本文關(guān)鍵詞：miR-125b新靶基因KLC2的鑒定及其在非小細(xì)胞肺癌惡性表型及預(yù)后中的作用機(jī)制研究

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【摘要】：研究背景及目的：2012年數(shù)據(jù)顯示肺癌患者在全球的死亡率接近五分之一。復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移仍是肺癌臨床治療失敗的首要原因。越來(lái)越多的證據(jù)顯示,微小RNA在人類(lèi)腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色。最近,miR-125b以及它的靶基因已經(jīng)被證實(shí)在多種腫瘤的侵襲及遷移中扮演著重要的角色。例如,miR-125b能夠直接調(diào)節(jié)C-Jun蛋白的表達(dá)或者同時(shí)在轉(zhuǎn)錄水平及翻譯水平直接作用于絲氨酸／蘇氨酸激酶混合譜系激酶(MLK]3來(lái)抑制黑色素瘤細(xì)胞的遷移。MiR-125b也被報(bào)道可以作為腫瘤抑制因子直接靶向PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路來(lái)抑制尤文氏肉瘤細(xì)胞的遷移和侵襲。MiR-125b在肝癌的轉(zhuǎn)移中一方面能夠通過(guò)抑制癌基因LIN28B的表達(dá),也能夠通過(guò)下調(diào)抑制因子SUV39H1起到抑制腫瘤的作用。除此之外,基質(zhì)金屬(MMP)13基因在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中作為miR-125b的直接靶基因,其表達(dá)被抑制。相反,在乳腺癌及I型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中,miR-125b已經(jīng)被證實(shí)能夠分別靶向抑癌基因(STARD)13和腫瘤蛋白TP53INP1扮演促癌基因的角色。肺癌病人,如果血清中miR-125b高表達(dá),則明顯預(yù)后較差。在我們課題組之前的研究中證實(shí),在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中,下調(diào)miR-125b,能夠逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MTAl的侵襲和遷移。然而在非小細(xì)胞肺癌中miR-125b如何通過(guò)作用靶基因來(lái)闡明其在腫瘤細(xì)胞侵襲及遷移中的角色尚未明確。最近,我們通過(guò)生物信息學(xué)來(lái)預(yù)測(cè)它的靶基因。驅(qū)動(dòng)蛋白輕鏈(KLC)2是基于生物信息學(xué),從三個(gè)不同的公共的miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)(Targetscan, miRanda, miRWalk)所預(yù)測(cè)到的miR-125b的其中一個(gè)靶基因,我們預(yù)測(cè)到在KLC2的3'UTR區(qū)存在miR-125b的潛在的結(jié)合位點(diǎn)。KLC2是驅(qū)動(dòng)蛋白-1中最具特征性的輕鏈同分異構(gòu)體之一,在細(xì)胞中廣泛表達(dá),通過(guò)運(yùn)輸大量貨物,包括細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器以及各種微管泡亞型,起到分子發(fā)動(dòng)機(jī)的作用。Smad2在TGFβ信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中起著作用,Smad2還是一個(gè)已知的KLC2的結(jié)合伴侶,驅(qū)動(dòng)蛋白-1的貨物。TGFβ信號(hào)通路在致癌過(guò)程中發(fā)揮著多重作用。關(guān)于KLC2基因在腫瘤中的作用的另外一個(gè)線(xiàn)索來(lái)源于一個(gè)發(fā)現(xiàn),KLC2參與被認(rèn)為是前列腺癌易感基因以及參與與TGFβ誘導(dǎo)的Smad2信號(hào)通路的狐猴酪氨酸激酶-2的調(diào)節(jié)。在最近的研究中,我們?cè)u(píng)估了在非小細(xì)胞肺癌中KLC2的臨床意義以及它在非小細(xì)胞肺癌惡性表型中的作用。下一步,我們證實(shí)在非小細(xì)胞肺癌中,KLC2為miR-125b的靶基因,并且認(rèn)定它們之間能夠直接作用。實(shí)驗(yàn)材料及方法：1、組織樣本和組織芯片16例新鮮非小細(xì)胞肺癌組織(薩8)及其臨近癌旁組織(n=8)從南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院心胸外科手術(shù)室獲得。