本文關(guān)鍵詞：曲古菌素A調(diào)控STAT5A干預(yù)胃癌細(xì)胞增殖的研究

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【摘要】：胃癌(gastric cancer)是一種常見(jiàn)腫瘤，全球每年約有70萬(wàn)人死于胃癌。目前對(duì)胃癌的治療以手術(shù)切除為主，同時(shí)配合放療和化療藥物治療，但由于放療和化療對(duì)機(jī)體正常細(xì)胞有副作用，導(dǎo)致臨床療效降低，病人預(yù)后不良。因此，尋求胃癌新的治療靶標(biāo)及藥物成為目前亟待解決的問(wèn)題。 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子5A(signal transducer and activator of Transcription5A,STAT5A)是STAT家族中的一員。有研究表明，正常組織STAT5A的表達(dá)量較少，但腫瘤組織中STAT5A的表達(dá)量則會(huì)明顯增多。此外，STAT5A與腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、存活與凋亡存在著密切的關(guān)系。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，其下游有許多對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)，其中端粒酶是其重要靶點(diǎn)之一，當(dāng)敲除STAT5A后，端粒酶的表達(dá)量減少，活性降低。端粒酶具有使細(xì)胞增殖分裂的作用，其活性的高低關(guān)系著腫瘤細(xì)胞增殖能力的強(qiáng)弱。因此，推測(cè)胃癌細(xì)胞的高度增殖可能與STAT5A表達(dá)增加，進(jìn)而調(diào)節(jié)端粒酶活性影響細(xì)胞增殖能力相關(guān)。 曲古菌素A（TrichostatinA, TSA）是一種廣譜的組蛋白去乙�；福╤istonedeacetylases, HDACs）抑制劑。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，TSA對(duì)多種腫瘤具有促進(jìn)凋亡及抑制增殖等作用。究其原因是由于TSA可以通過(guò)調(diào)節(jié)組蛋白乙�；潭�，從而調(diào)控腫瘤中相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄及其蛋白的表達(dá)，，進(jìn)而干預(yù)腫瘤的生物學(xué)功能。目前，已有文獻(xiàn)報(bào)道，TSA對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞周期等具有一定的調(diào)節(jié)作用，但具體機(jī)制尚未明確。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?本實(shí)驗(yàn)旨在研究TSA是否通過(guò)調(diào)控STAT5A表達(dá)，對(duì)胃癌細(xì)胞增殖能力及其細(xì)胞周期產(chǎn)生影響；并且觀察這種作用是否由調(diào)節(jié)端粒酶活性產(chǎn)生；探討TSA的干預(yù)作用是否通過(guò)調(diào)控Ⅰ類(lèi)HDACs活性而實(shí)現(xiàn)。 實(shí)驗(yàn)方法： 實(shí)驗(yàn)以胃癌細(xì)胞系SGC-7901、BGC-823及胃上皮細(xì)胞系GES-1為觀察對(duì)象，通過(guò)western blot技術(shù)檢測(cè)其STAT5A表達(dá)；通過(guò)CCK-8法確定TSA給予的時(shí)間和濃度；通過(guò)western blot檢測(cè)給藥前后SGC-7901和BGC-823細(xì)胞系STAT5A表達(dá)的變化情況；隨后通過(guò)CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)觀察給藥前后細(xì)胞增殖與細(xì)胞周期的變化情況；應(yīng)用端粒酶活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定給藥前后端粒酶活性變化情況；最后應(yīng)用HDACs活性試劑盒檢測(cè)給予TSA前后HDACs活性的變化情況。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，胃癌細(xì)胞系SGC-7901及BGC-823中STAT5A的表達(dá)量高于胃上皮細(xì)胞系GES-1中STAT5A的表達(dá)量，具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；給予300nM TSA后SGC-7901和BGC-823中STAT5A表達(dá)量均降低，且呈時(shí)間依賴(lài)性；其中胃癌細(xì)胞系BGC-823細(xì)胞在給予300nM TSA后STAT5A表達(dá)量降低尤為顯著；給予300nM TSA后，檢測(cè)SGC-7901和BGC-823細(xì)胞的增殖情況，結(jié)果顯示，SGC-7901和BGC-823細(xì)胞的增殖明顯受到抑制；給予300nM TSA孵育24h后，檢測(cè)結(jié)果顯示，SGC-7901和BGC-823細(xì)胞周期阻滯在G1期；此外，兩種細(xì)胞給藥后端粒酶活性均減弱，其中BGC-823細(xì)胞系給予300nM TSA后與未給予TSA的對(duì)照組相比，端粒酶活性降低具有顯著性差異（P＜0.01）；SGC-7901和BGC-823細(xì)胞給藥后HDAC1、2、3、8的活性均有不同程度的下降，并且在BGC-823細(xì)胞中上述四種HDAC活性下降更為明顯。