本文關(guān)鍵詞：FOXN1，一個新的胃腸腫瘤抑癌基因

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【摘要】：胃腸道腫瘤是危害人類健康最常見的惡性腫瘤,據(jù)WHO統(tǒng)計顯示我國胃腸腫瘤的發(fā)病率、死亡率一直位于惡性腫瘤前五位,且皆有繼續(xù)升高的趨勢。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個多基因參與、多階段、多步驟的復雜的生物學過程,其中基因的改變：例如原癌基因的激活及抑癌基因的沉默則被認為是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要機制。目的：我們發(fā)現(xiàn)了Forkhead Box超家族中的FOXN1可能是一個新的腫瘤抑癌基因,該基因在胃腸正常組織中高表達,而在胃腸道腫瘤組織及多數(shù)腫瘤細胞株中低表達,因此我們希望通過相關(guān)實驗進一步驗證該基因的功能并闡明其在胃腸道腫瘤發(fā)生發(fā)展中起作用的可能機制。方法：通過半定量RT-PCR和免疫組化檢測胃腸正常組織和腫瘤組織中FOXN1的表達水平；通過體外脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,獲得穩(wěn)定表達FOXN1的胃癌和大腸癌細胞株,觀察體外FOXN1對細胞表型的影響,包括細胞的增殖能力、遷移能力、細胞凋亡及細胞自噬等；通過建立裸鼠皮下種植模型進一步觀察體內(nèi)FOXN1對腫瘤細胞生長的影響；通過Western Blot檢測相關(guān)通路蛋白的表達,研究FOXN1可能的調(diào)控機制；并通過實時定量QPCR驗證胃腸癌不同細胞株中microRNA的表達,找出FOXN1可能的上游表達調(diào)控機制。結(jié)果：FOXN1在正常胃腸組織中高表達,而在大多數(shù)胃腸腫瘤組織和腫瘤細胞株中表達降低或沉默。FOXN1蛋白的表達與結(jié)直腸癌的低分期(P=0.003)、較少的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.003)、較少的遠處轉(zhuǎn)移(P=0.014)及總生存期(P=0.011)顯著相關(guān)；與胃癌的低浸潤(P=0.01)、低分期(P=0.042)及總生存期(P=0.044)顯著相關(guān)。細胞株轉(zhuǎn)染FOXN1后,通過體內(nèi)外實驗發(fā)現(xiàn)FOXN1能抑制腫瘤細胞的生長、遷移、促進腫瘤細胞的凋亡、調(diào)節(jié)腫瘤細胞的自噬狀態(tài)。Western Blot和流式細胞術(shù)結(jié)果提示FOXN1通過PI3K/AKT/mTOR通路調(diào)節(jié)腫瘤細胞自噬,并與細胞凋亡協(xié)同促進腫瘤細胞死亡。另外初步探索發(fā)現(xiàn)FOXN1可能是hsa-miR-192-5p的靶基因,但還有待進一步驗證。結(jié)論：FOXN1在胃腸道腫瘤中表達沉默或降低,過表達FOXN1具有明顯的抗細胞增殖、遷移能力,并能促進腫瘤細胞的凋亡,除此,FOXN1還可通過P13K通路調(diào)節(jié)腫瘤細胞的自噬狀態(tài)。這提示FOXN1為一個新的胃腸腫瘤抑癌基因,有希望作為一種潛在的標記物用于腫瘤的早期診斷和風險評估。
【關(guān)鍵詞】：FOXN1 腫瘤抑癌基因 凋亡 自噬 microRNA
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735
【目錄】：

• 致謝5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 縮略語及中英文對照10-13
• 前言13-16
• 第一部分 FOXN1表達水平與胃腸道腫瘤患者臨床病理特征的相關(guān)性研究16-35
• 引言16
• 1.1 材料與方法16-27
• 1.2 結(jié)果27-34
• 1.3 討論34-35
• 第二部分 FOXN1表達對胃腸腫瘤細胞功能的影響35-71
• 引言35
• 2.1 材料與方法35-52
• 2.2 結(jié)果52-69
• 2.3 討論69-71
• 第三部分 大腸癌裸鼠皮下種植瘤模型71-74
• 引言71
• 3.1 材料與方法71-72
• 3.2 結(jié)果72-73
• 3.3 討論73-74
• 第四部分 FOXN1的相關(guān)分子機制及表達調(diào)控研究74-85
• 引言74-75
• 4.1 材料與方法75-78
• 4.2 結(jié)果78-84
• 4.3 討論84-85
• 結(jié)論85-86
• 參考文獻86-87
• 綜述 結(jié)直腸癌表觀遺傳學標志物的研究進展87-111
• 參考文獻101-111
• 作者簡歷及在學習期間所取得的科研成果111

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：640698