發(fā)布時(shí)間：2017-08-07 20:05

  本文關(guān)鍵詞：熒光裸小鼠脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞培養(yǎng)及其生物學(xué)特征研究

  更多相關(guān)文章： 脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 綠色熒光裸小鼠 體外培養(yǎng)

【摘要】：目的:脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞除了分泌腦脊髓液,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中其它作用知之甚少,對(duì)綠色熒光裸小鼠脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),旨在開(kāi)發(fā)出-種有自然熒光示蹤特征的工具細(xì)胞,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行研究,為進(jìn)一步研究提供便利。方法:解剖顯微鏡下提取裸小鼠脈絡(luò)叢組織,機(jī)械分離成細(xì)胞團(tuán),在盛有20%胎牛血清DMEM(F12)培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),3天后第1次換液,之后每2天半量換液,1周后每3天換液1次,細(xì)胞貼壁后用CCK-8及Ki-67測(cè)增殖活性,倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度,TTR、S100,GFAP,alpha-SMA和Nestin免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞類型進(jìn)行鑒定。結(jié)果:培養(yǎng)的脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光(EGFP),發(fā)出明亮的綠色熒光,在形態(tài)上呈多邊形,伸展寬廣,胞體大,幾乎每個(gè)細(xì)胞都高表達(dá)脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞特異標(biāo)志TTR,但不表達(dá)GFAP,alpha-SMA和Nestin,并且具有較強(qiáng)的增殖活性,在體外可連續(xù)傳代7代。結(jié)論:本方法可成功培養(yǎng)表達(dá)TTR的綠色熒光裸小鼠脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞,穩(wěn)定表達(dá)EGFP,有望作為具有自然示蹤特征的工具細(xì)胞用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)之中。
【關(guān)鍵詞】：脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 綠色熒光裸小鼠 體外培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 引言7-9
• 材料與方法9-13
• 一、材料9
• 二、實(shí)驗(yàn)方法9-13
• 結(jié)果13-18
• 一、培養(yǎng)細(xì)胞的基本特征：13-14
• 二、培養(yǎng)細(xì)胞體外增殖速度：14-16
• 三、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞共表達(dá)TTR和EGFP界定的脈絡(luò)叢細(xì)胞純度16-18
• 討論18-21
• 結(jié)論21-22
• 參考文獻(xiàn)22-26
• 綜述26-43
• 參考文獻(xiàn)34-43
• 中英文縮略詞表43-44
• 攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文44-45
• 致謝45-47

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