所有的病人術(shù)前均未接受過(guò)放療或化療。癌旁組織及腫瘤組織均通過(guò)南方醫(yī)院病理科證實(shí)。140對(duì)人類(lèi)非小細(xì)胞肺癌及其臨近癌旁組織芯片購(gòu)于上海芯超生物科技有限公司。2、細(xì)胞培養(yǎng)人類(lèi)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株(SPC-A-1,95D, A549, H460和H1299)購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù),用RPMI-DMEM (Hyclone)加10%胎牛血清(FBS, Gibco, USA)組成的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。所有的細(xì)胞均在37℃含5%CO2的濕潤(rùn)的孵箱中培養(yǎng)。3、質(zhì)粒及寡核苷酸的構(gòu)建KLC2(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM 022822的編碼序列克隆進(jìn)pReceive-M98載體(由GeneCopoeia,USA合成),其編碼序列并不包含與miR-125b在3'UTR區(qū)的結(jié)合位點(diǎn)。靶向人類(lèi)KLC2基因的短小RNA序列被克隆進(jìn)hU6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin載體,形成KLC2-si質(zhì)粒,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染時(shí)以scramble siRNA也就是KLC2-si/control作為對(duì)照。4、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染之前18-24h,先將實(shí)驗(yàn)用的細(xì)胞株接種子6孔板中(2×105/孔)。適量的質(zhì)粒(3ug/孔),miR-125b inhibitor,mimics或NC (100 pmol)加入相應(yīng)的孔中,使用Lipofectamine 3000(Invitrogen)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染之后在37℃含5%CO2的濕潤(rùn)的孵箱中孵育,轉(zhuǎn)染48 h后收細(xì)胞。KLC2和miR-125b在SPC-A-1及95D細(xì)胞株中的共轉(zhuǎn)染也遵循相似的操作步驟。5、RNA的提取和反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量PCR人類(lèi)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株及新鮮組織標(biāo)本的總RNA使用Trizol reagent (Takara,大連,中國(guó))來(lái)提取,所有步驟均參照說(shuō)明書(shū)�？俁NA提取后按照試劑盒中的說(shuō)明書(shū)步驟(PrimeScript RT reagent Kit, TaKaRa, Dalian, China)來(lái)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA以及PCR反應(yīng)。各引物序列均由英濰捷基公司合成。最后采用2-ΔΔCt法來(lái)計(jì)算miR-125b和KLC2的相對(duì)表達(dá)率。6、蛋白免疫印跡使用RIPA裂解液提取組織標(biāo)本以及細(xì)胞中的總蛋白。在下面各章節(jié)中我們會(huì)詳細(xì)闡述步驟。Anti-p-actin抗體作為內(nèi)參使用。最后,蛋白免疫印記條帶使用軟件QuantityOne v4.6.2來(lái)顯像。7、劃痕實(shí)驗(yàn)將經(jīng)胰酶消化好的細(xì)胞分別接種1×106/孔于6孔板,完全培養(yǎng)基培養(yǎng)過(guò)夜,相應(yīng)的質(zhì)�；蚬押塑账徂D(zhuǎn)染處理細(xì)胞,待細(xì)胞長(zhǎng)至約90%匯合時(shí),用10u1槍頭垂直在培養(yǎng)孔中部輕輕劃過(guò),繼續(xù)培養(yǎng)48h。每個(gè)孔隨機(jī)選取5個(gè)有劃痕穿過(guò)的視野,分別觀察0h,48h時(shí)各組細(xì)胞劃痕處細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)變化,并拍照取樣,應(yīng)用ImageJ軟件測(cè)劃痕相對(duì)寬度,獨(dú)立實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。