(wěn)等臨床癥狀,高級別腫瘤侵襲上述顱內結構也會引發(fā)相似癥狀。目前外科手術為腦膜瘤常用的治療方法,但即使已經被完全切除的良性腦膜瘤,其復發(fā)率仍然有7-20%,且隨著WHO級別的升高,復發(fā)率也增加。表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor-2)已經被承認參與多種人類惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展機制中,其基因的擴增和蛋白過表達與多種腫瘤預后相關,是多種惡性腫瘤的預后指標和治療靶點。HER2作為生長因子受體家族成員,與生長因子受體家族其它成員(包括EGFR即HER1,HER3, HER4)形成二聚體,向下游信號通路傳遞信息。目前還沒有發(fā)現(xiàn)HER2的專門配體。生長因子受體家族成員都是酪氨酸激酶受體,其它家族成員通過與配體結合,與HER2形成二聚體,穩(wěn)定和加強信號的傳導,形成一個復雜多樣化的生物生長信號網絡,從多個方面共同調節(jié)細胞生長發(fā)育,決定細胞轉歸。形成二聚體是生長因子受體家族其它成員發(fā)揮生物學作用的基礎。脂肪酸合酶(fatty acid synthase, FASN)是催化細胞內脂酸合成、轉運的關鍵酶,所合成的內源性脂肪酸為腫瘤細胞提供大量能量,此通路的激活被認為是惡性變和腫瘤細胞生存的必要條件。FASN在多種人類惡性腫瘤中也檢測到有顯著的高水平表達。有幾項研究發(fā)現(xiàn)FASN表達與腦膜瘤的侵襲性正相關。高級別腦膜瘤伴隨FASN高表達。組織學上同樣為良性的腦膜瘤,具有臨床侵襲性行為者有更高的FASN表達水平。在癌細胞過度增殖導致局部低氧和乳酸堆積環(huán)境下,FASN高表達使細胞適應缺氧狀態(tài)和酸性環(huán)境,顯示出FASN高表達癌細胞的選擇性生長優(yōu)勢。同時缺氧誘導因子1(HIF1)和Akt活化,上調SREBP-1,使FASN基因轉錄增強表達增加。FASN表達水平被報道可以作為多種腫瘤的預后指標,包括腦膜瘤。近年來發(fā)現(xiàn)HER2與FASN在多種激素相關腫瘤中檢測到同時高表達,相互之間存在PI3K/AKT信號通路上的聯(lián)系,可以雙向調節(jié),共同誘導細胞轉變成惡性亞型,促進癌細胞侵襲、轉移、增殖、抗凋亡、耐藥。腦膜瘤在中年女性中發(fā)病率明顯升高,是激素相關的腫瘤。有研究發(fā)現(xiàn)腦膜瘤中孕激素受體表達的缺失與腦膜瘤復發(fā)顯著相關,也可以作為腦膜瘤的預后因素之一。已經有相關的激素替代療法運用于臨床,治療腦膜瘤,但療效似乎不明顯。用FASN抑制劑處理人子宮內膜癌細胞可以導致雌激素依賴的雌激素受體表達下調和顯著減少核積累。上述說明FASN表達與性激素受體表達在腫瘤的生長中具有一定的聯(lián)系。二、研究目的及意義本研究采用免疫組織化學ElivisionTM法檢測56例不同病理等級腦膜瘤和15例正常腦膜組織中HER2、p-AKT、FASN、PR及Ki-67表達情況,了解其表達的基本形態(tài)和分布特征,分析其表達特點與臨床因素之間的聯(lián)系。除外腦膜瘤病理等級和手術切除范圍,希望能尋找出判斷腦膜瘤患者預后的新指標,同時為腦膜瘤的治療提供新思考方向和潛在的靶點。三、實驗過程1材料和方法在南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院神經外科的手術患者中選出腦膜瘤患者56例和15例手術切除腦組織附有正常腦膜患者。腦膜瘤患者手術時間是2006年至2013年,附有正常腦膜患者手術時間是2013年至2014年。收集這些患者的石蠟標本進行HER2、P-AKT、FASN、PR及Ki-67免疫組化檢測。入選標準有：已經是確診了的病例；第一次手術標本；術前未行化學治療和放射治療；切除范圍辛普森分級是Ⅰ級或Ⅱ級；術后14天內死亡者不入選。腦膜瘤中男性有23例,年齡23歲到72歲,平均年齡為48.7歲；女性有33例,年齡8歲到75歲,平均年齡46.36歲。影像學資料中腫瘤大小以在CT或磁共振圖像中測量的長寬高三者乘積計算。對患者進行電話或門診隨訪。隨訪時間5年。術后影像學檢查發(fā)現(xiàn)復發(fā)25例,復發(fā)時間中位數(shù)是24個月,最短3個月,最長51個月,同期非復發(fā)24例。WHOⅢ級腦膜瘤中失訪較多,能隨訪到的只有2例。2.主要試劑和方法采用免疫組織化學ElivisionTM法對標本檢測。一抗分別是HER2、FASN、 P-AKT、PR、Ki-67,Elivision TMplus檢測試劑盒,抗體稀釋液,內源性過氧化物酶阻斷劑,DAB顯色劑。實驗步驟按照說明書操作。每批標本染色均設置對應的已經被驗證了的陽性對照。HER2的陽性對照是人乳腺癌組織,FASN的陽性對照是人腦組織,P-AKT的陽性對照是人乳腺癌組織,PR的陽性對照是人子宮內膜組織,Ki-67的陽性對照是人乳腺癌組織。陰性對照以PBS液替代一抗。3.免疫組織化學結果判斷HER2以在腫瘤細胞膜上發(fā)現(xiàn)棕黃色著色為陽性細胞,根據(jù)細胞膜上著色深淺,細胞膜著色完整度和陽性細胞占總的腫瘤細胞的百分比來進行評分判定,參考乳腺癌HER2判定標準,強度分為陰性,弱陽性,中度陽性和強陽性四個等級。