本文關(guān)鍵詞：p53及其上游基因ATM、下游基因PUMA在大腸癌中的表達(dá)及意義

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【摘要】：目的:大腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一,大腸癌的發(fā)生發(fā)展是是一個(gè)多因素、多步驟的過程,在經(jīng)過DNA甲基化、DNA受損、多個(gè)癌基因和抑癌基因表達(dá)異常的作用下導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生,而抑癌基因的突變或缺失是大腸癌發(fā)生發(fā)展的主要分子生物學(xué)改變。其中抑癌基因p53及其上下游基因ATM、PUMA在大腸癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。p53基因包含野生型和突變型。野生型p53基因可以通過阻滯細(xì)胞周期、修復(fù)受損DNA、促進(jìn)細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤血管生成等產(chǎn)生抑癌作用,突變型p53可以通過對(duì)野生型p53蛋白負(fù)性調(diào)控、誘導(dǎo)使染色體不穩(wěn)定促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。野生型p53蛋白的半衰期約30分鐘,用免疫組化方法很難檢測(cè)到;而突變型p53蛋白由于其空間構(gòu)象發(fā)生改變,因此難以降解,其半衰期延長(zhǎng)至數(shù)小時(shí),可以用免疫組化檢測(cè)出,因此當(dāng)使用免疫組化法檢測(cè)到組織中p53表達(dá)時(shí),均為突變型p53。ATM基因是p53基因的上游調(diào)控基因,其在DNA損傷尤其是輻射等導(dǎo)致的DNA雙鏈斷裂的感應(yīng)及修復(fù)、細(xì)胞周期的調(diào)控、細(xì)胞凋亡中都發(fā)揮著重要的作用。PUMA基因是p53基因的下游靶基因,是一個(gè)促凋亡啟動(dòng)基因,在多種應(yīng)激誘發(fā)的細(xì)胞依賴p53及非依賴p53機(jī)制誘導(dǎo)凋亡中起關(guān)鍵作用。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)p53與大腸癌的相關(guān)研究報(bào)道較多,對(duì)ATM、PUMA與大腸癌的相關(guān)研究報(bào)道較少,并且主要在細(xì)胞株中研究。目前尚未見聯(lián)合檢測(cè)p53及其上下游基因ATM、PUMA與大腸癌的相關(guān)研究報(bào)道。本研究擬采用免疫組化法通過聯(lián)合檢測(cè)p53、ATM、PUMA在大腸癌中的表達(dá)情況,探討p53及其上下游基因ATM、PUMA在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的相互作用,以期為探討大腸癌的發(fā)病機(jī)制、協(xié)助臨床診斷治療以及判斷預(yù)后提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法:收集四川省人民醫(yī)院2013年-2014年未行放化療、手術(shù)切除后病理診斷證實(shí)為大腸癌的存檔組織蠟塊60例,正常對(duì)照組20例則取距大腸癌末端5cm以外的大腸組織。整理臨床資料,并采用免疫組化Envision兩步法檢測(cè)p53、ATM、PUMA在大腸癌和大腸癌旁正常組織中的表達(dá)情況,并分析其表達(dá)與臨床病理資料的關(guān)系。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:所有結(jié)果均采用SPSS19.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。計(jì)數(shù)資料應(yīng)用x2檢驗(yàn);等級(jí)相關(guān)分析應(yīng)用Spearman相關(guān)性分析。結(jié)果：1.突變型p53在大腸癌中陽(yáng)性表達(dá)率為61.67%(37/60),在癌旁正常組織為25%(5/20);突變型p53在大腸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。突變型p53的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小無(wú)關(guān),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);突變型p53與腫瘤發(fā)生部位、臨床TNM分期、浸潤(rùn)深度、腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.ATM在大腸癌中的表達(dá)率為35%(21/60),在癌旁正常組織中的表達(dá)率為60%(12/20);ATM在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率低于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。ATM的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、發(fā)生部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤病理分化程度和浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),ATM的表達(dá)與結(jié)腸癌臨床TNM分期有關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.PUMA在大腸癌中的表達(dá)率為36.67%(22/60),在癌旁正常組織中的表達(dá)率為65%(13/20);PUMA在大腸癌的陽(yáng)性表達(dá)率低于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。