8、Transwell、室細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)所用Transwell小室購(gòu)自BD Bioscience(Bedford, MA, USA,24-well insert,孔徑： 8 μm)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染之后取對(duì)數(shù)期的生長(zhǎng)細(xì)胞,胰酶消化后輕輕吹打均勻,終止消化后離心棄去培養(yǎng)液,PBS洗1-2遍,用含BSA的無(wú)血清培養(yǎng)基重懸,調(diào)整細(xì)胞密度至1-10x105,取4×105/200-1細(xì)胞懸液于上室,然后加500μl含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基于下室,370C培養(yǎng)24～48h。取出小室,固定染色,室溫空氣風(fēng)干。顯微鏡下隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)穿過(guò)膜的細(xì)胞數(shù)。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)是在Transwell小室底部膜鋪上人工重構(gòu)基底膜材料Matrigel,方法步驟同細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。9、雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)報(bào)告系統(tǒng)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)報(bào)告系統(tǒng)質(zhì)�；蛴缮虾＜敾蚝铣�,報(bào)告系統(tǒng)質(zhì)�；蚱伟↘LC2 3'UTR生型或突變型。在熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)中,所用細(xì)胞株為293T和SPC-A-1細(xì)胞株,轉(zhuǎn)染試劑為購(gòu)于廣州英濰捷基公司的Lipofectamine3000,整個(gè)步驟遵循共轉(zhuǎn)染的步驟。共轉(zhuǎn)染后48小時(shí)收取細(xì)胞,熒光素酶的活性由雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)報(bào)告系統(tǒng)測(cè)定(Promega, Madison,WI, USA),最后以海腎熒光值作為內(nèi)參計(jì)算出螢火蟲(chóng)熒光以及海腎熒光的活性比率。10、免疫組化免疫組化試劑盒購(gòu)于北京中杉金橋。KLC2抗兔多克隆抗體(1:100; Proteintech,USA;17668-1-AP)為實(shí)驗(yàn)用一抗。最終免疫組化染色評(píng)分采用半定量的方法。整個(gè)免疫組化實(shí)驗(yàn)參照中杉金橋的免疫組化試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。免疫組化雙重染色試劑盒(Mo/HRP+Rb/AP)也購(gòu)于中杉金橋(貨號(hào)：DS-0001),實(shí)驗(yàn)步驟均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。11、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,所有實(shí)驗(yàn)均至少重復(fù)3次,實(shí)驗(yàn)中所有的數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩樣本均數(shù)的比較采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)(two-tailed unpaired Student's t-test) (qRT-PCR,劃痕實(shí)驗(yàn),遷移或侵襲實(shí)驗(yàn),雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)),p0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組以上樣本均數(shù)比較采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的方差分析(One-Way ANOVA),方差齊性檢驗(yàn)采用Levene's Test。 MiR-125b和KLC2的相關(guān)性分析采用Spearman's相關(guān)。