本文關(guān)鍵詞：新型表皮生長因子受體抑制劑抗T790M型非小細(xì)胞肺癌作用

  更多相關(guān)文章： 受體 表皮生長因子 蛋白酪氨酸激酶類 癌 非小細(xì)胞肺 抗腫瘤活性 H1975細(xì)胞 T790M

【摘要】：目的:通過H1975和A431細(xì)胞的體外細(xì)胞增值抑制實(shí)驗(yàn),從7個(gè)FCN系列表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)中篩選出高活性、高選擇性化合物,并進(jìn)一步評價(jià)其體內(nèi)外抗腫瘤作用。方法:(1)首先采用MTS法對非小細(xì)胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)H1975細(xì)胞(T790M突變)進(jìn)行體外增殖抑制試驗(yàn)對7個(gè)FCN系列化合物進(jìn)行初步篩選,得到抗腫瘤活性強(qiáng)的化合物。(2)采用MTS法繼續(xù)對初步篩選出來的3個(gè)高活性化合物在人表皮鱗癌A431細(xì)胞(WT-EGFR)中進(jìn)行篩選,得到選擇性更好的化合物。(3)采用流式細(xì)胞儀檢測篩選化合對H1975細(xì)胞周期和凋亡的影響。(4)采用劃痕實(shí)驗(yàn)觀察篩選化合物對H1975細(xì)胞遷移能力的影響。(5)通過H1975細(xì)胞裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)明確篩選化合物在體內(nèi)對腫瘤生長的影響。結(jié)果:(1)與陽性對照物AZD9291對照,初步篩選出3個(gè)具有抑制H1975細(xì)胞增殖生長的高活性化合物:FCN12、FCN14和FCN15,半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為(103.33±12.10)、(115.17±7.69)和(128.63±32.72)nmol·L-1,細(xì)胞抑制作用呈濃度依賴性。(2)經(jīng)體外細(xì)胞抑制試驗(yàn)進(jìn)一步篩選,與陽性對照物AZD9291對照,結(jié)果發(fā)現(xiàn)FCN12和FCN14對A431細(xì)胞無明顯抑制作用(IC502μmol·L-1)。(3)經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示:不同濃度的FCN12和FCN14對H1975細(xì)胞的周期分布不同,與DMSO對照組相比,均可顯著將H1975細(xì)胞周期阻滯于G1期并呈濃度依賴性;同時(shí)FCN12和FCN14均可顯著促進(jìn)H1975細(xì)胞凋亡并呈濃度依賴性(P0.01)。(4)劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與DMSO對照組比較,FCN12和FCN14對H1975細(xì)胞的遷移抑制作用明顯,并與AZD9291相當(dāng),同時(shí)具有較好的濃度依賴性(P0.05)。(5)體內(nèi)移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示FCN12、FCN14可以明顯抑制腫瘤的生長并縮小腫瘤體積(P0.01)。結(jié)論:經(jīng)過篩選得到的EGFR-TKIs:FCN12和FCN14,具有明顯的體內(nèi)外抗腫瘤活性并具有較好的選擇性,對于治療T790M型EGFR突變非小細(xì)胞肺癌具有良好的開發(fā)前景和市場應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：受體 表皮生長因子 蛋白酪氨酸激酶類 癌 非小細(xì)胞肺 抗腫瘤活性 H1975細(xì)胞 T790M
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 第一部分：MTS法篩選高活性、高選擇性FCN化合物12-20
• 1 材料與方法12-16
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-18
• 3 討論18-20
• 第二部分：FCN12、FCN14對H1975細(xì)胞周期、凋亡和遷移的影響20-32
• 1 材料與方法20-24
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-30
• 3 討論30-32
• 第三部分：FCN化合物對H1975細(xì)胞裸鼠移植瘤的影響32-39
• 1 材料與方法32-35
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-37
• 3 討論37-39
• 全文總結(jié)39-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 文獻(xiàn)綜述43-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 致謝49-50
• 攻讀術(shù)士學(xué)位期間發(fā)表的論文50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 董良;李海金;;晚期非小細(xì)胞肺癌維持治療進(jìn)展[J];中國新藥與臨床雜志;2015年01期

2 韓慧珍;鄒龐;郭寶良;;分子靶向治療藥物的研究進(jìn)展[J];中國普通外科雜志;2010年12期

3 李紅艷;夏啟勝;徐梅;房青;徐波;陳志華;向青;;MTT、MTS、WST-1在細(xì)胞增殖檢測中最佳實(shí)驗(yàn)條件的研究[J];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2005年11期

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本文編號：584366