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 1.胃癌細(xì)胞系SGC-7901和BGC-823中STAT5A呈現(xiàn)高表達(dá)；TSA可以抑制胃癌細(xì)胞增殖，使細(xì)胞周期阻滯在G1期； 2．TSA可時(shí)間依賴(lài)性地下調(diào)胃癌細(xì)胞中STAT5A的表達(dá)，并且降低端粒酶的活性； 3．TSA降低胃癌細(xì)胞系中STAT5A的表達(dá)可能通過(guò)影響Ⅰ類(lèi)HDACs活性實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 乙�；� STAT5A 曲古菌素A
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮寫(xiě)詞表11-12
• 前言12-13
• 第1章 文獻(xiàn)綜述13-22
• 1.1 胃癌的研究進(jìn)展13-14
• 1.1.1 胃癌簡(jiǎn)介13
• 1.1.2 胃癌發(fā)生機(jī)制的研究現(xiàn)狀13-14
• 1.1.3 胃癌治療靶標(biāo)研究進(jìn)展14
• 1.2 STAT5A 與腫瘤的關(guān)系14-19
• 1.2.1 STAT5A 簡(jiǎn)介14-16
• 1.2.2 STAT5A 的生物學(xué)效應(yīng)16-17
• 1.2.3 STAT5A 與端粒酶的關(guān)系17-19
• 1.3 組蛋白修飾與腫瘤治療19-22
• 1.3.1 組蛋白修飾19
• 1.3.2 乙�；揎棇�(duì)腫瘤的作用19-20
• 1.3.3 組蛋白去乙酰化酶抑制劑20-22
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法22-34
• 2.1 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞株22
• 2.2 主要儀器設(shè)備22
• 2.3 主要試劑22-24
• 2.4 主要試劑的配制24-27
• 2.5 SGC-7901、BGC-823 及 GES-1 細(xì)胞的培養(yǎng)27-28
• 2.6 CCK-8 試劑盒確定 TSA 的給藥濃度及時(shí)間28
• 2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期28-29
• 2.8 SGC-7901、BGC-823 細(xì)胞中的 HDACs 活性檢測(cè)29-31
• 2.9 Western Blot 檢測(cè) SGC-7901、BGC-823、GES-1 細(xì)胞 STAT5A 的表達(dá)情況31-32
• 2.10 端粒酶活性檢測(cè)32-33
• 2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析33-34
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-46
• 3.1 胃上皮細(xì)胞系及胃癌細(xì)胞系 STAT5A 的差異性表達(dá)34-35
• 3.2 TSA 對(duì)胃癌細(xì)胞系的作用35-43
• 3.2.1 TSA 給藥劑量及給藥時(shí)間的確定35-37
• 3.2.2 TSA 對(duì)胃癌細(xì)胞系 STAT5A 表達(dá)量的影響37-39
• 3.2.3 STAT5A 表達(dá)下調(diào)對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響39-40
• 3.2.4 STAT5A 表達(dá)下調(diào)對(duì)胃癌細(xì)胞周期的影響40-41
• 3.2.5 STAT5A 下調(diào)后對(duì)端粒酶活性的影響41-43
• 3.3 TSA 對(duì)胃癌細(xì)胞中Ⅰ類(lèi) HDACs 活性的影響43-46
• 第4章 討論46-49
• 第5章 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-58
• 致謝58

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 姚洪文;胃癌細(xì)胞系的建立及研究進(jìn)展[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2001年10期

2 李新華;張桂英;羅非君;徐美華;李乾;;胃癌細(xì)胞系幽門(mén)螺桿菌感染對(duì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響[J];世界華人消化雜志;2003年05期

3 沈文靜;戴冬秋;滕s

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