本文關(guān)鍵詞：JQ1抑制人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞上清促胃癌作用

  更多相關(guān)文章： 人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 胃癌 JQ1

【摘要】：目的:許多研究表明人骨髓來(lái)源的間質(zhì)干細(xì)胞與腫瘤的生長(zhǎng)有關(guān)。c-Myc作為原癌基因,與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系,JQ1作為c-Myc抑制劑,能抑制多種腫瘤的生長(zhǎng)。近而體內(nèi)外研究JQ1能否抑制由h BM-MSCs-CM所引起的促腫瘤的作用。方法:采用Ficoll分離液分離人骨髓單個(gè)核細(xì)胞,貼壁分離培養(yǎng)h BM-MSCs,用相差顯微鏡觀察其形態(tài)學(xué),并利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)h BM-MSCs的表面標(biāo)記;收集h BM-MSCs培養(yǎng)的上清(h BM-MSCs-CM)。分別用H-DMEM,DMSO,h BM-MSCs-CM,JQ1,JQ1+h BM-MSCs-CM處理MGC-803細(xì)胞48h,檢測(cè)JQ1對(duì)胃癌細(xì)胞株(MGC-803細(xì)胞)增殖能力、遷移能力和細(xì)胞周期的影響以及對(duì)c-Myc和干性相關(guān)標(biāo)志物(Sall4,Nanog,Oct4)表達(dá)的影響。同時(shí)構(gòu)建了30只BALB/c-nu/nu裸鼠異種移植瘤模型,觀察每組腫瘤生長(zhǎng)狀況。采用了MTT法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增殖、劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell檢測(cè)遷移能力,利用流式檢測(cè)細(xì)胞周期的變化,Western blot檢測(cè)c-Myc、干性相關(guān)標(biāo)志物(Sall4,Nanog,Oct4)以及Bcl-2和Bax的表達(dá)水平。結(jié)果:成功分離并鑒定人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞。JQ1體外明顯下調(diào)h BM-MSCs-CM處理組c-Myc以及干性相關(guān)標(biāo)志(Sall4,Nanog,Oct4)的表達(dá)水平。此外,在體外JQ1還發(fā)揮了抗胃癌細(xì)胞增殖的作用。但是對(duì)細(xì)胞周期和凋亡并沒(méi)有影響。h BM-MSCs-CM對(duì)胃癌細(xì)胞有明顯的促遷移作用,而JQ1能夠抑制h BM-MSCs-CM所誘導(dǎo)的MGC-803細(xì)胞的遷移。在體內(nèi)與體外結(jié)果相一致,JQ1能夠明顯的抑制h BM-MSCs-CM所誘導(dǎo)的促胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用,并且能夠下調(diào)干性相關(guān)標(biāo)志的表達(dá)水平。結(jié)論:JQ1能抑制由h BM-MSCs-CM所引起的促胃癌作用,為使臨床上防止h BM-MSCs-CM促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)成為可能。
【關(guān)鍵詞】：人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 胃癌 JQ1
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 英文縮寫(xiě)詞中英文注釋表11-12
• 第一章 緒論12-20
• 1.1 間質(zhì)干細(xì)胞12-14
• 1.1.1 間質(zhì)干細(xì)胞的來(lái)源與生物學(xué)特性12
• 1.1.2 間質(zhì)干細(xì)胞的臨床應(yīng)用及生物安全12-13
• 1.1.3 間質(zhì)干細(xì)胞與腫瘤的生長(zhǎng)13-14
• 1.2 C-MYC與腫瘤14-16
• 1.2.1 c-Myc基因簡(jiǎn)介14-15
• 1.2.2 c-Myc與腫瘤15-16
• 1.3 JQ1與腫瘤16-18
• 1.3.1 BET bromodomain蛋白小分子抑制劑----JQ116-17
• 1.3.2 JQ1與腫瘤生長(zhǎng)17
• 1.3.3 JQ1與c-Myc17-18
• 小結(jié)18-20
• 第二章 研究目的、方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案和意義20-22
• 2.1 研究目的20
• 2.2 研究方法20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案21
• 2.4 研究意義21-22
• 第三章 人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)22-28
• 3.1 材料和試劑22-23
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料22
• 3.1.2 主要試劑22
• 3.1.3 主要儀器、耗材22-23
• 3.2 方法23-24
• 3.2.1 人骨髓MSCs的分離擴(kuò)增23
• 3.2.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)MSCs表面標(biāo)記23-24
• 3.3 結(jié)果24-25
• 3.3.1 人骨髓MSCs的分離培養(yǎng)及形態(tài)特征24-25
• 3.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)hBM-MSCs的表面標(biāo)志25
• 3.4 討論25-28
• 第四章 JQ1對(duì)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞促腫瘤作用的影響28-46
• 4.1 材料與儀器28-29
• 4.1.1 主要試劑28-29
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞株29
• 4.1.3 主要儀器設(shè)備與耗材29
• 4.2 方法29-33
• 4.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)29-30
• 4.2.2 人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 （hBM-MSCs-CM）的準(zhǔn)備和腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)30
• 4.2.3 克隆形成實(shí)驗(yàn)30
• 4.2.4 MTT實(shí)驗(yàn)30-31
• 4.2.5 Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)31
• 4.2.6 劃痕實(shí)驗(yàn)31
• 4.2.7 細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)31
• 4.2.8 Western blot檢測(cè)c-Myc以及干性相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)31-32
• 4.2.9 BALB/c裸鼠皮下致瘤模型建立32
• 4.2.10 Western blot檢測(cè)裸鼠瘤組織干性相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)32-33
• 4.2.11 數(shù)據(jù)處理與分析33
• 4.3 結(jié)果33-42
• 4.3.1 hBM-MSCs-CM促進(jìn)胃癌細(xì)胞c-Myc的表達(dá)33-34
• 4.3.2 JQ1體外抑制hBM-MSCs-CM所引起的胃癌細(xì)胞株c-Myc和干性標(biāo)志物的表達(dá)水平上調(diào)34-36
• 4.3.3 JQ1體外抑制腫瘤細(xì)胞的增殖作用36-37
• 4.3.4 JQ1對(duì)hBM-MSCs-CM所誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞株MGC-803細(xì)胞周期和凋亡的影響37-39
• 4.3.5 JQ1抑制hBM-MSCs-CM所引起的MGC-803細(xì)胞的遷移39-41
• 4.3.6 JQ1體內(nèi)抑制hBM-MSCs-CM所引起的促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用41-42
• 4.4 討論42-46
• 第五章 結(jié)論與展望46-47
• 一、結(jié)論46
• 二、展望46-47
• 參考文獻(xiàn)47-55
• 致謝55-56
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參加會(huì)議56

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