本文關(guān)鍵詞：葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78對(duì)人舌癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制的研究

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【摘要】：目的探討葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glμcose regμlated protein 78,Grp78)對(duì)人舌癌細(xì)胞系Tca-8113侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及其分子機(jī)制。方法應(yīng)用pc DNA3.1(+)-Grp78重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染舌癌細(xì)胞系Tca-8113,經(jīng)G418篩選得到穩(wěn)定表達(dá)Grp78的克隆(78C6),免疫印跡法檢測(cè)Grp78表達(dá)的效率,再應(yīng)用si RNA-Grp78和si RNA-FAK轉(zhuǎn)染78C6敲除Grp78和FAK表達(dá),應(yīng)用劃痕和Transwell實(shí)驗(yàn)方法分析其遷移和侵襲能力,免疫熒光和細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞骨架排列和細(xì)胞的粘附能力,GST-pulldown技術(shù)對(duì)Rac1和Rho A活性進(jìn)行分析,Western blot檢測(cè)p-FAK、FAK、Rac1、Rho A的蛋白表達(dá)。結(jié)果1.特異性上調(diào)Grp78表達(dá)明顯促進(jìn)舌癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移,并且此作用可以被si RNA-Grp78轉(zhuǎn)染抑制(P0.05)。2.高表達(dá)Grp78可使舌癌細(xì)胞的粘附能力增加,下調(diào)Grp78后細(xì)胞的粘附能力降低(P0.05)。3.細(xì)胞骨架染色結(jié)果表明,特異性上調(diào)Grp78后細(xì)胞骨架微絲主要分布于細(xì)胞邊緣,而這種作用可以被si RNA-Grp78轉(zhuǎn)染抑制,導(dǎo)致細(xì)胞皮質(zhì)部位出現(xiàn)明顯的應(yīng)力纖維。4.特異性上調(diào)Grp78后Rac1的活性水平增高Rho A活性降低,而si RNA-Grp78轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中Rac1活性降低,Rho A活性升高(P0.05),但Rho A和Rac1的蛋白表達(dá)水平不受Grp78的影響(P0.05)。5.特異性上調(diào)Grp78后p-FAK表達(dá)增高,下調(diào)Grp78后p-FAK表達(dá)降低,(P0.05),但FAK總蛋白表達(dá)水平不受Grp78的影響。6.在78C6細(xì)胞中下調(diào)FAK后,Rho A活性升高而Rac1的活性降低(P0.05),但Rho A和Rac1的蛋白表達(dá)水平不受FAK的影響(P0.05)。7.在78C6細(xì)胞中下調(diào)FAK表達(dá)后,與對(duì)照組相比,細(xì)胞的遷移侵襲及粘附能力明顯降低(P0.05),細(xì)胞骨架染色顯示下調(diào)FAK后細(xì)胞中應(yīng)力纖維明顯增多。結(jié)論1.Grp78的表達(dá)水平可以影響舌癌細(xì)胞的遷移、侵襲、粘附及細(xì)胞骨架的排列。2.Grp78可能通過調(diào)節(jié)FAK的磷酸化影響Rho A和Rac1的活性從而促進(jìn)舌癌細(xì)胞發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。
【關(guān)鍵詞】：葡糖糖調(diào)節(jié)蛋白78 黏著斑激酶 舌癌 侵襲轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.86
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語(yǔ)8-9
• 前言9-10
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法10-14
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果14-16
• 討論16-20
• 結(jié)論20-21
• 本研究創(chuàng)新性的自我平評(píng)價(jià)21-22
• 參考文獻(xiàn)22-25
• 附圖附表25-34
• 綜述34-45
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 在學(xué)期間科研成績(jī)45-46
• 致謝46-47
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷47-48

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王莉;張旭;劉麗秋;孫玉鴻;朱艷麗;趙玉德;江清林;;RhoA和C-myc在胃癌發(fā)生發(fā)展中的表達(dá)及意義[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2014年19期

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本文編號(hào)：668162