本文關(guān)鍵詞：cRGD通過下調(diào)uPA蛋白及逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成

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【摘要】：研究背景卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一,死亡率居?jì)D科腫瘤首位。眾所周知,由血管提供的充分氧氣及營養(yǎng)物質(zhì)是腫瘤生長,發(fā)展及轉(zhuǎn)移的必需物質(zhì)。Jain等研究團(tuán)隊(duì)提出的“腫瘤饑餓療法”是指通過抑制腫瘤新生血管的生成從而抑制腫瘤的生長。然而,腫瘤血管均由血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成這一認(rèn)知遭到血管生成擬態(tài)的挑戰(zhàn)。血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry, VM)是一種存在于高度惡性腫瘤組織中的供血途徑,如卵巢癌、乳腺癌和肝癌等。這種不尋常的供血管道是由具有可塑性的惡性腫瘤細(xì)胞通過自身變形在沒有內(nèi)皮細(xì)胞的參與下,與細(xì)胞外基質(zhì)共同構(gòu)成的。越來越多的研究表明血管生成擬態(tài)與卵巢癌的分期,轉(zhuǎn)移及患者5年生成率相關(guān)。因此,深入的研究血管生成擬態(tài)形成的分子機(jī)制,并在此機(jī)制上尋找理想的卵巢癌血管生成擬態(tài)抑制劑從而來改善卵巢癌治療結(jié)局是非常重要的。研究證實(shí)參與形成血管生成擬態(tài)的腫瘤細(xì)胞展現(xiàn)出了內(nèi)皮細(xì)胞的特征,這類似于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial to mesenchymal transition, EMT)是一種動態(tài)的生物學(xué)過程,其主要的特征是腫瘤細(xì)胞上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化為間充質(zhì)細(xì)胞表型,同時細(xì)胞形態(tài)發(fā)生相應(yīng)的變化,通過EMT,腫瘤細(xì)胞獲得了較高的遷移能力。更重要的是,文獻(xiàn)已報(bào)道發(fā)生EMT化的腫瘤細(xì)胞更容易形成血管生成擬態(tài)。而且,某些EMT過程中的調(diào)節(jié)因子也已經(jīng)被證實(shí)涉及到VM形成中。但是,EMT化的腫瘤細(xì)胞在形成血管生成擬態(tài)前必須對其細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)行溶解。uPA蛋白是一種多功能的絲氨酸,由卵巢癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞分泌,它可正向調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖,提高細(xì)胞的粘附性。由于高水平的uPA蛋白預(yù)示著腫瘤的不良預(yù)后,美國腫瘤臨床協(xié)會呼吁臨床醫(yī)生將其作為腫瘤預(yù)后的評估因子。uPA蛋白通過溶解細(xì)胞外基質(zhì)及基底膜,允許細(xì)胞穿過屏障,在腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤血管生成中扮演著重要的角色。然而,到目前為止,uPA蛋白是否能通過它對細(xì)胞外基質(zhì)的溶解作用參與血管生成擬態(tài)的形成,進(jìn)而成為一個血管生成擬態(tài)的治療靶點(diǎn)尚不清楚。腫瘤新生血管的內(nèi)皮細(xì)胞上高表達(dá)整合素舛β3。研究表明,外源性的RGD肽能特異性的結(jié)合整合素叫β3,從而抑制由內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成的腫瘤血管。環(huán)狀的RGD肽(cRGD)由于多價態(tài)可以同時和幾個叫β3相結(jié)合,因此較線形RGD多肽有更高的受體結(jié)合特異性,展現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制腫瘤傳統(tǒng)血管的能力。然而,并沒有文獻(xiàn)報(bào)道外源性cRGD肽對于血管生成擬態(tài)的影響。在乳腺癌中,RGD肽可通過與叫β3相結(jié)合下調(diào)uPA蛋白的表達(dá),而且,RGD肽與整合素avβ3結(jié)合后通過加強(qiáng)細(xì)胞與細(xì)胞/細(xì)胞外間質(zhì)的連接抑制細(xì)胞的遷移、侵襲和EMT化。因此,這激發(fā)我們的興趣去探討外源性cRGD肽是否能夠通過下調(diào)uPA的表達(dá)和逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成。為了進(jìn)一步的探究uPA蛋白對于卵巢癌血管生成擬態(tài)形成的作用,我們首先在細(xì)胞水平及卵巢癌組織水平探討uPA蛋白與血管生成擬態(tài)的關(guān)系,并試圖去揭示其潛在的分子機(jī)制,作為治療靶點(diǎn)的潛能性。更重要的是,我們擬從基因水平、蛋白水平及細(xì)胞生物學(xué)特性的角度驗(yàn)證外源性cRGD肽是否可以通過下調(diào)uPA的表達(dá)和逆轉(zhuǎn)EMT抑制血管生成擬態(tài)。