本文關(guān)鍵詞：人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植模型的初步建立

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【摘要】：研究目的：將手術(shù)切除的新鮮人肝癌組織凍存復(fù)蘇后移植于免疫缺陷裸鼠皮下以建立人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植模型并初步評(píng)估其應(yīng)用價(jià)值。材料與方法：取5例原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者手術(shù)切除的新鮮肝癌組織,分別標(biāo)記為HCC01, HCC02, HCC03, HCC04, HCC05腫塊離體30min內(nèi)完成家屬標(biāo)本過(guò)目和病理科取材后,各例肝癌組織用Hanks平衡液沖洗后按照不同凍存時(shí)間分別隨機(jī)分為A組(7d),B組(30d),C組(90d),D組(180d)四組。放入凍存管中標(biāo)記凍存時(shí)間,液氮中保存?zhèn)溆糜诟伟﹥龃鎻?fù)蘇皮下移植模型的建立。按照各例肝癌組織凍存時(shí)間分組將凍存的人肝癌組織復(fù)蘇后移植于裸鼠皮下以建立人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植模型。5例原代人肝癌組織和各組皮下移植瘤常規(guī)浸泡于福爾馬林、中性甲醛溶液中固定,進(jìn)行石蠟包埋切片、HE染色用于病理學(xué)形態(tài)觀察,免疫組化測(cè)定肝細(xì)胞抗原(Hep Par 1)、甲胎蛋白(a-fetoprotein,AFP)、CD34的表達(dá)。觀察記錄A組(7d),B組(30d),C組(90d),D組(180d)復(fù)蘇后裸鼠皮下移植的成瘤率、生長(zhǎng)速度、瘤體體積,通過(guò)對(duì)比各組皮下移植瘤的大體觀形態(tài)、鏡下病理組織特點(diǎn)、免疫組化Hep Par 1、AFP、CD34的表達(dá),以及對(duì)比同種肝癌組織各組皮下移植瘤與原代肝癌的微血管密度(microvascular decompression,MVD)計(jì)數(shù)對(duì)人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植瘤模型進(jìn)行初步的評(píng)價(jià)。結(jié)果：5例手術(shù)切除的原發(fā)性肝癌組織,術(shù)后經(jīng)病理確診為原發(fā)性肝細(xì)胞癌。各例肝癌的A組(7d),B組(30d),C組(90d),D組(180d)凍存的肝癌組織經(jīng)復(fù)蘇后共移植至60只雄性裸鼠皮下,其中51只可見(jiàn)肉眼皮下成瘤,總成瘤率達(dá)85.0%。4組瘤體生長(zhǎng)速度基本相同(P=0.9540.05),最終成瘤體積A組(867.24±29.81),B組(889.30±13.88),C組(862.10±29.41),D組(856.30±25.25)均無(wú)明顯差異,但D組(180d)較A組(7d)裸鼠皮下瘤體的生長(zhǎng)潛伏期長(zhǎng)。人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植瘤體在裸鼠體內(nèi)可以保持穩(wěn)定生長(zhǎng),未出現(xiàn)成瘤后自行消退。4組肝癌凍存復(fù)蘇裸鼠皮下移植瘤HE染色均示腫瘤呈癌巢狀分布、核質(zhì)比例失調(diào),細(xì)胞核明顯異形改變,免疫組化染色Hep Par1、AFP、CD34呈陽(yáng)性,微血管密度較原代肝癌組織無(wú)差異。各組移植瘤鏡下病理組織形態(tài)、免疫組化結(jié)果均能與人肝癌組織生物學(xué)特性保持一致。結(jié)論：成功建立了人源性肝癌組織凍存復(fù)蘇裸鼠皮下移植模型,使用低溫凍存技術(shù)保存的人肝癌組織,經(jīng)復(fù)蘇后能夠成功建立人肝癌裸鼠皮下荷瘤模型。不同的凍存時(shí)間對(duì)皮下移植瘤生物學(xué)特性無(wú)明顯影響,提示了肝癌組織低溫凍存的可行性和人肝癌組織凍存復(fù)蘇皮下移植模型的初步建立,也為臨床肝癌組織保存、肝癌組織標(biāo)本庫(kù)的建立提供了應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 異種移植 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 本文主要英漢縮略名詞對(duì)照表11-12
• 前言12-15
• 實(shí)驗(yàn)方案流程圖15-16
• 1. 材料和方法16-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 1.3 肝癌組織的凍存17-18
• 1.4 凍存肝癌組織復(fù)蘇18
• 1.5 人源性肝癌凍存復(fù)蘇皮下移植模型的建立18-20
• 1.6 HE染色20
• 1.7 Hep Par 1、AFP、CD34蛋白水平的表達(dá)20-21
• 1.8 結(jié)果的判定21
• 1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21-22
• 2. 結(jié)果22-29
• 2.1 一般情況及大體觀察22
• 2.2 裸鼠皮下成瘤率22
• 2.3 皮下移植瘤生長(zhǎng)情況22-24
• 2.4 裸鼠肝癌皮下移植瘤大體觀察24
• 2.5 HE染色病理結(jié)果24-25
• 2.6 Hep Par 1、AFP、CD34的表達(dá)及血管密度MVD的測(cè)定25-29
• 3. 討論29-33
• 4. 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述38-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果46-47
• 致謝47