Kaplan-Meier方法和the log-rank檢驗(yàn)來(lái)評(píng)估KLC2高表達(dá)肺癌患者總的生存預(yù)后。KLC2表達(dá)水平與各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系采用χ2檢驗(yàn)。Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型的單因素以及多因素分析來(lái)決定Hazard ratio (HR)以及預(yù)后因子。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、KLC2蛋白在NSCLC細(xì)胞株中高表達(dá),在老年NSCLC患者中為獨(dú)立的不良預(yù)后因素。蛋白免疫印跡結(jié)果顯示,跟正常肺上皮細(xì)胞HBE相比,在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中KLC2蛋白是高表達(dá)的,而且,在A549,H460以及H1299細(xì)胞中的表達(dá)高于在SPC-A-1和95D中的表達(dá)。觀察細(xì)胞的遷移及侵襲能力發(fā)現(xiàn),KLC2蛋白高表達(dá)的NSCLC細(xì)胞株的遷移和侵襲能力也較強(qiáng)。免疫組化觀察組織芯片中KLC2蛋白表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn),在腫瘤細(xì)胞中KLC2蛋白高表達(dá),且高表達(dá)主要集中在細(xì)胞漿中,在正常肺組織細(xì)胞呈低表達(dá)或不表達(dá)。免疫組化雙重染色發(fā)現(xiàn),KLC2蛋白主要在腫瘤細(xì)胞細(xì)胞漿中表達(dá),染色呈現(xiàn)紅色,而Ki-67主要在細(xì)胞核中表達(dá),染色呈現(xiàn)棕色。在140例人類(lèi)原發(fā)非小細(xì)胞肺癌組織中,67.1%的標(biāo)本中KLC2呈高表達(dá),而在140例臨近癌旁組織中,只有2.1%呈高表達(dá),二者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在140例NSCLC患者中,KLC2的表達(dá)水平與各臨床病理特征未見(jiàn)明顯相關(guān)性。但在老年NSCLC患者中(≥60歲,81例),KLC2高表達(dá)影響患者總生存率,p=0.026,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。多因素分析顯示,KLC2高表達(dá)在老年NSCLC患者中是獨(dú)立的不良預(yù)后因素。在男性、鱗癌、NO期或者臨床分期Ⅰ/Ⅱ期的病人中,KLC2蛋白高表達(dá)也預(yù)示著患者有預(yù)后不良的趨勢(shì)。2、KLC2明顯增強(qiáng)了NSCLC細(xì)胞株的侵襲遷移能力。利用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,成功構(gòu)建KLC2敲除及過(guò)表達(dá)細(xì)胞株。在MTT實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),在：NSCLC細(xì)胞株中,KLC2過(guò)表達(dá)或敲除對(duì)細(xì)胞的增殖能力沒(méi)有影響。SPC-A-1、95D細(xì)胞株中,劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell:遷移及侵襲實(shí)驗(yàn)均表明KLC2過(guò)表達(dá)明顯增強(qiáng)了細(xì)胞株的遷移及侵襲能力,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。相反,KLC2的下調(diào)則明顯降低了細(xì)胞株的遷移和侵襲能力。3、miR-125b通過(guò)靶向KLC2 3'UTR區(qū)抑制KLC2蛋白的表達(dá)。生物信息學(xué)預(yù)示在KLC2的3'UTR區(qū)存在miR-125b的結(jié)合位點(diǎn)。為了證明miR-125b能直接作用于KLC2的3'UTR區(qū),從而靶向KLC2的表達(dá),我們?cè)O(shè)計(jì)了雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng),克隆了KLC2 3'UTR區(qū)野生型及突變型熒光素酶報(bào)告基因。將野生型或突變型熒光素酶報(bào)告基因與miR-125b mimics或者miR-control共轉(zhuǎn)染進(jìn)]HEK-293T和SPC-A-1細(xì)胞株中,我們發(fā)現(xiàn)跟對(duì)照相比,miR-125b過(guò)表達(dá)使野生型KLC2 3'UTR區(qū)熒光素酶的活性減少了2倍,而在突變型的KLC2 3'UTR區(qū)熒光素酶活性未見(jiàn)明顯變化。