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基于適配子的小肝癌診斷研究

發(fā)布時間:2017-07-20 20:23

  本文關(guān)鍵詞:基于適配子的小肝癌診斷研究


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【摘要】:背景與目的:小肝癌沒有明顯的臨床癥狀,AFP大多為陰性,其臨床診斷主要依賴B超、CT及MRI等影像學(xué)檢查。Meta分析顯示影像學(xué)檢查診斷肝癌的敏感度和特異度只有77%~84%,對于小肝癌更不理想。血清標(biāo)志物檢測是簡便易行的腫瘤篩查診斷方法,但目前仍缺乏有臨床價值的小肝癌標(biāo)志物。適配子是生物分子的單鏈核酸配體,通過SELEX技術(shù)從人工合成的單鏈隨機寡核苷酸文庫中篩選獲得,能高特異性、高親和力結(jié)合靶分子,在疾病診斷中應(yīng)用前景良好。本課題組在前期研究中,以肝癌血清為靶標(biāo)篩選到一批適配子,其中部分適配子對肝癌血清具有良好的結(jié)合特異性。本研究評價其中2個適配子AP-HCS-9-74和AP-HCS-9-132對小肝癌的診斷價值,并與AFP等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物及DKK1和MDK兩種肝癌新標(biāo)志物進行比較,為建立小肝癌診斷新技術(shù)奠定基礎(chǔ)。方法:1.研究對象及其臨床資料:研究對象為南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院2014-2015年間住院治療的小肝癌、肝硬化、慢性肝炎患者和健康體檢的正常人。收集的血清標(biāo)本,-80℃保存?zhèn)溆。同時收集研究對象的臨床資料。2.肝癌血清適配子診斷小肝癌:采用本課題組前期建立的適配子熒光分析法檢測血清標(biāo)本。先以小樣本小肝癌和肝硬化血清標(biāo)本優(yōu)化適配子及熒光染料用量,然后擴大樣本檢測小肝癌、肝硬化、慢性肝炎和正常血清標(biāo)本。AUROC評價單項熒光指標(biāo)、多項熒光指標(biāo)Logistic回歸建模、適配子聯(lián)合分析對小肝癌的診斷價值,并計算診斷效率(敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、預(yù)測值和似然比)。3.肝癌血清新標(biāo)志物診斷小肝癌:采用商業(yè)化ELISA試劑盒檢測DKK1和MDK在小肝癌、肝硬化、慢性肝炎和正常血清標(biāo)本中的表達水平,AUROC評價DKK1和MDK單獨和聯(lián)合分析對小肝癌的診斷價值。4.傳統(tǒng)血清腫瘤標(biāo)志物診斷小肝癌:收集研究對象的血清AFP、CEA、CA125和CA199檢測結(jié)果,AUROC評價AFP及其與其他標(biāo)志物L(fēng)ogistic回歸建模對小肝癌的診斷價值,并計算診斷效率(敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、預(yù)測值和似然比)。5.適配子與常規(guī)實驗室檢查結(jié)果聯(lián)合診斷小肝癌:將適配子、腫瘤標(biāo)志物和肝功能通過logistic回歸建模進行聯(lián)合分析,auroc評價模型對小肝癌的診斷價值,并計算診斷效率(敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、預(yù)測值和似然比)。結(jié)果:1.研究對象的人口學(xué)資料及臨床特點:本研究共收集研究對象432例,其中小肝癌102例(男83例,女19例,年齡55.9±12.4歲),肝硬化110例(男88例,女22例,年齡52.0±11.6歲),慢性肝炎110例(男86例,女24例,年齡36.8±12.6歲),正常對照110例(男77例,女33例,年齡55.5±6.2歲)。3組肝病患者的主要病因為乙肝病毒感染(69.1%~88.0%),肝功能child-pugh分級以a組為主(49.1%~54.9%)。2.肝癌血清適配子對小肝癌的診斷價值:適配子ap-hcs-9-74診斷小肝癌的單項指標(biāo)最大auroc為0.748,多指標(biāo)建模為0.819。ap-hcs-9-132診斷小肝癌的單項指標(biāo)最大auroc為0.713,多指標(biāo)建模為0.880。兩者聯(lián)合診斷小肝癌的auroc可提高到0.931,敏感度為90.2%,特異度為81.2%,準(zhǔn)確度為83.3%。3.dkk1和mdk對小肝癌的診斷價值:dkk1在小肝癌和肝硬化血清標(biāo)本(各32例)中的濃度分別為331.3±141.6pg/ml和339.5±71.0pg/ml(p=0.774)。mdk在小肝癌和肝硬化血清標(biāo)本(各32例)中的濃度分別為1043.5±447.5pg/ml和967.6±942.8pg/ml(p=0.643)。dkk1診斷小肝癌的auroc為0.538,mdk診斷小肝癌的auroc為0.734,兩者聯(lián)合診斷小肝癌的auroc為0.540。4.afp等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物對小肝癌的診斷價值:afp單獨診斷小肝癌的auroc為0.684,與cea、ca125和ca199聯(lián)合建模診斷小肝癌的auroc為0.744。5.適配子與常規(guī)實驗室檢查結(jié)果聯(lián)合對小肝癌的診斷價值:適配子、腫瘤標(biāo)志物和肝功能聯(lián)合建模診斷小肝癌的總auroc為0.965,敏感度為90.2%,特異度為90.3%,準(zhǔn)確度為90.3%,陽性預(yù)測值為74.2%,陰性預(yù)測值為96.8%,陽性似然比為9.30,陰性似然比為0.11。結(jié)論:1.適配子AP-HCS-9-74和AP-HCS-9-132對小肝癌有良好的診斷價值,尤其是兩者聯(lián)合分析時。2.小樣本分析未能證實DKK1和MDK的血清水平在小肝癌和肝硬化之間存在顯著差異,單獨或兩者聯(lián)合對小肝癌均無明顯診斷價值。3.AFP對小肝癌的診斷價值有限,但與適配子聯(lián)合分析可明顯提高其診斷價值。
