本文關(guān)鍵詞：供體來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)體外擴(kuò)增Tregs對(duì)受體腫瘤免疫的影響

  更多相關(guān)文章： 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 成熟樹(shù)突狀細(xì)胞 腫瘤

【摘要】：目的研究過(guò)繼輸注體外擴(kuò)增Tregs治療是否抑制移植物受體的抗腫瘤免疫,以及體外擴(kuò)增Tregs與供體來(lái)源成熟樹(shù)突狀細(xì)胞共培養(yǎng)是否能夠誘導(dǎo)Tregs的抗原特異性。方法1.取C57BL/6 (H-2b)小鼠或BALB/c (H-2d)小鼠骨髓細(xì)胞,在重組鼠源性GM-CSF和IL-4誘導(dǎo)以及TNF-a刺激下分化為成熟樹(shù)突狀細(xì)胞。2.免疫磁珠法(MACS)從BALB/c或C57BL/6小鼠脾臟分選出CD4+CD25+Tregs,加入anti-CD3/CD28磁珠和高濃度重組鼠源性IL-2(1000U/ml),體外擴(kuò)增14天。3.在給予低濃度重組鼠源性IL-2 (200U/ml)的條件下,體外擴(kuò)增后CD4+CD25+ regs與成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(C57BL/6小鼠CD4+CD25+ Tregs與BALB/c小鼠成熟樹(shù)突狀細(xì)胞或者BALB/c小鼠CD4+CD25+ Tregs與C57BL/6小鼠成熟樹(shù)突狀細(xì)胞)混合培養(yǎng)7天。4.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)成熟樹(shù)突狀細(xì)胞及Tregs純度,混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)檢測(cè)Tregs體外抑制功能。5.構(gòu)建小鼠皮膚移植模型檢測(cè)Tregs體內(nèi)抑制功能。6.分別注射B16-F10(小鼠黑色素瘤細(xì)胞,H-2b)于C57BL/6和BALB/c小鼠,建立小鼠腫瘤模型。7.收集擴(kuò)增后及誘導(dǎo)后Tregs分別過(guò)繼輸注于C57BL/6和BALB/c小鼠體內(nèi),24小時(shí)后注射B16-F10。8.14天后處死小鼠,觀察肺部腫瘤結(jié)節(jié)并記數(shù)。結(jié)果1.擴(kuò)增后及誘導(dǎo)后Tregs與新鮮分選Tregs相比,純度和免疫抑制功能無(wú)明顯下降。2.擴(kuò)增后及誘導(dǎo)后Tregs能夠顯著延長(zhǎng)同種異體皮膚移植物生存時(shí)間(14.5天Vs 9天,β0.05)。3.C57BL/6小鼠單獨(dú)注射5×105B16-F10,14天后肺部腫瘤結(jié)節(jié)為93+12個(gè),預(yù)先輸注1×107體外擴(kuò)增后Tregs,24小時(shí)后注射5×10。B16-F10,肺部腫瘤結(jié)節(jié)為355±15個(gè),而預(yù)先輸注1×107誘導(dǎo)后Tregs,24小時(shí)后注射5×105B16-F10,肺部腫瘤結(jié)節(jié)為195±13個(gè),相比單獨(dú)注射B16-F10,后兩者肺部腫瘤結(jié)節(jié)明顯增加(p0.05)。4.單獨(dú)注射5×10B16-F10, BALB/c小鼠肺部腫瘤結(jié)節(jié)為9±-6個(gè),預(yù)先輸注1×107體外擴(kuò)增后Tregs,24小時(shí)后注射5×105B16-F10,肺部腫瘤結(jié)節(jié)為124+4個(gè),而預(yù)先輸注1×107誘導(dǎo)后Tregs,24小時(shí)后注射5×105B16-F10,肺部腫瘤結(jié)節(jié)為297±-18個(gè),與單獨(dú)注射B16-F10相比,后兩者肺部腫瘤結(jié)節(jié)明顯增加(p0.05)。結(jié)論1.通過(guò)MACS分選,Tregs純度能夠達(dá)到95%以上。2.通過(guò)體外擴(kuò)增,我們能夠得到足量的具有免疫抑制功能的Tregs 。3.過(guò)繼輸注一定數(shù)量體外擴(kuò)增后Tregs能夠抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫,引起MHC完全匹配(受體來(lái)源)或完全不匹配(供體來(lái)源)腫瘤的發(fā)生。4.體外擴(kuò)增后Tregs與供體來(lái)源成熟樹(shù)突狀細(xì)胞混合培養(yǎng)能夠誘導(dǎo)Tregs的抗原特異性。
【關(guān)鍵詞】：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 成熟樹(shù)突狀細(xì)胞 腫瘤
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R730.3
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-14
• 1 材料與方法14-22
• 2 結(jié)果22-31
• 3 討論31-34
• 全文總結(jié)34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 文獻(xiàn)綜述39-49
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 致謝49-50
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文50

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳復(fù)興;劉軍權(quán);馮霞;張娟;張頌;;一種體外擴(kuò)增人γδΤ細(xì)胞的新方法[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年07期

2 婁典;周新伏;;體外擴(kuò)增臨床應(yīng)用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年10期

3 杜娟,鄒征云,錢(qián)曉萍,孫雪梅,劉寶瑞;細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外擴(kuò)增及生物學(xué)活性研究[J];江蘇醫(yī)藥;2004年04期

4 陳燕春;于麗;劉煥彩;高海玲;趙春艷;;造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增的研究進(jìn)展[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2007年01期

5 張國(guó)慶;焦順昌;林星石;魏秀芳;;惡性腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞體外擴(kuò)增后亞群的變化[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2008年03期

