本文關(guān)鍵詞：FOXN1，一個(gè)新的胃腸腫瘤抑癌基因

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【摘要】：胃腸道腫瘤是危害人類健康最常見的惡性腫瘤,據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)顯示我國胃腸腫瘤的發(fā)病率、死亡率一直位于惡性腫瘤前五位,且皆有繼續(xù)升高的趨勢(shì)。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多基因參與、多階段、多步驟的復(fù)雜的生物學(xué)過程,其中基因的改變：例如原癌基因的激活及抑癌基因的沉默則被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制。目的：我們發(fā)現(xiàn)了Forkhead Box超家族中的FOXN1可能是一個(gè)新的腫瘤抑癌基因,該基因在胃腸正常組織中高表達(dá),而在胃腸道腫瘤組織及多數(shù)腫瘤細(xì)胞株中低表達(dá),因此我們希望通過相關(guān)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證該基因的功能并闡明其在胃腸道腫瘤發(fā)生發(fā)展中起作用的可能機(jī)制。方法：通過半定量RT-PCR和免疫組化檢測(cè)胃腸正常組織和腫瘤組織中FOXN1的表達(dá)水平；通過體外脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,獲得穩(wěn)定表達(dá)FOXN1的胃癌和大腸癌細(xì)胞株,觀察體外FOXN1對(duì)細(xì)胞表型的影響,包括細(xì)胞的增殖能力、遷移能力、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞自噬等；通過建立裸鼠皮下種植模型進(jìn)一步觀察體內(nèi)FOXN1對(duì)腫瘤細(xì)胞生長的影響；通過Western Blot檢測(cè)相關(guān)通路蛋白的表達(dá),研究FOXN1可能的調(diào)控機(jī)制；并通過實(shí)時(shí)定量QPCR驗(yàn)證胃腸癌不同細(xì)胞株中microRNA的表達(dá),找出FOXN1可能的上游表達(dá)調(diào)控機(jī)制。結(jié)果：FOXN1在正常胃腸組織中高表達(dá),而在大多數(shù)胃腸腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞株中表達(dá)降低或沉默。FOXN1蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌的低分期(P=0.003)、較少的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.003)、較少的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.014)及總生存期(P=0.011)顯著相關(guān)；與胃癌的低浸潤(P=0.01)、低分期(P=0.042)及總生存期(P=0.044)顯著相關(guān)。細(xì)胞株轉(zhuǎn)染FOXN1后,通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)FOXN1能抑制腫瘤細(xì)胞的生長、遷移、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡、調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的自噬狀態(tài)。Western Blot和流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果提示FOXN1通過PI3K/AKT/mTOR通路調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞自噬,并與細(xì)胞凋亡協(xié)同促進(jìn)腫瘤細(xì)胞死亡。另外初步探索發(fā)現(xiàn)FOXN1可能是hsa-miR-192-5p的靶基因,但還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。結(jié)論：FOXN1在胃腸道腫瘤中表達(dá)沉默或降低,過表達(dá)FOXN1具有明顯的抗細(xì)胞增殖、遷移能力,并能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡,除此,FOXN1還可通過P13K通路調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的自噬狀態(tài)。這提示FOXN1為一個(gè)新的胃腸腫瘤抑癌基因,有希望作為一種潛在的標(biāo)記物用于腫瘤的早期診斷和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。
【關(guān)鍵詞】：FOXN1 腫瘤抑癌基因 凋亡 自噬 microRNA
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735
【目錄】：

• 致謝5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 縮略語及中英文對(duì)照10-13
• 前言13-16
• 第一部分 FOXN1表達(dá)水平與胃腸道腫瘤患者臨床病理特征的相關(guān)性研究16-35
• 引言16
• 1.1 材料與方法16-27
• 1.2 結(jié)果27-34
• 1.3 討論34-35
• 第二部分 FOXN1表達(dá)對(duì)胃腸腫瘤細(xì)胞功能的影響35-71
• 引言35
• 2.1 材料與方法35-52
• 2.2 結(jié)果52-69
• 2.3 討論69-71
• 第三部分 大腸癌裸鼠皮下種植瘤模型71-74
• 引言71
• 3.1 材料與方法71-72
• 3.2 結(jié)果72-73
• 3.3 討論73-74
• 第四部分 FOXN1的相關(guān)分子機(jī)制及表達(dá)調(diào)控研究74-85
• 引言74-75
• 4.1 材料與方法75-78
• 4.2 結(jié)果78-84
• 4.3 討論84-85
• 結(jié)論85-86
• 參考文獻(xiàn)86-87
• 綜述 結(jié)直腸癌表觀遺傳學(xué)標(biāo)志物的研究進(jìn)展87-111
• 參考文獻(xiàn)101-111
• 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)習(xí)期間所取得的科研成果111

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 Xi Wang;Ye-Ye Kuang;Xiao-Tong Hu;;Advances in epigenetic biomarker research in colorectal cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2014年15期

2 ;Hypermethylated SFRP2 gene in fecal DNA is a high potential biomarker for colorectal cancer noninvasive screening[J];World Journal of Gastroenterology;2008年04期

3 Mohammad Reza Abbaszadegan;Alireza Tavasoli;Arash Velayati;Hamid Reza Sima;Hassan Vosooghinia;Mehdi Farzadnia;Hamid Asadzedeh;Mehran Gholamin;Ezzat Dadkhah;Azadeh Aarabi;;Stool-based DNA testing,a new noninvasive method for colorectal cancer screening,the first report from Iran[J];World Journal of Gastroenterology;2007年10期

4 ;Detection of aberrant methylation in fecal DNA as a molecular screening tool for colorectal cancer and precancerous lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2007年06期

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本文編號(hào)：640698