第一章uPA對卵巢癌血管生成擬態(tài)形成的影響目的旨在從組織水平及細(xì)胞水平深入探究uPA蛋白對卵巢癌血管生成擬態(tài)形成的作用及其可能的分子機(jī)制,這對豐富完善腫瘤血管生成擬態(tài)理論有重要的意義,同時為臨床上卵巢癌抗血管生成治療提供靶點(diǎn)。方法1.卵巢癌組織水平上探究uPA蛋白與卵巢癌血管生成擬態(tài)的關(guān)系首先對前期試驗(yàn)中收集來自廣州珠江醫(yī)院病理科的90例經(jīng)手術(shù)切除的卵巢癌組織進(jìn)行uPA蛋白免疫組織化學(xué)染色及CD34-PAS雙重染色。統(tǒng)計(jì)分析uPA蛋白表達(dá)、血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu)與臨床數(shù)據(jù)的關(guān)系及uPA蛋白表達(dá)與血管生成擬態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)系。2.體外三維培養(yǎng)比較不同卵巢癌細(xì)胞形成血管生成擬態(tài)的能力150此基質(zhì)膠加入24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,在37℃孵箱中靜置45 min,收集生長處于對數(shù)期的SKOV-3、OVCAR-3、A2780和HUVEC細(xì)胞以3.5×105個/孔的細(xì)胞密度加入到基質(zhì)膠表面放入37℃細(xì)胞孵箱中孵育8 h,倒置顯微鏡觀察VM管腔結(jié)構(gòu)形成情況。3. Western Blot檢測各種卵巢癌細(xì)胞uPA蛋白表達(dá)水平分別提取SKOV-3、OVCAR-3和A2780卵巢癌細(xì)胞的蛋白樣品,用BCA法進(jìn)行蛋白定量。計(jì)算50嵋蛋白的溶液體積即為上樣量,SDS-PAGE電泳,轉(zhuǎn)到PVDF膜上,5% BSA溶液進(jìn)行封閉,孵育uPA一抗4℃過夜,次日洗膜,孵育二抗后進(jìn)行曝光。選用GAPDH作為內(nèi)源性對照。4.細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染及RT-PCR和Western Blot檢測轉(zhuǎn)染后uPA表達(dá)水平待鋪至6孔板中的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞融合至70%-80%,取uPA干擾片段(si-RNA)及其陰性對照組片段(si-NC)各100 pmoL分別與脂質(zhì)體lipofectamin 2000 5μL混合,并按照按lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑盒操作說明書進(jìn)行轉(zhuǎn)染。分別提取被轉(zhuǎn)染48/72 h的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞si-RNA和si-NC組中的RNA和蛋白運(yùn)用RT-PCR和Western Blot檢測uPA RNA和蛋白的表達(dá)情況。5.體外三維培養(yǎng)檢測下調(diào)uPA蛋白表達(dá)對卵巢癌細(xì)胞血管生成擬態(tài)形成能力的影響用已被成功下調(diào)uPA蛋白表達(dá)的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞si-RNA和si-NC組細(xì)胞進(jìn)行體外三維培養(yǎng),比較干擾uPA蛋白表達(dá)前后兩種卵巢癌細(xì)胞形成血管生成擬態(tài)能力的變化。6. Western Blot檢測下調(diào)uPA蛋白表達(dá)對卵巢癌血管生成擬態(tài)相關(guān)基因表達(dá)的影響分別提取已被成功下調(diào)uPA蛋白表達(dá)的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞si-RNA和si-NC組細(xì)胞的蛋白,Western Blot檢測uPA、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、MMP-2和Laminin5y2蛋白的表達(dá)情況。選用GAPDH作為內(nèi)源性對照。結(jié)果1.VM結(jié)構(gòu)、uPA蛋白表達(dá)與臨床資料的關(guān)系免疫組化發(fā)現(xiàn)90例卵巢癌組織標(biāo)本中uPA蛋白表達(dá)水平不同。根據(jù)免疫組化中陽性細(xì)胞率聯(lián)合染色強(qiáng)度的評分法則將卵巢癌組織分成uPA(-/+)、uPA(++)和uPA(+++)三組。將uPA(-)和uPA(+)定義為低表達(dá),將uPA(++)和uPA(+++)定義為高表達(dá)。我們發(fā)現(xiàn)在早期和晚期卵巢癌組織中uPA蛋白高表達(dá)率分別為36%和82.5%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。在低分化、中分化、高分化的卵巢癌中uPA蛋白高表達(dá)率分別為77.3%、41.6%和59.4%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.028)。