本文關(guān)鍵詞：水通道蛋白9對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2增殖、凋亡和侵襲遷移的影響

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【摘要】：目的：研究水通道蛋白9 (Aquaporin9,AQP9)對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2增殖、凋亡和侵襲遷移的影響。方法：構(gòu)建靶向AQP9基因的慢病毒過(guò)表達(dá)載體,利用293T包裝細(xì)胞獲得重組慢病毒并轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞并用嘌呤霉素篩選出穩(wěn)定細(xì)胞株,激光共聚焦驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率,qRT-PCR及Western blot檢測(cè)AQP9表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)分組：CC組為無(wú)慢病毒轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞、PWPI組為空載體慢病毒轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞,過(guò)表達(dá)AQP9組為含過(guò)表達(dá)AQP9基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞。利用平板克隆、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)以及流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)AQP9對(duì)HepG2增殖、遷移、侵襲、凋亡以及周期的影響。多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析,兩組間數(shù)據(jù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。結(jié)果：激光共聚焦顯示,HepG2細(xì)胞膜在轉(zhuǎn)染AQP9后高表達(dá)綠色熒光蛋白,qRT-PCR及WB檢測(cè)AQP9的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)較其他兩組均明顯上升,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p均0.01)。平板克隆結(jié)果顯示,CC組、PWPI組和過(guò)表達(dá)AQP9組克隆形成率分別為(23.53±2.10)%、(23.00±2.02)%、(16.93±3.19)%,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=6.46,P=0.0320.05)。流式測(cè)凋亡結(jié)果顯示,CC組、PWPI組和過(guò)表達(dá)AQP9組總凋亡率分別為：(19.70±2.49)%、(24.37±2.38)%、(44.96±3.53)%,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=66.88,P0.01),與PWPI組和CC組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p均0.01)；流式測(cè)周期結(jié)果顯示,CC組、PWPI組和過(guò)表達(dá)AQP9組細(xì)胞停留在S期和G1期的細(xì)胞百分比分別為(34.39±4.33)%和(54.58±±0.89)%；(35.65±1.39)%和(53.08±±2.06)%；(15.25±1.81)%和(66.58±0.99)%,組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別為49.25和82.09,P均0.01)。劃痕愈合實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,過(guò)表達(dá)AQP9組細(xì)胞24h的遷移率為(6.38±±1.70)%,與PWPI組(16.74±1.40)%比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.010.05)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,過(guò)表達(dá)AQP9組24h穿過(guò)細(xì)胞數(shù)為(17±8)個(gè),與PWPI組(95±11)個(gè)和CC組(109士9)個(gè)比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論：AQP9能夠抑制HepG2細(xì)胞遷移和侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡并通過(guò)產(chǎn)生G1/S期阻滯抑制細(xì)胞增殖。
【關(guān)鍵詞】：水通道蛋白9 增殖 凋亡 侵襲 遷移
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 1 材料和方法13-22
• 2 結(jié)果22-24
• 3 討論24-26
• 全文總結(jié)26-27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 附插圖30-33
• 文獻(xiàn)綜述33-41
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 致謝41-42
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文42-43
• 攻讀碩士學(xué)位期間參與申請(qǐng)課題43

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