本文關鍵詞：miR-3195對人喉癌Hep-2細胞增殖的抑制作用及其機制研究

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【摘要】：研究目的:本實驗探討miR-3195在人喉癌Hep-2細胞中的增殖作用及機制,通過構建穩(wěn)定高表達miR-3195的喉癌Hep-2細胞株,觀察miR-3195高表達后對人喉癌細胞株Hep-2裸鼠移植瘤增殖能力的影響,了解喉癌中miR-3195的生物學功能,通過生物信息學分析miR-3195可能調控的靶基因,初步分析其分子機制。方法:1、應用MTT實驗觀察miR-3195過表達后對喉癌Hep-2細胞增殖能力的影響。2、建立裸鼠移植瘤模型裸鼠皮下注入miR-3195 5.7倍/Hep-2,psh RNA-miR/Hep-2和Hep-2三組細胞建立人喉癌異種移植瘤模型,監(jiān)測三種不同細胞接種后裸鼠移植瘤的腫瘤形成及腫瘤生長情況。3、生物信息學分析對miR-3195可能的靶基因進行預測。4、Western blot驗證miR-3195與其靶基因在喉癌細胞中的調控關系。結果:1、通過MTT比色法分析顯示,以Hep-2組,psh RNA-miR/Hep-2及miR-3195 5.7倍/Hep-2細胞為研究對象,觀察miR-3195高表達后對喉癌Hep-2增殖能力的影響,其結果表明,miR-3195 5.7倍/Hep-2組細胞增殖落后Hep-2組和psh RNA-miR/Hep-2組,表明miR-3195高表達后抑制Hep-2細胞的增殖。2、三組細胞皮下接種后在裸鼠體內均成瘤,接種psh RNA-miR/Hep-2細胞和Hep-2細胞組移植瘤較接種miR-3195 5.7倍/Hep-2細胞組移植瘤生長快。接種后30天處死裸鼠,psh RNA-miR/Hep-2細胞和Hep-2細胞組移植瘤重量明顯高于miR-3195 5.7倍/Hep-2細胞組。3、靶基因預測軟件預測miR-3195 3’UTR特異性靶基因,發(fā)現(xiàn)有4個與腫瘤相關,其中預測結果顯示:miR-3195與ST3GAL23’UTR有2個結合位點,miR-3195與TBX1 3’UTR有1個結合位點。4、Western blot蛋白印記法檢測miR-3195與其靶基因ST3GAL2、TBX1在喉癌細胞中的調控關系:結果表明:miR-3195 5.7倍/Hep-2組較psh RNA-miR/Hep-2細胞和Hep-2組TBX1蛋白表達量明顯下降,而ST3GAL2則下降不明顯,提示miR-3195抑制喉癌的增殖可能與抑制TBX1基因表達有關。結論:1、miR-3195高表達后可以抑制喉癌Hep-2細胞株的增殖。2、miR-3195高表達后可能通過下調TBX1基因的表達水平,進而抑制喉癌Hep-2細胞株的增殖。
【關鍵詞】：喉癌 Hep-2細胞株 miR-3195 抑制增殖
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要中英文縮略語表9-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 材料和方法15-25
• 第3章 結果25-33
• 第4章 討論33-37
• 第5章 結論37-39
• 參考文獻39-43
• 綜述：長鏈非編碼RNA在喉癌中的表達及意義43-49
• 參考文獻47-49
• 攻讀碩士學位期間完成、發(fā)表論文情況49-51
• 致謝51

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