RT-PCR檢測(cè)在人類(lèi)5株NSCLC細(xì)胞株中miR-125b的表達(dá)水平,結(jié)果顯示,KLC2高表達(dá)的細(xì)胞株(A549,H460和H1299)與KLC2低表達(dá)的細(xì)胞株(SPC-A-1和95D)相比,miR-125b的表達(dá)水平明顯受抑制。為了進(jìn)一步證實(shí)miR-125b能直接作用于KLC2,我們利用RT-PCR夏蛋白免疫印記分別檢測(cè)在miR-125b敲除及過(guò)表達(dá)后,KLC2 mRNA以及蛋白水平的變化。數(shù)據(jù)顯示,在SPC-A-1和95D細(xì)胞株中,miR-125b上調(diào)后,KLC2蛋白表達(dá)水平下調(diào)了1-2.4倍,相反,miR-125b下調(diào)后,KLC2蛋白表達(dá)升高。在mRNAA平上,miR-125b過(guò)表達(dá)或敲除對(duì)KLC2 mRNA表達(dá)的影響不足40%。在8對(duì)人類(lèi)新鮮NSCLC組織及其癌旁組織樣本中,KLC2蛋白表達(dá)與miR-125b的表達(dá)呈現(xiàn)明顯的負(fù)相關(guān)(R-0.691,p=0.003)。4、KLC2影響miR-125b對(duì)NSCLC細(xì)胞株侵襲遷移能力的抑制作用。為了進(jìn)一步證實(shí)KLC2作為關(guān)鍵因子能影響miR-125b對(duì)NSCLC細(xì)胞株遷移及侵襲能力的抑制作用,在SPC-A-1和95D細(xì)胞株中,我們將KLC2和miR-125b共同過(guò)表達(dá)。qRT-PCR和western blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。miR-125b上調(diào)后對(duì)KLC2在]mRNA水平及蛋白水平的影響與之前實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。KLC2過(guò)表達(dá)后并未對(duì)miR-125b的表達(dá)產(chǎn)生影響。另一方面,miR-125b能明顯降低NSCLC細(xì)胞株的遷移及侵襲能力,這與KLC2在NSCLC中的作用正好相反。更重要的是,在SPC-A-1和95D細(xì)胞株中,外源性的KLC2幾乎完全拮抗了miR-125b對(duì)細(xì)胞株侵襲遷移能力的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：1、KLC2蛋白在NSCLC細(xì)胞株及組織中高表達(dá),在老年NSCLC患者中,KLC2蛋白高表達(dá)是獨(dú)立的不良預(yù)后因素。2、KLC2明顯增強(qiáng)了NSCLC細(xì)胞株的侵襲及遷移能力。3、MiR-125b通過(guò)靶向KLC2 3'UTR區(qū)抑制KLC2蛋白的表達(dá)。在NSCLCI臨床組織樣本中,miR-125b表達(dá)與KLC2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。4、KLC2幾乎完全拮抗了miR-125b對(duì)NSCLC細(xì)胞株侵襲遷移能力的抑制作用。5、KLC2作為miR-125b的功能性靶基因,扮演著原癌基因的角色。
【關(guān)鍵詞】：KLC2 miR-125b 非小細(xì)胞肺癌 預(yù)后 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-10
• ABSTRACT10-22
• 前言22-26
• 第一章 KLC2蛋白在NSCLC中的表達(dá)及臨床意義研究26-43
• 1.1 材料與設(shè)備26-27
• 1.2 方法27-35
• 1.3 結(jié)果35-36
• 1.4 結(jié)論36-43
• 第二章 KLC2對(duì)NSCLC侵襲遷移能力的影響43-52
• 2.1 材料與設(shè)備43-44
• 2.2 方法44-48
• 2.3 結(jié)果48-51
• 2.4 結(jié)論51-52
• 第三章 miR-125b靶向調(diào)節(jié)KLC2的機(jī)制研究52-61
• 3.1 材料與設(shè)備52-53
• 3.2 方法53-57
• 3.3 結(jié)果57-58
• 3.4 結(jié)論58-61
• 第四章 miR-125b靶向調(diào)節(jié)KLC2對(duì)NSCLC侵襲遷移的影響61-67
• 4.1 材料與設(shè)備61-63
• 4.2 方法63-64
• 4.3 結(jié)果64
• 4.4 結(jié)論64-67
• 討論67-71
• 參考文獻(xiàn)71-75
• 全文小結(jié)75-77
• 碩士期間發(fā)表論文77-78
• 致謝78-80

