本文關(guān)鍵詞：miRNA-101在膀胱癌中對EZH2基因表達的調(diào)控作用

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【摘要】：目的研究miRNA-101(miR-101)通過對EZH2基因的靶向調(diào)控作用,介導膀胱癌的發(fā)生發(fā)展。方法1.運用Real-time PCR檢測miR-101在膀胱癌及相應(yīng)的癌旁組織中的表達量;2.采用組織芯片,通過免疫組織化學法檢測EZH2基因在膀胱癌組織及相應(yīng)的癌旁組織中的表達情況;3.運用RT-PCR及Western blot分別檢測EZH2基因在膀胱癌及相應(yīng)的癌旁組織中mRNA及蛋白表達情況;4.運用mi RNA預(yù)測軟件:miRanda、PicTar和Targetscan,預(yù)測與EZH2 mRNA3'-UTR有互補結(jié)合位點的miRNA;5.運用雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)檢測miR-101與EZH2 mRNA 3'-UTR是否有互補結(jié)合靶點;結(jié)果通過Real-time PCR檢測顯示mi R-101在膀胱癌組織中轉(zhuǎn)錄水平均低于相應(yīng)的癌旁組織(P0.05),提示其可能在膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展中起到了抑癌作用;通過免疫組織化學法、RT-PCR、Western blot法檢測顯示EZH2在膀胱癌組織中表達量均高于相應(yīng)的癌旁組織(P0.05),提示其可能在膀胱癌的進展中發(fā)揮了促癌作用;通過miRanda、PicTar和Targetscan三個軟件檢測顯示miR-101與EZH2 3'-UTR有互補結(jié)合位點;通過雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)檢測進一步證明miR-101與EZH2 3'-UTR有互補結(jié)合位點,并抑制其表達;結(jié)論miRNA-101通過負向調(diào)控EZH2基因的表達,發(fā)揮抑制膀胱癌的作用效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 miRNA-101 EZH2 調(diào)控
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對照表9-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-16
• 1.1 實驗材料13
• 1.2 實驗儀器13-14
• 1.3 實驗試劑14-15
• 1.4 試劑的配制15-16
• 2 實驗方法16-34
• 2.1 膀胱癌細胞的培養(yǎng)16-18
• 2.2 免疫組織化學法18-20
• 2.3 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)20-25
• 2.4 實時定量聚合酶鏈反應(yīng)25-27
• 2.5 蛋白印跡實驗27-30
• 2.6 生物學軟件預(yù)測miRNA與靶基因的結(jié)合位點30-31
• 2.7 雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)31-34
• 3 實驗結(jié)果34-45
• 3.1 免疫組織化學法檢測EZH2在不同組織中的表達34-37
• 3.2 RT-PCR檢測EZH2mRNA在不同組織中的表達37-39
• 3.3 Western blot實驗檢測EZH2蛋白在不同組織中的表達39-41
• 3.4 Real-Time PCR檢測miR-101在不同組織中的表達41-42
• 3.5 生物學軟件預(yù)測mi RNA與靶基因的結(jié)合位點42-43
• 3.6 雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)43-45
• 4 討論45-51
• 5 結(jié)論51-52
• 參考文獻52-58
• 附錄（綜述）58-71
• 參考文獻67-71
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄71-72
• 致謝72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Fang Yang;Li-Zhi Lv;Qiu-Cheng Cai;Yi Jiang;;Potential roles of EZH2, Bmi-1 and mi R-203 in cell proliferation and invasion in hepatocellular carcinoma cell line Hep3B[J];World Journal of Gastroenterology;2015年47期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王偉;MiR-34a在人膀胱癌組織中的表達[D];河北聯(lián)合大學;2011年

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本文編號：670306