NALP3炎性體在食管鱗癌的表達及IL-1β對ESC410細胞株作用的研究
發(fā)布時間:2017-08-04 21:24
本文關鍵詞:NALP3炎性體在食管鱗癌的表達及IL-1β對ESC410細胞株作用的研究
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【摘要】:第一部分:NALP3炎性體及相關炎性因子在人食管鱗癌中的表達目的:通過檢測人食管鱗癌組織與正常食管組織NALP3(NACHTLRR-PYD-containing proteins 3)炎性體各組成部分:NALP3受體蛋白、凋亡相關斑點樣蛋白(apoptosis associated speck-like protein containing a card ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及其相關炎性因子IL-1β、TNF-α表達差異,了解食管鱗癌與NALP3炎性體及相關炎性因子關系。材料與方法:酶聯(lián)免疫吸附試驗(Elisa法)對人食管鱗癌組織和食管正常組織各20例中IL-1β及TNF-α表達進行檢測,實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-qPCR)法檢測人食管腫瘤組織和正常組織NALP3炎性體各組分mRNA表達,使用western-blot法檢測人食管鱗癌組織和食管正常組織中NALP3炎性體蛋白的表達。結果:IL-1β在腫瘤組織及切緣正常組織中表達量分別為:[(3.84±0.78)pg/ml]和[(0.27±0.04)pg/ml](P0.01),TNF-α在腫瘤組織及切緣正常組織中表達量分別為:[(1.07±0.13)pg/ml]和[(0.40±0.06)pg/ml](P0.05)。NALP3蛋白在腫瘤組織及切緣正常組織中表達量分別為:(1.48±0.04)和(1.09±0.08),(P0.05),CASP-1蛋白在腫瘤組織及切緣正常組織中表達量分別為:(0.59±0.03)和(0.36±0.04),(P0.01),ASC蛋白在腫瘤組織及切緣正常組織中表達量分別為(0.42±0.10)和(0.18±0.08),(P0.05)。NALP3mRNA在腫瘤組織及切緣正常組織表達量分別為:(1.06±0.14)和(0.89±0.12),(p0.01),casp-1mrna在腫瘤組織及切緣正常組織表達量分別為:(0.93±0.09)和(0.80±0.12),(p0.05),ascmrna在腫瘤組織及切緣正常組織表達量分別為:(0.98±0.08)和(0.85±0.15),(p0.05)。結論:nalp3炎性體組分:nalp3受體蛋白(nalp3);半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1);凋亡相關的斑點樣蛋白(asc)及相關炎癥因子il-1β、tnf-α在人食管鱗癌組織的表達均高于正常組織。第二部分:il-1β對食管鱗癌細胞株esc410增殖及遷移能力的影響目的:通過以不同濃度il-1β刺激四川食管癌高發(fā)區(qū)的人食管癌鱗狀上皮細胞株(esc-410),探索il-1β對esc410細胞株遷移和增殖能力的影響。材料和方法:不同濃度il-1β(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml)刺激esc410細胞株,在刺激24h后采用edu(5-溴-2脫氧尿嘧啶)法檢測細胞增殖變化,刺激12h及24h后劃痕實驗測定細胞遷移能力變化。結果:1ng/ml刺激組及未刺激組細胞增殖比例分別為:[(42.6±1.0)%]和[(37.8±2.3)%],(p0.01)。10ng/ml刺激組及未刺激組細胞增殖比例分別為:[(38.9±1.4)%]和[(37.8±2.3)%],(p0.05)。經(jīng)1ng/ml濃度il-1β刺激12小時及24小時后細胞遷移距離(fx)與同時間未刺激組遷移距離分別為[12h,(219.1±13.8)和(121.4±12.0)](p0.01);[24h,(416.5±21.3)和(192.7±16.8)](p0.01)。經(jīng)10ng/ml濃度il-1β刺激12小時及24小時后細胞遷移距離(fx)與同時間未刺激組遷移距離分別為[12h,(135.5±35.2)和(121.4±12.0)](p0.05);[24h,(200.9±18.5)和(192.7±16.8)](p0.05)。結論:1ng/ml濃度的il-1β可明顯增加esc410細胞珠的增殖及遷移能力,但當其濃度升高至10ng/ml時,上述作用消失。
【關鍵詞】:NALP3炎性體 白細胞介素-1β 食管鱗癌 ESC410細胞株
【學位授予單位】:川北醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R735.1
【目錄】:
- 致謝4-5
- 摘要5-8
- Abstract8-11
- 前言11-12
- 實驗材料12-14
- 實驗方法14-30
- 結果30-36
- 討論36-39
- 結論39-40
- 附圖40-45
- 參考文獻45-49
- 綜述:NALP3炎性體及相關腫瘤性疾病發(fā)病機制的研究進展49-63
- 參考文獻57-63
- 個人簡歷63
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1 陸宇海;NALP3炎性體在食管鱗癌的表達及IL-1β對ESC410細胞株作用的研究[D];川北醫(yī)學院;2016年
,本文編號:621789
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