本文關(guān)鍵詞：長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為胃癌早期診斷標(biāo)志物的可行性研究

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【摘要】：目的:先通過(guò)在胃癌細(xì)胞株、胃癌組織中測(cè)定LINC00152的表達(dá)量證實(shí)它為胃癌相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA);再通過(guò)測(cè)定早期胃癌患者和進(jìn)展期胃癌患者血漿中LINC00152的水平,探索其作為胃癌早期診斷標(biāo)志物的可行性;最后通過(guò)測(cè)定血漿外泌體中LINC00152的水平,探索lncRNA在血漿中穩(wěn)定存在的主要機(jī)制。方法:(1)運(yùn)用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction,qRT-PCR)測(cè)定4株人類(lèi)胃癌細(xì)胞株、1株正常人類(lèi)胃黏膜上皮細(xì)胞株、成對(duì)胃癌組織及癌旁組織中LINC00152的表達(dá)量。(2)運(yùn)用qRT-PCR測(cè)定胃癌患者術(shù)前、術(shù)后血漿中LINC00152的水平和胃黏膜異性增生患者血漿中LINC00152的水平,并與健康體檢者比較;最后用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線(xiàn)評(píng)估血漿LINC00152對(duì)胃癌診斷的靈敏度與特異度。(3)在等量血漿中提取外泌體,測(cè)定血漿及外泌體中LINC00152水平,并用電鏡確定外泌體。結(jié)果:(1)LINC00152在胃癌細(xì)胞株BGC-823、MGC-803和SGC-7901中表達(dá)升高。(2)LINC00152在胃癌組織中表達(dá)升高。(3)胃癌患者血漿中LINC00152水平明顯高于健康體檢者。(4)早期胃癌患者血漿中LINC00152水平也明顯高于健康體檢者。(5)胃黏膜異性增生患者血漿LINC00152水平與健康體檢者相比無(wú)明顯差異。(6)胃癌患者術(shù)后血漿LINC00152水平明顯不同于術(shù)前。(7)血漿LINC00152作為腫瘤標(biāo)志物的靈敏度和特異度分別為48.1%和85.2%。(8)外泌體對(duì)血漿lncRNA有保護(hù)作用。結(jié)論:LINC00152作為胃癌相關(guān)lncRNA之一有可能成為一種新型胃癌標(biāo)志物應(yīng)用于胃癌的早期診斷。LncRNA能在血漿中穩(wěn)定存在的可能機(jī)制是包裹于外泌體中,這一特性有利于臨床分析lncRNA型腫瘤標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：長(zhǎng)鏈非編碼RNA 胃癌 LINC00152 腫瘤標(biāo)志物 外泌體
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 1 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線(xiàn)11-13
• 1.1 研究?jī)?nèi)容11-12
• 1.1.1 證實(shí)LINC00152為胃癌相關(guān)lncRNA11
• 1.1.2 證明血漿中存在LINC0015211
• 1.1.3 分析胃癌患者血漿中LINC00152的水平變化11
• 1.1.4 分析胃癌前病變患者的血漿LINC00152的水平11
• 1.1.5 探索血漿中l(wèi)ncRNA穩(wěn)定存在的機(jī)制11-12
• 1.2 技術(shù)路線(xiàn)12-13
• 2 方法和材料13-22
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備13
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑13-14
• 2.1.3 主要試劑配制14-15
• 2.1.4 臨床標(biāo)本15
• 2.1.5 細(xì)胞株15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法15-22
• 2.2.1 標(biāo)本取材與處理15
• 2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)15-17
• 2.2.3 血漿外泌體提取17
• 2.2.4 總RNA抽提17-18
• 2.2.5 總RNA的定量與完整性檢測(cè)18-19
• 2.2.6 實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄PCR19-20
• 2.2.7 克隆測(cè)序20-21
• 2.2.8 電鏡觀(guān)察外泌體21
• 2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21-22
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-32
• 3.1 RNA的完整性22
• 3.2 證實(shí)LINC00152為胃癌相關(guān)lncRNA22-24
• 3.3 血漿lncRNA存在性的檢測(cè)24-25
• 3.4 胃癌患者的血漿LINC00152水平25-27
• 3.5 血漿LINC00152水平與胃癌患者臨床病理因素的關(guān)系27-28
• 3.6 ROC曲線(xiàn)分析血漿LINC00152對(duì)胃癌診斷的價(jià)值28
• 3.7 胃癌前病變患者的血漿LINC00152水平28-29
• 3.8 胃癌患者術(shù)后血漿LINC00152的水平變化29-30
• 3.9 血漿LINC00152存在于外泌體中30-32
• 4 討論32-35
• 5 總結(jié)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 附錄A 縮略詞40-41
• 附錄B 綜述41-54
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 在學(xué)研究成果54-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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本文編號(hào)：653304