CD34-PAS雙染結(jié)果發(fā)現(xiàn),某些組織中出現(xiàn)VM結(jié)構(gòu)(表現(xiàn)為PAS陽性,CD34陰性的管腔結(jié)構(gòu),這些管腔結(jié)構(gòu)由腫瘤細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,其內(nèi)偶見紅細(xì)胞)陽性率為40% (36/90)。在早期和晚期卵巢癌組織中VM陽性率分別為26%和57.5%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P=0.003)。在低分化、中分化、高分化的卵巢癌中uPA蛋白高水平表達(dá)率分別為64%、53%和14%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)2.uPA蛋白與VM在卵巢癌組織中的關(guān)系從uPA在VM陽性卵巢癌組織中表達(dá)情況和VM在uPA蛋白不同的組織中陽性率兩方面進(jìn)一步分析卵巢癌組織中uPA蛋白表達(dá)與VM的關(guān)系。我們發(fā)現(xiàn)VM在uPA(-/+)、uPA(++)和uPA(卅)三組中出現(xiàn)的陽性率分別為18.1%、41.7%和57.1%。uPA蛋白在VM陽性組中高表達(dá)：22.2%uPA(-/+)、30.5 %uPA(++)和47.3%uPA(+++),而在VM陰性中僅有20.3%uPA(+++)。3.uPA蛋白與VM在卵巢癌細(xì)胞中的關(guān)系體外三維培養(yǎng)檢測卵巢癌細(xì)胞形成VM的能力,并且用HUVEC細(xì)胞作為陽性參照組。結(jié)果顯示：卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞可自發(fā)首尾相接形成大量的血管腔樣網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即VM現(xiàn)象,這種管腔樣結(jié)構(gòu)與HUVEC細(xì)胞形成管腔結(jié)構(gòu)相似,且SKOV-3形成這種結(jié)構(gòu)的能力強(qiáng)于OVCAR-3 (P0.05),而A2780細(xì)胞則不能形成VM結(jié)構(gòu)。Western Blot結(jié)果表明,各種卵巢癌細(xì)胞中,形成VM能力最強(qiáng)的SKOV-3細(xì)胞的uPA蛋白表達(dá)水平最高,不能形成VM結(jié)構(gòu)的A2780細(xì)胞的表達(dá)水平最低,而OVCAR-3細(xì)胞的表達(dá)水平則居中。4.下調(diào)uPA蛋白對卵巢癌細(xì)胞形成VM的影響用uPA的干擾片段(si-RNA組)和對照組片段(si-NC組)瞬時轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞,RT-PCR and Western blot結(jié)果顯示我們成功下調(diào)它們uPA蛋白表達(dá)水平。體外三維培養(yǎng)結(jié)果顯示在SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞中,si-RNA和si-NC組中卵巢癌細(xì)胞形成VM能力之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(SKOV-3細(xì)胞中P0.001,OVCAR-3細(xì)胞P0.01)。對于這兩株細(xì)胞,下調(diào)uPA蛋白表達(dá)后,其形成VM的能力下降。5.uPA蛋白促進(jìn)VM形成的相關(guān)機(jī)制與si-NC組相比,si-RNA組中卵巢癌SKOV-3中AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR及MMP-2的表達(dá)量明顯減少,而能將細(xì)胞固定在基膜上Laminin5γ2被分解得少；OVCAR-3細(xì)胞中AKT.mTOR的量未見明顯改變,但是它們的活化形式p-AKT與p-mTOR,以及MMP-2的表達(dá)量明顯減少,而能將細(xì)胞固定在基膜上Laminin5γ2被分解得少。結(jié)論1.uPA蛋白表達(dá)/VM陽性率和卵巢癌組織分期、分級相關(guān)：分期越晚/低分化,uPA蛋白表達(dá)水平越高/VM陽性率越高；2.uPA蛋白促進(jìn)了卵巢癌細(xì)胞VM形成；3.uPA蛋白通過AKT/mTOR/MMP-2/Laminin5γ2信號通路促進(jìn)卵巢癌VM的形成,可成為卵巢癌VM治療靶點(diǎn)。第二章cRGD對卵巢癌血管生成擬態(tài)的作用及其機(jī)制第一節(jié)cRGD通過下調(diào)uPA抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成目的研究表明內(nèi)源性RGD下調(diào)乳腺癌中uPA蛋白表達(dá)水平,而我們上一章中顯示uPA蛋白是一個治療卵巢癌VM的有效靶點(diǎn)。本節(jié)研究旨在研究外源性的環(huán)狀RGD(cRGD)是否可下調(diào)卵巢癌中的uPA蛋白,從而抑制卵巢癌VM形成。方法1.MTT實(shí)驗(yàn)篩選cRGD適合的實(shí)驗(yàn)劑量5×103/孔的SKOV-3和OVCAR-3進(jìn)行96孔板鋪板孵育24 h。不同濃度的cRGD藥物及其相應(yīng)的對照組溶液按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)加入SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞中作用48 h。