反義CD147分子對人膽管癌細胞株侵襲性影響的實驗研究
本文關(guān)鍵詞:反義CD147分子對人膽管癌細胞株侵襲性影響的實驗研究
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【摘要】:目的:探討反義CD147分子對人膽管癌細胞株QBC939侵襲性的影響。材料和方法:構(gòu)建含反義CD147分子片段的重組真核表達質(zhì)粒。將人膽管癌細胞株QBC939分為三組:1.反義CD147組:運用重組真核表達質(zhì)粒asCD147-pcDNA3.1(-)轉(zhuǎn)染QBC939細胞;2.空質(zhì)粒組:運用pcDNA3.1(-)空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染QBC939細胞;3.對照組:運用DMEM常規(guī)處理細胞。采用MTT法檢測各組中QBC939細胞的生長情況,采用RT-PCR和Western-Blotting法分別對三組QBC939細胞中的CD147mRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-2mRNA的表達水平及其對應(yīng)蛋白的表達水平進行檢驗。結(jié)果:構(gòu)建了攜帶反義CD147分子片段的重組真核表達質(zhì)粒,MTT法檢測顯示:三組QBC939細胞的生長曲線及對數(shù)生長期情況兩兩相比無顯著差異(P0.05)。RT-PCR法檢測顯示:反義CD147組QBC939細胞中CD147 mRNA的表達與空質(zhì)粒組及對照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞中MMP-2mRNA的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞中MMP-9mRNA的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞中TIMP-2mRNA的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P0.05)。 Western-blotting檢測發(fā)現(xiàn):反義CD147組QBC939細胞中CD147蛋白的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞中MMP-2蛋白的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對照組相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞株中MM-9蛋白的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P0.05);反義CD147組QBC939細胞株中TIMP-2蛋白的表達與空質(zhì)粒組和對照組兩兩相比無顯著差異(P0.05)。結(jié)論:1.反義CD147對膽管癌細胞株QBC939的生長無影響。2.反義CD147對膽管癌細胞株QBC939中MMP-9mRNA及TIMP-2mRNA和其對應(yīng)蛋白的表達無影響。3.反義CD147降低膽管癌細胞株QBC939中CD147mRNA及MMP-2mRNA和其對應(yīng)蛋白的表達,可能降低膽管癌細胞株的侵襲性。
【關(guān)鍵詞】:反義CD147 基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2 人膽管癌細胞株QBC939
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.8
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 縮略語表10-11
- 前言11-13
- 實驗方案流程圖13-15
- 第1章 攜帶人反義CD147基因片段質(zhì)粒載體的構(gòu)建及鑒定15-27
- 1.1 材料與方法15-22
- 1.2 結(jié)果22-24
- 1.3 討論24-27
- 第2章 膽管癌細胞株QBC939中CD147、MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表達變化27-47
- 2.1 材料與方法27-36
- 2.2 結(jié)果36-43
- 2.3 討論43-47
- 結(jié)論47-49
- 參考文獻49-53
- 綜述53-63
- 參考文獻59-63
- 攻讀學(xué)位期間的科研成果63-65
- 致謝65-66
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,本文編號:622710
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