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馮望德;伍嬌嬌;;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與宮頸癌的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)學(xué);2013年07期

2 劉勸;趙興宇;白瑞珍;秦艷;華東;;DRR1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義[J];長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年05期

3 郭威;張全斌;趙耀東;;TGF-β信號(hào)通路對(duì)膠質(zhì)瘤干/祖細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)[J];中國(guó)神經(jīng)腫瘤雜志;2013年04期

4 王國(guó)振;王新穎;;髓源性抑制細(xì)胞促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的非免疫學(xué)機(jī)制研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年07期

5 胡小美;關(guān)錚;;子宮內(nèi)膜息肉的分子生物學(xué)研究[J];國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2014年06期

6 符良斌;廖天安;王鴻;鄧偉;周斌;王友元;;TGF-β1對(duì)人舌鱗狀細(xì)胞癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的誘導(dǎo)作用及其對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2015年04期

7 劉世佳;潘香羽;李發(fā)弟;王維民;李廷福;;綿羊BMP15基因特征、組織表達(dá)及其與產(chǎn)羔數(shù)性狀的關(guān)聯(lián)性分析[J];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2015年03期

8 賈陌楊;王要軍;;結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)通路[J];國(guó)際消化病雜志;2015年03期

9 YAN XiaoHua;PAN Jun;XIONG WanWan;CHENG MinZhang;SUN YingYuan;ZHANG SuPing;CHEN YeGuang;;Yin Yang 1(YY1) synergizes with Smad7 to inhibit TGF-β signaling in the nucleus[J];Science China(Life Sciences);2014年01期

10 陳一天;徐益琛;陶累累;印洪林;余波;陳龍邦;;小細(xì)胞肺癌中MTA1蛋白的表達(dá)及其與化療敏感性和預(yù)后的關(guān)系[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王魏;聚L-谷氨酸/殼聚糖材料在脂肪組織工程以及膽管癌三維培養(yǎng)模型中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2013年

2 張斌豪;Smad4缺失通過(guò)激活A(yù)kt通路增加結(jié)直腸癌惡性程度并誘導(dǎo)5-氟尿嘧啶耐藥性[D];華中科技大學(xué);2013年

3 肖群根;LRIG2基因全長(zhǎng)及胞外段對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2013年

4 艾熙;非Smad通路在小鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用[D];華中科技大學(xué);2012年

5 楊浪;胃癌干細(xì)胞的分離鑒定及其在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用與分子機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 張飛;mTORC2/Rictor調(diào)控非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

7 張建超;轉(zhuǎn)錄因子SOX4誘導(dǎo)人乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換并促進(jìn)乳腺癌進(jìn)程研究[D];東北師范大學(xué);2013年

8 周琳;Ezrin在肝細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及吳茱萸堿對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2 Ezrin生物學(xué)行為的影響[D];中南大學(xué);2013年

9 丁則陽(yáng);TIF1γ通過(guò)抑制TGF-β信號(hào)通路調(diào)控肝癌生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移[D];華中科技大學(xué);2013年

10 蔡鋒;TGFβ1/Smad-SDF-1α/CXCR4在成纖維細(xì)胞—垂體腺瘤細(xì)胞相互作用中的機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊占鋒;MTA-1與KISS-1在膀胱癌中的表達(dá)及臨床病理意義[D];鄭州大學(xué);2013年

2 趙瑛;ZNF580在TGF-β誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)eNOS中的作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

3 邢艷超;半相合基因效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞治療宮頸癌的小鼠模型研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 龍恒;結(jié)直腸癌中Lumican基因表達(dá)及其與EMT的關(guān)系研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 芮文娟;復(fù)方芪參提取物通過(guò)抑制肝纖維化和PAI-1mRNA的表達(dá)而阻礙肝細(xì)胞癌發(fā)展[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

6 江文靜;N-cadherin、E-cadherin和p63在宮頸癌中的表達(dá)及相關(guān)性[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

7 耿文文;Runx2對(duì)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化調(diào)控機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

8 劉登堯;IL-17和VEGF在食管鱗癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

9 張馳羽;姜黃素對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)機(jī)理的研究[D];江南大學(xué);2013年

10 程浩;進(jìn)展期胃癌TS和ABCG2蛋白的表達(dá)及其臨床意義[D];承德醫(yī)學(xué)院;2013年

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本文編號(hào)：676834