加入20μL MTT試劑(5 mg/mL)繼續(xù)孵育后每孔再加入150 μLDMSO溶液,避光,輕震,利用酶標(biāo)儀(選擇540 nm波長)測定各孔吸光值。每次設(shè)置3個重復(fù)孔,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。2.體外三維培養(yǎng)驗(yàn)證cRGD對卵巢癌細(xì)胞形成VM能力的影響用無血清RPMI-1640將SKOV-3和OVCAR-3制成細(xì)胞懸液,3.5×105個/孔細(xì)胞加入到基質(zhì)膠表面,用PBS溶解cRGD,以40 nM濃度加入每孔(cRGD),對照組(Control)中加入相同體積的PBS溶液,顯微鏡下觀察各細(xì)胞形成VM的能力。3. Western Blot檢測cRGD作用后uPA促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞形成VM信號通路蛋白的變化分別提取cRGD作用48 h后的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞和它們的Control組細(xì)胞的蛋白,Western Blot檢測uPA、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、MMP-2和Laminin5y2蛋白的表達(dá)情況。選用GAPDH作為內(nèi)源性對照。結(jié)果1.40 nM cRGD作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)cRGD的使用劑量MTT結(jié)果顯示：cRGD對于SKOV-3的IC50值為6160 nM, cRGD對于OVCAR-3的IC50值為536 nM。本研究中選用的cRGD濃度(40 nnM)均遠(yuǎn)小于它們的IC50,排除后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果因cRGD對卵巢癌細(xì)胞的毒性所致。2. cRGD對卵巢癌細(xì)胞VM形成的影響體外三維培養(yǎng)結(jié)果顯示：cRGD作用48 h后,與它們各自的Control組相比,卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞形成VM的能力明顯下降,兩種細(xì)胞的cRGD與Control組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.001)3. cRGD對uPA蛋白促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞形成VM信號通路蛋白的影響用Western blot檢驗(yàn)cRGD治療48 h后的SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞株中AKT/mTOR/MMP-2/Laminin5y2信號通路蛋白的變化。與Control組相比,cRGD組中卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞的uPA下調(diào),其下游的AKT、p-AKT、 mTOR、p-mTOR、MMP-2表達(dá)水平明顯降低,而能將細(xì)胞固定在基膜上Laminin5y2被分解得少。結(jié)論1. cRGD通過下調(diào)uPA,從而調(diào)節(jié)AKT/mTOR/MMP-2/Laminin5y2信號通路抑制卵巢癌VM的形成。2.再次驗(yàn)證uPA蛋白促進(jìn)卵巢癌VM形成的信號通路。第二節(jié)cRGD逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成目的上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)是促進(jìn)惡性腫瘤VM形成的重要因素之一。本節(jié)研究旨在研究cRGD是否可通過逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的EMT,從而抑制卵巢癌VM形成。方法1. Transwell檢測cRGD對卵巢癌細(xì)胞遷移能力的影響對數(shù)生長期的卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞,1×104/室細(xì)胞鋪在上室,下室中加入含10%FBS RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液。40 nM cRGD作用10 h后,收小室制片,倒置顯微鏡下隨機(jī)選取不重疊的五個視野拍照并統(tǒng)計(jì)處理數(shù)據(jù)。2. Border檢測cRGD對卵巢癌細(xì)胞侵襲能力的影響將transwel小室鋪基質(zhì)膠,1×104/室SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞鋪在上室,下室中加入含10%FBS RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液。40 nM cRGD作用12h后,收小室制片,倒置顯微鏡下隨機(jī)選取不重疊的五個視野拍照并統(tǒng)計(jì)處理數(shù)據(jù)。3.