FASN以在腫瘤細胞質中發(fā)現(xiàn)棕黃色著色為陽性細胞,采用半定量分析方法,分別把陽性細胞著色深淺和陽性細胞所占的百分比評分,再將兩者的分數(shù)相加作為判定依據(jù),有弱陽性,中度陽性和強陽性三個強度等級。P-AKT也是以細胞質棕黃色著色的腫瘤細胞作為陽性細胞,評分標準與FASN基本相同。PR判定標準和Ki-67基本相同,兩者均以棕黃色著色定位在細胞核的腫瘤細胞為陽性細胞,計算陽性細胞在所有腫瘤細胞中的百分比。PR根據(jù)陽性細胞百分比分為弱,中,強三個等級。4.統(tǒng)計學分析將收集完整的數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析。HER2、PR、P-AKT、 FASN和Ki-67指數(shù)這幾個蛋白表達強度在復發(fā)和非復發(fā)組之間,兩個等級腦膜瘤之間,腦膜瘤和正常腦膜組之間的兩兩比較采用兩個獨立樣本非參數(shù)檢驗。上述幾個蛋白之間的相關性用Spearman秩和檢驗。用多個獨立樣本非參數(shù)檢驗對多個等級腦膜瘤進行組間比較。生存分析中,用Kaplan-Meier法對相關數(shù)據(jù)行單因素分析,差異顯著性比較用Log-rank法。用Cox比例風險模型研究多種臨床、病理因素對復發(fā)時間的影響(P少于0.05示差異有統(tǒng)計學意義)。四、結果1、復發(fā)組HER2表達強度強于非復發(fā)組(P=0.036),WHOI級復發(fā)組HER2表達強度強于WHOI級非復發(fā)組(P=0.023)。HER2表達情況在不同病理等級腦膜瘤中無差異。2、FASN、P-AKT腦膜瘤組表達強度均高于正常腦膜組(P=0.023,0.018),高級別腦膜瘤FASN、P-AKT表達強度均高于較低級別腦膜瘤和正常腦膜組(P0.05)。3、Ki-67指數(shù)復發(fā)組高于非復發(fā)組,隨著腦膜瘤病理等級增高而顯著增高(組間均為P0.05)。4、HER2與FASN表達強度正相關。FASN表達強度分別與P-AKT、Ki-67、骨侵犯呈正相關(均為P0.05),骨侵犯和Ki-67 LI是腫瘤復發(fā)的獨立危險因素(P0.01)。HER2中度陽性組術后無進展生存期明顯短于陰性和弱陽性組,男性術后無進展生存期明顯短于女性,(P0.05)。腫瘤WHO分級、HER2表達強度、Ki-67 LI、骨侵犯和性別與患者復發(fā)時間相關(P均0.05)。五、結論腦膜瘤中HER2與FASN的表達有正相關關系,HER2陽性表達程度有助于評估腦膜瘤術后無進展生存期,FASN和Ki-67高表達的腦膜瘤惡性程度較高或復發(fā)可能性較大,可作為腦膜瘤風險評估的重要指標。
【關鍵詞】：腦膜瘤 HER2 p-AKT FASN Ki-67 預后
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.45
【目錄】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-17
• 第一章 前言17-26
• 第二章 實驗材料與方法26-38
• 2.1 實驗材料26-31
• 2.2 實驗方法31-35
• 2.3 結果判定35-38
• 第三章 結果38-49
• 3.1 HER2在正常腦膜和各個病理等級腦膜瘤中基本形態(tài)及分布特征38
• 3.2 HER2表達情況在正常腦膜和不同級別腦膜瘤中的表達及定量分析38-39
• 3.3 FASN在正常腦膜和各個病理等級腦膜瘤中基本形態(tài)及分布特征39-40
• 3.4 FASN表達情況在正常腦膜和不同級別腦膜瘤中的表達及定量分析40-41
• 3.5 P-AKT在正常腦膜和各個病理等級腦膜瘤中基本形態(tài)及分布特征41-42
• 3.6 P-AKT表達情況在正常腦膜和不同級別腦膜瘤中的表達及定量分析42
• 3.7 Ki-67在正常腦膜和各個病理等級腦膜瘤中基本形態(tài)及分布特征42-43
• 3.8 Ki-67表達情況在正常腦膜和不同級別腦膜瘤中的表達及定量分析43
• 3.9 PR在正常腦膜和各個病理等級腦膜瘤中基本形態(tài)及分布特征43
• 3.10 HER2、FASN、P-AKT、Ki-67、PR、骨侵犯的相關性43-44
• 3.11 HER2、FASN、P-AKT、Ki-67、PR及多個臨床因素與腦膜瘤患者預后的關系44-45
• 3.12 COX比例風險模型單因素及多因素分析結果45-49
• 第四章 討論49-54
• 參考文獻54-58
• 綜述58-68
• 參考文獻65-68
• 縮略語和中英文對照表68-69
• 碩士期間發(fā)表的論文及取得的成果69-70
• 致謝70-72

【共引文獻】

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李鶴;胃癌組織中FAS和Her2的表達與預后的相關性研究[D];復旦大學;2013年

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本文編號：683468