發(fā)布時(shí)間：2017-08-03 04:02

  本文關(guān)鍵詞：食管鱗癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測及臨床意義的研究

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【摘要】：背景食管癌是威脅人類健康的常見惡性腫瘤,在全球范圍內(nèi),其發(fā)病率和死亡率分別位居惡性腫瘤的第8位和第6位。食管癌的組織類型及發(fā)病情況存在明顯地區(qū)差異:歐美國家以腺癌為主;而在亞洲國家,鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)占全部病例的90%以上。ESCC患者預(yù)后較差,總的5年生存率不到30%,其中易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的重要原因。傳統(tǒng)的影像學(xué)及腫瘤標(biāo)志物檢查,難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。在腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的過程中,循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells,CTC)起到了重要的作用,CTC由于某種原因脫離腫瘤原發(fā)灶,進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)到達(dá)新組織,并在一定條件下發(fā)展為轉(zhuǎn)移灶。目前常用的CTC檢測方法主要包括:依賴腫瘤相關(guān)標(biāo)記物檢測的CellSearch系統(tǒng)以及基于形態(tài)學(xué)富集CTC的膜過濾分離腫瘤細(xì)胞技術(shù)(isolation by size of epithelial tumor cells,ISET)。隨著CTC檢測技術(shù)的進(jìn)步,CTC檢測的應(yīng)用成為目前腫瘤學(xué)界的研究熱點(diǎn)。近年來對乳腺癌,肺癌,結(jié)直腸癌等研究證實(shí),CTC是腫瘤患者獨(dú)立預(yù)后因子、靶向治療的標(biāo)志物和靶點(diǎn),CTC檢測對早期腫瘤風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)后評(píng)估、療效監(jiān)測等方面具有重要意義。與其他惡性腫瘤相比,對ESCC患者外周血CTC檢測及其臨床意義的研究較少,在PubMed檢索系統(tǒng)上僅有2篇使用CellSearch系統(tǒng)研究食管癌CTC的文獻(xiàn)報(bào)道,而尚無使用ISET技術(shù)在該領(lǐng)域的研究報(bào)道。目的1.使用cellsearch系統(tǒng)及iset技術(shù)(ctc-biopsy系統(tǒng))兩種方法檢測同一組escc患者外周血ctc的表達(dá)情況,比較兩種技術(shù)方法的ctc檢測結(jié)果。2.分析ctc檢測結(jié)果與escc患者臨床病理特征的關(guān)系,進(jìn)而探討ctc檢測對escc診斷治療的臨床指導(dǎo)意義。方法2014年5月-2014年12月山東省腫瘤醫(yī)院收治的61例病理確診為escc的初治患者作為研究對象,同期選擇22例健康志愿者作為對照組。受試者入組前均簽署知情同意書,登記受試者臨床資料。受試者在接受治療前于肘正中靜脈采集空腹血12.5ml,其中7.5ml血樣用于cellsearch系統(tǒng)檢測,5ml血樣用于ctc-biopsy系統(tǒng)檢測。ctc檢測流程嚴(yán)格按照檢測設(shè)備的操作手冊執(zhí)行。ctc結(jié)果判讀采用雙盲判讀,再經(jīng)第三方復(fù)核以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確。采用spss17.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),率的比較采用χ2檢驗(yàn)或fisher確切概率法。以p0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.健康志愿者外周血ctc檢測結(jié)果:分別使用cellsearch系統(tǒng)及iset技術(shù)檢測22例健康志愿者外周血,均未檢測到ctc。2.escc患者外周血ctc檢測結(jié)果:1)cellsearch系統(tǒng)檢測61例escc患者外周血,在1例iv期患者的外周血中檢測到ctc,總的檢出率為1.6%(1/61)。使用cellsearch系統(tǒng)檢測未能檢測到ctm;2)iset技術(shù)檢測61例escc患者外周血,在20例患者的外周血中檢測到ctc,總的檢出率為32.8%(20/61);按病理分期i-iv期患者ctc檢出率分別為0.0%(0/4)、30.8%(4/13)、31.4%(11/34)、50.0%(5/10)。在3例患者外周血中檢測到ctm,總檢出率為4.9%(3/61);按病理分期i-iv期患者ctm檢出率分別為0.0%(0/4)、7.7%(1/13)、2.9%(1/34)、10.0%(1/10)。3.escc患者外周血ctc檢測結(jié)果與患者臨床病理特征的相關(guān)性:1)CellSearch系統(tǒng)檢測CTC結(jié)果與ESCC患者年齡、性別、ECOG評(píng)分、飲酒史、吸煙史差異,血清CEA檢測結(jié)果,治療前血紅蛋白水平、治療前血小板計(jì)數(shù)、粒淋比均不相關(guān),與病理分期、腫瘤位置、大小、分化程度、侵犯程度,有無脈管侵犯,有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況均不相關(guān);2)ISET技術(shù)檢測CTC結(jié)果與ESCC患者病理分期、治療前血小板計(jì)數(shù)相關(guān)(P0.05),與其他臨床及病理特征均不相關(guān)。結(jié)論1.CellSearch系統(tǒng)檢測ESCC患者外周血CTC,特異度為100%,但靈敏度低,僅為1.6%(1/61);ISET技術(shù)檢測ESCC患者外周血CTC,特異度為100%,靈敏度為32.8%(20/61),使用ISET技術(shù)研究ESCC中CTC是可行的。2.造成CellSearch系統(tǒng)與ISET技術(shù)兩種方法檢測ESCC患者外周血CTC檢出率差別較大的原因是其檢測原理不同;其中CellSearch系統(tǒng)檢測CTC檢出率較低的原因還需要進(jìn)一步研究。3.首次報(bào)道,使用ISET技術(shù)可以在ESCC患者外周血中檢測到CTM。4.ISET技術(shù)檢測CTC結(jié)果與ESCC患者病理分期、治療前血小板計(jì)數(shù)相關(guān),提示CTC檢測結(jié)果可作為ESCC分期的有益補(bǔ)充,并提示ESCC血行轉(zhuǎn)移與血小板增多關(guān)系密切。
【關(guān)鍵詞】：食管鱗癌 循環(huán)腫瘤細(xì)胞 CellSearch系統(tǒng) 膜過濾分離腫瘤細(xì)胞技術(shù)(ISET)
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 主要符號(hào)表14-15
• 前言15-20
• 病例與方法20-29
• 結(jié)果29-35
• 討論35-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 附錄48-53
• 綜述53-60
• 參考文獻(xiàn)58-60
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果60-61
• 致謝61

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