綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)細(xì)胞相容性評價(jià)及應(yīng)用研究
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【摘要】:目的:評價(jià)改良光芬頓-水熱法制備的綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)(Graphene quantum dots)的細(xì)胞相容性,并探討其在生物成像及腫瘤細(xì)胞物理治療方面的應(yīng)用。材料和方法:不同濃度的GQDs與HeLa細(xì)胞共培養(yǎng)24h后,通過觀察GQDs對HeLa細(xì)胞的增殖、胞膜完整性、氧化應(yīng)激水平以及細(xì)胞凋亡的影響,評價(jià)其細(xì)胞相容性;采用電子光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),TEM觀察細(xì)胞微觀結(jié)構(gòu)的變化及GQDs在細(xì)胞內(nèi)分布;采用熒光顯微鏡觀察GQDs在細(xì)胞內(nèi)的成像,FX-in vivo成像系統(tǒng)觀察GQDs在小鼠體內(nèi)的成像;GQDs與HeLa細(xì)胞共同培養(yǎng)后采用近紅外光照射檢測細(xì)胞增殖能力;將GQDs與HeLa細(xì)胞培養(yǎng)24h后經(jīng)不同劑量的重離子輻照后觀察細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞克隆的變化。結(jié)果:1.隨著GQDs濃度的增加,細(xì)胞存活率降低,GQDs濃度為200ng/mL時(shí)細(xì)胞增殖率仍高于80%,總LDH含量接近80%,細(xì)胞內(nèi)ROS水平為對照組的2.2倍,細(xì)胞凋亡結(jié)果中活細(xì)胞仍高達(dá)85%,細(xì)胞毒性呈現(xiàn)劑量依賴性;電子光學(xué)顯微鏡顯示:與對照組相比,GQDs組細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目沒有明顯區(qū)別,TEM顯示:GQDs通過胞吞作用進(jìn)入了細(xì)胞,并未破壞胞膜的完整性,且主要集中于線粒體及溶酶體。2.細(xì)胞內(nèi)成像結(jié)果顯示GQDs呈亮綠色熒光,且隨著時(shí)間的推移,一個(gè)月后顏色介于淡黃色與草綠色之間,6個(gè)月后熒光仍存在;GQDs在小鼠體內(nèi)呈現(xiàn)亮綠色熒光。3.近紅外光照射后顯示細(xì)胞增值率明顯降低,各濃度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,半數(shù)致死量為27.791μg/mL;重離子輻照下GQDs對HeLa的影響結(jié)果顯示:加入GQDs后對于細(xì)胞的增殖、克隆及凋亡結(jié)果與單獨(dú)細(xì)胞照射組相比并無較大差別。結(jié)論:制備的綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)具有良好的細(xì)胞相容性,能以胞吞方式成功進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),主要集中于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),在細(xì)胞及小鼠體內(nèi)呈現(xiàn)亮綠色熒光,且熒光強(qiáng)度持續(xù)時(shí)間長,在生物體內(nèi)示蹤成像及物理治療方面有極大的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】:綠色熒光 石墨烯量子點(diǎn) 細(xì)胞相容性 應(yīng)用
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R730.5;TB383.1
【目錄】:
- 中文摘要3-4
- Abstract4-8
- 第一章 緒論8-16
- 1.1 石墨烯量子點(diǎn)概述8-14
- 1.1.1 石墨烯量子點(diǎn)的性質(zhì)8-9
- 1.1.2 石墨烯量子點(diǎn)的應(yīng)用9-12
- 1.1.3 石墨烯量子點(diǎn)的細(xì)胞毒性12-14
- 1.1.4 輻照下石墨烯量子點(diǎn)的特性14
- 1.2 選題意義和研究內(nèi)容14-16
- 第二章 綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)的細(xì)胞相容性檢測16-26
- 2.1 引言16
- 2.2 材料16-18
- 2.3 實(shí)驗(yàn)方法18-20
- 2.4 結(jié)果與討論20-25
- 2.5 小結(jié)25-26
- 第三章 綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)的成像應(yīng)用26-30
- 3.1 引言26
- 3.2 材料與方法26-27
- 3.3 結(jié)果與討論27-29
- 3.4 小結(jié)29-30
- 第四章 綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)的光熱治療應(yīng)用30-32
- 4.1 引言30
- 4.2 材料與方法30
- 4.3 結(jié)果與討論30-31
- 4.4 小結(jié)31-32
- 第五章 綠色熒光石墨烯量子點(diǎn)的輻射增敏應(yīng)用32-36
- 5.1 引言32
- 5.2 材料與方法32-33
- 5.3 結(jié)果與討論33-35
- 5.4 小結(jié)35-36
- 第六章 全文總結(jié)36-37
- 參考文獻(xiàn)37-42
- 在學(xué)期間的研究成果42-43
- 致謝43
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