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1 吳孟超;;肝癌外科治療的近期進(jìn)展[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2006年02期

2 張志敏;;肝癌會(huì)遺傳嗎?[J];肝博士;2006年03期

3 徐連根;周晶;雷偉;沈志祥;;瘦素及其受體在肝癌組織中的表達(dá)及意義[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2006年05期

4 魏麗珍;李勝棉;張楠;溫登瑰;周燁;王士杰;;688例肝癌患者發(fā)病特點(diǎn)及診療狀況分析[J];肝臟;2010年02期

5 ;我國(guó)科研人員發(fā)現(xiàn)促進(jìn)肝癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因[J];臨床薈萃;2010年10期

6 吳生;;盤(pán)點(diǎn)誘發(fā)肝癌的7大元兇[J];肝博士;2012年01期

7 鄧慶華;一家四例肝癌報(bào)道[J];中國(guó)廠礦醫(yī)學(xué);1995年06期

8 王定珠;;觥籌交錯(cuò) 過(guò)度疲勞 肝癌乘機(jī)而入[J];健康博覽;2005年11期

9 笑山,吳蓉蓉;喝咖啡可以減少肝癌發(fā)生率[J];健康之路;2005年04期

10 ;遠(yuǎn)離肝癌 預(yù)防在先[J];農(nóng)民文摘;2006年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 俞順章;穆麗娜;;飲水中藻類毒素與肝癌關(guān)系和控制的研究(摘要)[A];全國(guó)腫瘤流行病學(xué)和腫瘤病因?qū)W學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

2 楊秉輝;;肝癌預(yù)防的新話題-非酒精性脂肪性肝病與肝癌[A];第十二屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 丁光偉;楊玉秀;徐秋霞;徐存拴;;肝癌多基因表達(dá)異常初步研究[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

4 吳孟超;;肝癌外科治療的近期進(jìn)展[A];第三屆全國(guó)重型肝病及人工肝血液凈化學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2007年

5 劉耕陶;孫華北;方亞南;;肝癌發(fā)生的化學(xué)預(yù)防[A];第十次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2006年

6 阮秀花;田蔥;張效本;張喜梅;;肝癌患者乙型肝炎病毒感染血清流行病學(xué)分析[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

7 阮秀花;田蔥;張效本;張喜梅;;肝癌患者乙型肝炎病毒感染血清流行病學(xué)分析[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

8 呂巖;韓學(xué)鋒;;肝癌患者需求的評(píng)估[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)工程學(xué)分會(huì)第八次學(xué)術(shù)年會(huì)暨《醫(yī)療設(shè)備信息》創(chuàng)刊20周年慶祝會(huì)論文集[C];2006年

9 孫華;魏懷玲;劉耕陶;;雙環(huán)醇對(duì)化學(xué)毒物促發(fā)肝癌的防治作用及作用機(jī)制研究[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

10 謝靜媛;戴煒;涂愛(ài)民;趙文高;符花;胡應(yīng)龍;;深圳地區(qū)53例肝癌發(fā)生的相關(guān)因素探討[A];全國(guó)第2屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議暨國(guó)家中醫(yī)藥管理局第1屆傳染病協(xié)作組會(huì)議論文匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 湖北宜昌 胡獻(xiàn)國(guó);吸煙與肝癌[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年

2 四川成都 孫清廉;遠(yuǎn)離肝癌 謹(jǐn)防四大危險(xiǎn)因素[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年

3 特約撰稿 北京朝陽(yáng)醫(yī)院京西院區(qū)肝膽外科主任 孫文兵;警惕肝癌的過(guò)度治療[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2007年

4 健康時(shí)報(bào)特約記者 孫理;三招不得肝癌[N];健康時(shí)報(bào);2008年

5 葉建平;專家提醒肝癌患者保護(hù)生命 重在“三早”防治[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2008年

6 通訊員 韋夏 本報(bào)記者 鄧宏鷹 鐘少鴻;不良飲食習(xí)慣易誘發(fā)肝癌[N];中國(guó)食品報(bào);2009年

7 記者 顧泳;我國(guó)肝癌患者占全球55%[N];解放日?qǐng)?bào);2010年

8 解放軍302醫(yī)院 劉士敬;四成肝癌酒精泡出來(lái)的[N];健康時(shí)報(bào);2010年

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10 記者 胡德榮;肝癌發(fā)生早期階段分子機(jī)制被揭示[N];健康報(bào);2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳放;TOPK蛋白和肝癌發(fā)生以及相關(guān)調(diào)控機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

2 張怡安;中樞神經(jīng)特異性RNA結(jié)合蛋白NOVA1在肝癌中的表達(dá)及其促進(jìn)腫瘤發(fā)展的潛在分子機(jī)制探究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 殷杰;E3泛素連接酶Prp19對(duì)肝癌侵襲的影響及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 周宇紅;分化抑制因子ID1在調(diào)控化療誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞“干性”改變中的作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 王盛;FOXA1基因變異和調(diào)控異常促，

本文編號(hào)：621872