【關(guān)鍵詞】:小肝癌 診斷 適配子 DKK1 MDK AFP 聯(lián)合分析
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.7
【目錄】:
  • 摘要3-6
  • abstract6-13
  • 第1章 引言13-16
  • 1.1 小肝癌的診斷現(xiàn)狀13-15
  • 1.2 適配子及其在腫瘤診斷研究中的價值15-16
  • 第2章 材料與方法16-25
  • 2.1 材料16-17
  • 2.1.1 實驗試劑16
  • 2.1.2 實驗儀器16
  • 2.1.3 主要溶液的配制16-17
  • 2.2 實驗方法17-24
  • 2.2.1 血清標(biāo)本收集與研究對象的診斷標(biāo)準(zhǔn)17
  • 2.2.2 肝癌血清適配子檢測小肝癌17-20
  • 2.2.2.1 適配子熒光分析法檢測小肝癌的實驗條件優(yōu)化17-19
  • 2.2.2.2 適配子擴大樣本檢測小肝癌19
  • 2.2.2.3 適配子聯(lián)合分析檢測小肝癌19-20
  • 2.2.3 肝癌新標(biāo)志物檢測小肝癌20-23
  • 2.2.3.1 血清DKK1水平的ELISA檢測20-21
  • 2.2.3.2 MDK檢測小肝癌21-23
  • 2.2.3.3 DKK1和MDK聯(lián)合檢測小肝癌23
  • 2.2.4 AFP等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物檢測小肝癌23
  • 2.2.5 適配子與常規(guī)實驗室檢查結(jié)果聯(lián)合檢測小肝癌23-24
  • 2.2.5.1 適配子與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測小肝癌23
  • 2.2.5.2 適配子與肝功能聯(lián)合檢測小肝癌23-24
  • 2.2.5.3 適配子與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物和肝功能聯(lián)合檢測小肝癌24
  • 2.3 統(tǒng)計方法24-25
  • 第3章 結(jié)果25-52
  • 3.1 臨床資料25-30
  • 3.2 肝癌血清適配子對小肝癌的診斷價值30-41
  • 3.2.1 適配子AP-HCS974對小肝癌的診斷價值30-35
  • 3.2.1.1 適配子AP-HCS974檢測小肝癌的最佳實驗條件30-33
  • 3.2.1.2 適配子AP-HCS974對小肝癌的診斷價值33-35
  • 3.2.2 適配子AP-HCS9132對小肝癌的診斷價值35-40
  • 3.2.2.1 適配子AP-HCS9132檢測小肝癌的最佳實驗條件35-38
  • 3.2.2.2 適配子AP-HCS9132對小肝癌的診斷價值38-40
  • 3.2.3 適配子聯(lián)合分析對小肝癌的診斷價值40-41
  • 3.3 肝癌新標(biāo)志物對小肝癌的診斷價值41-43
  • 3.3.1 DKK1對小肝癌的診斷價值41-42
  • 3.3.2 MDK對小肝癌的診斷價值42-43
  • 3.3.3 DKK1和MDK聯(lián)合對小肝癌的診斷價值43
  • 3.4 AFP等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物對小肝癌的診斷價值43-45
  • 3.5 適配子與常規(guī)實驗室檢查結(jié)果聯(lián)合對小肝癌的診斷價值45-52
  • 3.5.1 適配子與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合診斷小肝癌45-47
  • 3.5.2 適配子與肝功能聯(lián)合診斷小肝癌47-49
  • 3.5.3 適配子與腫瘤標(biāo)志物、肝功能聯(lián)合診斷小肝癌49-52
  • 第4章 討論52-56
  • 4.1 適配子對小肝癌的診斷價值52-54
  • 4.2 肝癌標(biāo)志物對小肝癌的診斷價值54-56
  • 第5章 結(jié)論與展望56-57
  • 5.1 結(jié)論56
  • 5.2 展望56-57
  • 致謝57-58
  • 參考文獻58-61
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果61-62
  • 綜述62-72
  • 參考文獻69-72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 童華波;庭永君;段Y,

本文編號:569871


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