本文關(guān)鍵詞：miRNA-101在膀胱癌中對(duì)EZH2基因表達(dá)的調(diào)控作用

  更多相關(guān)文章： 膀胱癌 miRNA-101 EZH2 調(diào)控

【摘要】：目的研究miRNA-101(miR-101)通過對(duì)EZH2基因的靶向調(diào)控作用,介導(dǎo)膀胱癌的發(fā)生發(fā)展。方法1.運(yùn)用Real-time PCR檢測miR-101在膀胱癌及相應(yīng)的癌旁組織中的表達(dá)量;2.采用組織芯片,通過免疫組織化學(xué)法檢測EZH2基因在膀胱癌組織及相應(yīng)的癌旁組織中的表達(dá)情況;3.運(yùn)用RT-PCR及Western blot分別檢測EZH2基因在膀胱癌及相應(yīng)的癌旁組織中mRNA及蛋白表達(dá)情況;4.運(yùn)用mi RNA預(yù)測軟件:miRanda、PicTar和Targetscan,預(yù)測與EZH2 mRNA3'-UTR有互補(bǔ)結(jié)合位點(diǎn)的miRNA;5.運(yùn)用雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)檢測miR-101與EZH2 mRNA 3'-UTR是否有互補(bǔ)結(jié)合靶點(diǎn);結(jié)果通過Real-time PCR檢測顯示mi R-101在膀胱癌組織中轉(zhuǎn)錄水平均低于相應(yīng)的癌旁組織(P0.05),提示其可能在膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展中起到了抑癌作用;通過免疫組織化學(xué)法、RT-PCR、Western blot法檢測顯示EZH2在膀胱癌組織中表達(dá)量均高于相應(yīng)的癌旁組織(P0.05),提示其可能在膀胱癌的進(jìn)展中發(fā)揮了促癌作用;通過miRanda、PicTar和Targetscan三個(gè)軟件檢測顯示miR-101與EZH2 3'-UTR有互補(bǔ)結(jié)合位點(diǎn);通過雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)檢測進(jìn)一步證明miR-101與EZH2 3'-UTR有互補(bǔ)結(jié)合位點(diǎn),并抑制其表達(dá);結(jié)論miRNA-101通過負(fù)向調(diào)控EZH2基因的表達(dá),發(fā)揮抑制膀胱癌的作用效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 miRNA-101 EZH2 調(diào)控
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對(duì)照表9-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器13-14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 1.4 試劑的配制15-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-34
• 2.1 膀胱癌細(xì)胞的培養(yǎng)16-18
• 2.2 免疫組織化學(xué)法18-20
• 2.3 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)20-25
• 2.4 實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)25-27
• 2.5 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)27-30
• 2.6 生物學(xué)軟件預(yù)測miRNA與靶基因的結(jié)合位點(diǎn)30-31
• 2.7 雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)31-34
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-45
• 3.1 免疫組織化學(xué)法檢測EZH2在不同組織中的表達(dá)34-37
• 3.2 RT-PCR檢測EZH2mRNA在不同組織中的表達(dá)37-39
• 3.3 Western blot實(shí)驗(yàn)檢測EZH2蛋白在不同組織中的表達(dá)39-41
• 3.4 Real-Time PCR檢測miR-101在不同組織中的表達(dá)41-42
• 3.5 生物學(xué)軟件預(yù)測mi RNA與靶基因的結(jié)合位點(diǎn)42-43
• 3.6 雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)43-45
• 4 討論45-51
• 5 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 附錄（綜述）58-71
• 參考文獻(xiàn)67-71
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄71-72
• 致謝72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Fang Yang;Li-Zhi Lv;Qiu-Cheng Cai;Yi Jiang;;Potential roles of EZH2, Bmi-1 and mi R-203 in cell proliferation and invasion in hepatocellular carcinoma cell line Hep3B[J];World Journal of Gastroenterology;2015年47期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王偉;MiR-34a在人膀胱癌組織中的表達(dá)[D];河北聯(lián)合大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：670306