6 吳文書(shū),李岱宗,劉健,黃震宇,田培坤,洪錦心;抗小細(xì)胞肺癌單抗輕鏈變區(qū)基因的體外擴(kuò)增、克隆及其部分順序分析[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1991年03期

7 余艷;羅振;程臘梅;;造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增方法研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2012年24期

8 郭榮,鄒萍;NOD/SCID小鼠模型在人臍血體外擴(kuò)增后移植中的應(yīng)用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);2002年03期

9 費(fèi)小明,陸化,吳雨潔,周迎峰,周小玉,唐宇鴻,沈文怡,汪承亞;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)臍血干細(xì)胞體外擴(kuò)增支持作用的研究[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2004年03期

10 張伶,劉國(guó)卿;體外擴(kuò)增對(duì)臍血細(xì)胞重建造血功能的影響[J];臨床血液學(xué)雜志;2001年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 范錦立;蔡海波;譚文松;;降低胞內(nèi)的活性氧水平對(duì)臍血CD34+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響[A];第三屆全國(guó)化學(xué)工程與生物化工年會(huì)論文摘要集（上）[C];2006年

2 陳復(fù)興;劉軍權(quán);馮霞;張娟;張頌;;一種體外擴(kuò)增人γδT細(xì)胞的新方法[A];第九屆全國(guó)腫瘤生物治療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

3 程焱;孫保亮;;體外擴(kuò)增的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞過(guò)繼轉(zhuǎn)輸對(duì)腦缺血的保護(hù)作用[A];中國(guó)微循環(huán)學(xué)會(huì)2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議大會(huì)匯編[C];2014年

4 王強(qiáng);彭毅志;;小鼠骨髓不成熟DC的體外擴(kuò)增及鑒定[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會(huì)議暨貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷整形分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

5 鄒菁;鄒萍;劉凌波;;抑制活化的p38 MAPKα促進(jìn)臍帶血造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

6 羅毅;鄒萍;鄒菁;汪潔;劉凌波;;抑制異常mTORC1活性促進(jìn)小鼠造血千細(xì)胞體外擴(kuò)增并維持干性[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

7 翟瓊莉;邱錄貴;韓忠朝;;體外擴(kuò)增中CD_(34)~+細(xì)胞CD_(38)與HLA-DR抗原表達(dá)的變化[A];第九屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

8 李明輝;田丁;劉聰艷;孫雪靜;蘇力;萬(wàn)歲桂;徐娟;;臍血細(xì)胞體外擴(kuò)增與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[A];第三屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

9 孔佩艷;羅成基;周燕虹;郭朝華;;基質(zhì)細(xì)胞對(duì)體外擴(kuò)增造血細(xì)胞造血重建活性的促進(jìn)作用[A];第九屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

10 羅毅;鄒萍;鄒菁;汪潔;劉凌波;;Rapamycin協(xié)同SB203580促進(jìn)造血干/祖細(xì)胞體外擴(kuò)增[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 翟瓊莉;臍帶血干/祖細(xì)胞的體外擴(kuò)增及擴(kuò)增后干/祖細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

2 李橋川;基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1和血小板第4因子對(duì)臍帶血干/祖細(xì)胞體外擴(kuò)增及歸巢相關(guān)功能的影響研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 羅毅;抑制體外擴(kuò)增小鼠造血干細(xì)胞衰老維持干性：下調(diào)異常激活的mTORC1信號(hào)[D];華中科技大學(xué);2011年

4 吉昌華;HIV-1 GAG基因片段的體外擴(kuò)增、克隆和表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的純化和鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1991年

5 范華驊;體外擴(kuò)增的人調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制小鼠骨髓移植急性移植物抗宿主病[D];華東師范大學(xué);2012年

6 鄒菁;維持體外擴(kuò)增臍帶血干細(xì)胞干性：下調(diào)異常升高的ROS和p38MAPKα信號(hào)[D];華中科技大學(xué);2011年

7 楊安鋼;抗人CD3單抗重、輕鏈可變區(qū)基因的體外擴(kuò)增、克隆和序列分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1992年

8 曾夢(mèng)華;治療性應(yīng)用于移植的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的體外擴(kuò)增及共刺激分子B7-1和B7-2對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)育和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)影響[D];華中科技大學(xué);2009年

9 李曉紅;細(xì)胞因子IL-2，，15聯(lián)合自體DCs對(duì)人外周血來(lái)源的NK細(xì)胞體外擴(kuò)增及功能影響的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉釗;供體來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)體外擴(kuò)增Tregs對(duì)受體腫瘤免疫的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

2 葛劍云;體外擴(kuò)增過(guò)程中造血細(xì)胞生理狀態(tài)和遺傳穩(wěn)定性研究[D];華東理工大學(xué);2011年

3 鮑彥娜;CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞體外擴(kuò)增的研究[D];延邊大學(xué);2011年

4 王子艷;氧分壓對(duì)造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增特性和生理功能的影響[D];華東理工大學(xué);2015年

5 藍(lán)三春;人CD4+CD25+調(diào)節(jié)T細(xì)胞體外擴(kuò)增研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

6 費(fèi)小明;臍血造血干細(xì)胞的體外擴(kuò)增[D];南京醫(yī)科大學(xué);2003年

7 郝俊;雷帕霉素對(duì)人CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響[D];華東師范大學(xué);2012年

8 豐濤;天然CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞體外擴(kuò)增及誘導(dǎo)型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的體外誘導(dǎo)初步研究[D];華東師范大學(xué);2009年

9 李昆;應(yīng)用攪拌式生物反應(yīng)器體外擴(kuò)增人胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

10 李振華;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子對(duì)體外擴(kuò)增調(diào)節(jié)性T細(xì)胞HLA-DR表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2013年

本文編號(hào)：580280