免疫熒光檢測cRGD對卵巢癌細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白的影響將SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞進(jìn)行爬片,以40 nM cRGD作用于卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞48 h后,孵育一抗、二抗后,用Hochest33342染核,激光共聚焦定性觀察細(xì)胞三種蛋白表達(dá)情況。4. Western Blot檢測cRGD作用或下調(diào)uPA后對卵巢癌細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白的影響cRGD作用卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞48 h后或是成功干擾uPA表達(dá)后,提取它們和各自對照組中蛋白,Western Blot檢測細(xì)胞E-cadherin, N-cadherin和Vimentin表達(dá)。選用GAPDH作為內(nèi)源性對照。5.觀察cRGD及下調(diào)uPA對卵巢癌細(xì)胞形態(tài)的影響cRGD作用卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞48 h后或是成功干擾uPA表達(dá)后,倒置顯微鏡下觀察處理組和對照組中細(xì)胞形態(tài)的變化。結(jié)果1. cRGD對卵巢癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響Transwell及Border實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：和Control組相比,cRGD作用48 h后的卵巢癌細(xì)胞遷移及侵襲能力明顯下降(P值均0.001)。2. cRGD對卵巢癌細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白的影響免疫熒光及Western Blot結(jié)果顯示：和Control組相比,cRGD上調(diào)卵巢癌細(xì)胞E-cadherin表達(dá),下調(diào)卵巢癌細(xì)胞N-cadherin和Vimentin表達(dá)。下調(diào)SKOV-3細(xì)胞uPA后,與si-NC組相比,這三種蛋白無變化；下調(diào)OVCAR-3細(xì)胞uPA后,E-cadherin表達(dá)無變化,N-cadherin表達(dá)減少,而Vimentin表達(dá)增多。3. cRGD對卵巢癌細(xì)胞形態(tài)的影響cRGD作用SKOV-3和OVCAR-3細(xì)胞48 h后,與Control組相比,cRGD使細(xì)胞觸角變少,細(xì)胞變圓,細(xì)胞之間連接變緊密。下調(diào)SKOV-3細(xì)胞uPA后,與si-NC組相比,si-RNA組卵巢癌細(xì)胞形態(tài)無明顯改變。結(jié)論1. cRGD可通過逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌VM形成。2. cRGD逆轉(zhuǎn)EMT的作用并不是由于它下調(diào)卵巢癌細(xì)胞uPA蛋白的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 血管生成擬態(tài) 尿激酶型纖溶酶原激活物 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 外源性環(huán)狀RGD
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要3-12
• ABSTRACT12-25
• 前言25-31
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第一章 uPA對卵巢癌血管生成擬態(tài)形成的影響31-57
• 一、引言31
• 二、實(shí)驗(yàn)材料與方法31-44
• 三、結(jié)果44-51
• 四. 討論51-54
• 五、結(jié)論54
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 第二章 cRGD對卵巢癌血管生成擬態(tài)的作用及其機(jī)制57-83
• 第一節(jié) cRGD通過下調(diào)uPA抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成57-66
• 一、引言57
• 二、實(shí)驗(yàn)材料與方法57-63
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果63-66
• 第二節(jié) cRGD通過逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成66-81
• 一、引言66
• 二、實(shí)驗(yàn)材料與方法66-73
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果73-78
• 四、討論78-80
• 五、結(jié)論80-81
• 參考文獻(xiàn)81-83
• 全文總結(jié)83-84
• 縮略語84-85
• 抗體信息85-86
• 學(xué)位攻讀期間科研成果86-87
• 致謝87-88

