本文關(guān)鍵詞：進展期胃癌患者術(shù)中腹腔脫落細胞及相關(guān)基因的研究

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【摘要】：目的:研究進展期胃癌患者手術(shù)過程前、后腹腔灌洗液脫落細胞及其DNA異倍體的陽性率,探討其與癌胚抗原(CEA)、細胞角蛋白7(CK7)、基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)等相關(guān)基因、臨床病理的關(guān)系以及手術(shù)對其的影響。方法:選取前瞻性、多中心、開放、隨機對照Ⅲ期臨床試驗(NCT01516944)中132例直接手術(shù)的進展期胃癌患者,所有患者術(shù)前均行全腹平掃+增強CT等影像學(xué)檢查以排除遠處轉(zhuǎn)移,并經(jīng)胃鏡咬檢6~8塊組織,病理診斷為胃腺癌,且均未使用化療或放療。手術(shù)均擬行標(biāo)準(zhǔn)的D2根治術(shù),如開腹后發(fā)現(xiàn)已有遠處轉(zhuǎn)移則視情況行姑息手術(shù),手術(shù)全過程采用嚴格的無瘤操作。手術(shù)開始后探查腹腔,患者頭高腳低位,提起橫結(jié)腸系膜,用生理鹽水300~400ml(37℃)沖洗下腹部及Doglas窩,使用負壓吸引器直接將灌洗液吸入干凈的標(biāo)本袋中,如有腹水則有直接抽出,收集300ml左右,此為手術(shù)過程前組標(biāo)本;手術(shù)結(jié)束關(guān)腹前使用無菌蒸餾水(37℃)沖洗3次,共約10分鐘左右,負壓吸盡,再用生理鹽水300~400ml(37℃)沖洗全腹腔,使用新的吸引器吸取灌洗液300ml左右,此為手術(shù)過程后組標(biāo)本,兩次標(biāo)本均行腹腔灌洗液細胞學(xué)(peritoneal lavage cytology,PLC)檢查,并使用Feulgon染色,檢測其DNA倍體,倍體≥5c為異常,給出四張圖表報告,第一張圖橫軸為DNA含量,縱軸為細胞數(shù)量,正常值5c。第二張圖橫軸為DNA含量,縱軸為細胞核面積。第三張圖為DNA含量最高的前20個DNA倍體數(shù)值和圖像。最后一張為數(shù)值最大的DNA倍體的鏡下圖像。報告結(jié)果為(陰性)未見DNA倍體異常細胞;(陽性)可見DNA倍體異常細胞。同時檢測CEA、CK7、MMP7,在玻片上觀察目標(biāo)細胞(考慮為癌細胞且需除外炎細胞、組織細胞和增生間皮細胞等)。CEA和MMP7定位于細胞漿,胞質(zhì)均勻狀著棕黃色判定為陽性,不著色為陰性;CK7定位于細胞質(zhì),著色判定為陽性,否則為陰性;所有標(biāo)本均加做WT-1、Calretinin以排除間皮細胞。分析PLC和DNA異倍體陽性與各臨床病理參數(shù)的關(guān)系以及手術(shù)對其的影響。結(jié)果:1目前PLC被認為是檢測腹腔脫落癌細胞(exfoliated cancer cells,ECC)的金標(biāo)準(zhǔn),操作方法簡便,但其敏感性較低。2 132例胃癌患者中手術(shù)過程前組有24例PLC陽性(18.18%),而異倍體陽性的有35例(26.52%),具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.001),其敏感度為100%,特異度為89.81%。3手術(shù)過程前組的CEA、CK7、MMP7的陽性率分別為27.27%、24.24%、25%;而手術(shù)過程后的CEA、CK7、MMP7的陽性率分別為15.15%、14.39%、12.88%。PLC陽性與CEA、CK7的陽性率存在差異(P0.05),但DNA異倍體陽性與CEA、CK7、MMP7的陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。4根治性的R0手術(shù)PLC的陽性率為12.07%,明顯低于根治性的R1或R2或姑息手術(shù)的62.5%(P0.05)。5手術(shù)過程前腹腔灌洗液陽性與腫瘤最長徑、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、腫瘤分期、手術(shù)根治度有關(guān)(P0.05),與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度、Lauren分型、Borrmann分型無關(guān)(P0.05)。6手術(shù)全程采用嚴格的無瘤操作,經(jīng)過關(guān)腹前大量蒸餾水沖洗后,手術(shù)過程后組的PLC陽性率為9.09%,比術(shù)前的18.18%有了明顯的下降,且兩者之間存在統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.004)。24例手術(shù)過程前組PLC陽性的患者,有14例手術(shù)過程后轉(zhuǎn)為陰性;但是,有兩例患者手術(shù)過程前組PLC為陰性(可見異型細胞,且DNA倍體均5c),而手術(shù)過程后變?yōu)榱岁栃?此2例患者手術(shù)過程前的PLC結(jié)果及有可能是假陰性,而術(shù)后的結(jié)果為真陽性;亦有可能是術(shù)中無瘤操作不當(dāng)造成的醫(yī)源性的腫瘤細胞脫落。結(jié)論:1 PLC法目前仍是診斷ECC的金標(biāo)準(zhǔn),但是其敏感度較低,陽性率不高,而DNA倍體及CEA、CK7、MMP7等相關(guān)基因的檢測結(jié)果陽性率比PLC高。2手術(shù)根治度越高,PLC的陽性率就越低。3這同時也跟腫瘤的分期相關(guān),同樣隨著腫瘤浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期增加,其做根治手術(shù)的成功率就越低,PLC的陽性率亦會增高。4手術(shù)全程中采用嚴格的無瘤術(shù)后,可明顯降低癌細胞的脫落種植。
【關(guān)鍵詞】：腹腔灌洗液細胞學(xué) DNA異倍體 進展期胃癌 無瘤術(shù) CEA CK7 MMP7
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11
• 材料與方法11-16
• 結(jié)果16-18
• 附圖18-26
• 附表26-29
• 討論29-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-35
• 綜述 胃癌腹腔脫落細胞及相關(guān)指標(biāo)檢測的研究進展35-45
• 參考文獻42-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：576438