本文關(guān)鍵詞：反義CD147分子對(duì)人膽管癌細(xì)胞株侵襲性影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的：探討反義CD147分子對(duì)人膽管癌細(xì)胞株QBC939侵襲性的影響。材料和方法：構(gòu)建含反義CD147分子片段的重組真核表達(dá)質(zhì)粒。將人膽管癌細(xì)胞株QBC939分為三組：1.反義CD147組：運(yùn)用重組真核表達(dá)質(zhì)粒asCD147-pcDNA3.1(-)轉(zhuǎn)染QBC939細(xì)胞;2.空質(zhì)粒組：運(yùn)用pcDNA3.1(-)空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染QBC939細(xì)胞；3.對(duì)照組：運(yùn)用DMEM常規(guī)處理細(xì)胞。采用MTT法檢測(cè)各組中QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)情況,采用RT-PCR和Western-Blotting法分別對(duì)三組QBC939細(xì)胞中的CD147mRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-2mRNA的表達(dá)水平及其對(duì)應(yīng)蛋白的表達(dá)水平進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果：構(gòu)建了攜帶反義CD147分子片段的重組真核表達(dá)質(zhì)粒,MTT法檢測(cè)顯示：三組QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線及對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期情況兩兩相比無(wú)顯著差異(P0.05)。RT-PCR法檢測(cè)顯示：反義CD147組QBC939細(xì)胞中CD147 mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組及對(duì)照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-2mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-9mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞中TIMP-2mRNA的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比無(wú)顯著差異(P0.05)。 Western-blotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：反義CD147組QBC939細(xì)胞中CD147蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞中MMP-2蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比明顯降低(P0.05),空質(zhì)粒組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞株中MM-9蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比無(wú)顯著差異(P0.05)；反義CD147組QBC939細(xì)胞株中TIMP-2蛋白的表達(dá)與空質(zhì)粒組和對(duì)照組兩兩相比無(wú)顯著差異(P0.05)。結(jié)論：1.反義CD147對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC939的生長(zhǎng)無(wú)影響。2.反義CD147對(duì)膽管癌細(xì)胞株QBC939中MMP-9mRNA及TIMP-2mRNA和其對(duì)應(yīng)蛋白的表達(dá)無(wú)影響。3.反義CD147降低膽管癌細(xì)胞株QBC939中CD147mRNA及MMP-2mRNA和其對(duì)應(yīng)蛋白的表達(dá),可能降低膽管癌細(xì)胞株的侵襲性。
【關(guān)鍵詞】：反義CD147 基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2 人膽管癌細(xì)胞株QBC939
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.8
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)表10-11
• 前言11-13
• 實(shí)驗(yàn)方案流程圖13-15
• 第1章 攜帶人反義CD147基因片段質(zhì)粒載體的構(gòu)建及鑒定15-27
• 1.1 材料與方法15-22
• 1.2 結(jié)果22-24
• 1.3 討論24-27
• 第2章 膽管癌細(xì)胞株QBC939中CD147、MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表達(dá)變化27-47
• 2.1 材料與方法27-36
• 2.2 結(jié)果36-43
• 2.3 討論43-47
• 結(jié)論47-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 綜述53-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果63-65
• 致謝65-66

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本文編號(hào)：622710