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8 張凡;孫保存;趙秀蘭;常永霞;;小鼠黑色素瘤移植瘤中血管生成擬態(tài)的時空變化[J];河北北方學(xué)院學(xué)報(bào);2005年05期

9 孫保存;張?jiān)娢?趙秀蘭;郝希山;;雙向分化惡性腫瘤血管生成擬態(tài)分子機(jī)制初步研究[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2005年09期

10 黃海波;韓振國;辛華;;血管生成擬態(tài)研究進(jìn)展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 孟立祥;莢衛(wèi)東;許戈良;李建生;黃河;高群;馬金良;;肝癌細(xì)胞血管生成擬態(tài)體外研究[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 陳忠平;;膠質(zhì)瘤血管生成擬態(tài)的分子靶點(diǎn)探討[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

3 岳偉英;陳忠平;;星形膠質(zhì)細(xì)胞腫瘤中有腫瘤血管生成擬態(tài)現(xiàn)象嗎?[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

4 陳忠平;;膠質(zhì)瘤中的血管生成擬態(tài)現(xiàn)象和意義[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

5 張?jiān)娢?孫保存;張丹芳;郭華;趙秀蘭;;黑色素瘤細(xì)胞線形程序性壞死與血管生成擬態(tài)之間關(guān)系的形態(tài)學(xué)觀察研究[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

6 陳銀生;陳忠平;;膠質(zhì)瘤干細(xì)胞血管生成擬態(tài)的分子機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

7 孫保存;張?jiān)娢?趙秀蘭;倪春生;劉巖雪;邱志強(qiáng);郝希山;;雙向分化惡性腫瘤血管生成擬態(tài)分子機(jī)制初步研究[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

8 李熳;谷彥軍;張丹芳;趙秀蘭;孫保存;;胃腺癌血管生成擬態(tài)的臨床病理意義及其相關(guān)機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2010年學(xué)術(shù)年會日程及論文匯編[C];2010年

9 孫保存;;腫瘤血管生成擬態(tài):進(jìn)展與挑戰(zhàn)[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議教育集[C];2006年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 劉道安 李運(yùn)紅 趙迎;惡性腫瘤血供方式新發(fā)現(xiàn)——血管生成擬態(tài)[N];健康報(bào);2006年

2 劉道安 李運(yùn)紅 趙迎;雙向分化惡性腫瘤存在血管生成擬態(tài)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

3 記者　馮國梧 通訊員　李運(yùn)紅趙迎;惡性腫瘤血道轉(zhuǎn)移之謎揭開[N];科技日報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐書剛;microRNA-584-3p和microRNA-let-7f調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞低氧誘導(dǎo)血管生成擬態(tài)的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2016年

2 王勇;microRNA-26b-5p在肝癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和血管生成擬態(tài)形成中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

3 王世勇;惡性神經(jīng)上皮腫瘤的血管生成擬態(tài)及其對患者預(yù)后的影響分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

4 王巍;血管生成擬態(tài)在喉癌中的臨床意義分子機(jī)制的初步探討[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

5 杜靜;缺氧在卵巢癌血管生成擬態(tài)形成中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

6 劉文斌;肝細(xì)胞癌血管生成擬態(tài)的臨床意義及分子機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

7 朱芳;PI3K作為抗肺癌血管新生和血管生成擬態(tài)共同靶點(diǎn)的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

8 凌耿強(qiáng);轉(zhuǎn)化生長因子-β基因沉默抑制U251MG細(xì)胞形成血管生成擬態(tài)的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

9 黃敏;mTOR經(jīng)HIF-1α調(diào)控腦膠質(zhì)瘤血管生成擬態(tài)的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

10 秦亮;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對前列腺癌血管生成擬態(tài)的影響及前列腺癌骨轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制的初步研究[D];華中科技大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊立芬;卵巢癌SKOV3中Holoclone細(xì)胞的特性及其形成血管生成擬態(tài)的能力[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 陳琳;低劑量節(jié)拍化療對卵巢癌細(xì)胞SKOV3血管生成擬態(tài)的影響及其機(jī)制的探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李水仙;小分子化合物DMBT對乳腺癌血管生成擬態(tài)的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2016年

4 唐姣;cRGD通過下調(diào)uPA蛋白及逆轉(zhuǎn)EMT抑制卵巢癌血管生成擬態(tài)形成[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

5 劉曉;組蛋白去乙�；�-3與膠質(zhì)瘤血管生成擬態(tài)的相關(guān)性[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊崢;食管鱗癌血管生成擬態(tài)初步研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2010年

7 張凡;小鼠黑色素移植瘤模型中血管生成擬態(tài)形成的時空變化及其分子機(jī)制的初步觀察[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

8 胡曄;大鼠誘發(fā)性肝癌模型中血管生成擬態(tài)現(xiàn)象觀察及其形成機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

9 董娜;肺癌血管生成擬態(tài)的研究及與凋亡關(guān)系的初步探討[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

10 孟康;沖魚軟骨多糖對小鼠黑色素瘤血管生成擬態(tài)的時空變化及相關(guān)因子的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2013年

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本文編號：663893