PUMA的表達(dá)與患者年齡、性別、是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);PUMA的表達(dá)與腫瘤大小、發(fā)生部位、浸潤(rùn)深度、TNM分期、腫瘤病理分化程度有關(guān),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.p53的表達(dá)與ATM和PUMA的表達(dá)成負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=0.363,x2=7.904,P0.05;r=0.315,x 2=5.967,P0.05)。ATM的表達(dá)與PUMA的表達(dá)無(wú)相關(guān)關(guān)系(r=0.167,x 2=1.669,P0.05)。結(jié)論：1.突變型p53在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率增高,提示突變型p53可能通過促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的增殖以及抑制大腸癌細(xì)胞的凋亡,促進(jìn)了大腸癌的發(fā)生。ATM在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率降低,提示ATM基因可能由于發(fā)生突變,其蛋白表達(dá)減少,進(jìn)而降低了其對(duì)大腸癌的防御功能,可能是大腸癌的發(fā)生原因之一。PUMA在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)率降低,可能是其上游基因p53發(fā)生突變,抑制了PUMA的表達(dá),因此促凋亡功能受到抑制,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞惡性增殖。2.突變型p53在中低分化組、TNM晚期大腸癌組、浸潤(rùn)漿膜組和伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組大腸癌中陽(yáng)性表達(dá)率增高,ATM在TNM晚期大腸癌組中陽(yáng)性表達(dá)率減低,PUMA在中低分化組、TNM晚期大腸癌組和浸潤(rùn)漿膜組大腸癌中陽(yáng)性表達(dá)率減低,提示突變型p53、ATM和PUMA可能與大腸癌的預(yù)后有關(guān),可能對(duì)評(píng)估大腸癌患者的預(yù)后有一定幫助。3.ATM和突變型p53在大腸癌中存在負(fù)相關(guān),突變型p53和PUMA在大腸癌中也存在負(fù)相關(guān),提示ATM基因可能因?yàn)榘l(fā)生突變,蛋白表達(dá)減少,導(dǎo)致下游基因野生型p53的表達(dá)降低,突變型p53出現(xiàn)高表達(dá),同時(shí)突變型p53的表達(dá)增高會(huì)抑制PUMA的表達(dá),使PUMA促凋亡功能受抑。這些都表明ATM-p53-PUMA調(diào)控途徑可能在大腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用;聯(lián)合檢測(cè)ATM、p53、PUMA可能對(duì)從分子水平了解大腸癌的發(fā)生發(fā)展提供新的思路。也對(duì)評(píng)估大腸癌患者的預(yù)后和選擇合理的治療手段有一定幫助。
【關(guān)鍵詞】：p53 ATM PUMA 大腸癌
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-9
• Abstarct9-14
• 前言14-16
• 1 對(duì)象與方法16-20
• 1.1 研究對(duì)象16-17
• 1.2 TNM 分期標(biāo)準(zhǔn)17-18
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器18
• 1.4 主要試劑18
• 1.5 免疫組化染色步驟18-19
• 1.6 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)19
• 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19-20
• 2 結(jié)果20-25
• 2.1 p53、ATM、PUMA在癌旁正常組織和大腸癌組織中的表達(dá)情況20-21
• 2.2 p53、ATM、PUMA與大腸癌臨床病理資料的關(guān)系分析21-24
• 2.3 大腸癌中p53、ATM、PUMA的相關(guān)性分析24-25
• 3 討論25-31
• 3.1 p53 在大腸癌的表達(dá)與意義26-27
• 3.2 ATM 在大腸癌的表達(dá)與意義27-29
• 3.3 PUMA 在大腸癌的表達(dá)與意義29-30
• 3.4 ATM、PUMA 與突變型 p53 的相關(guān)性及聯(lián)合檢測(cè)意義30-31
• 4 結(jié)論31-33
• 附圖33-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述：P53 及其上游基因ATM、下游基因PUMA在大腸癌中的研究進(jìn)展38-51
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 附錄51-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 翟榮林;王國(guó)斌;蔡開琳;;結(jié)直腸癌相關(guān)基因甲基化研究現(xiàn)狀和進(jìn)展[J];中華腫瘤防治雜志;2008年07期

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本文編號(hào)：568911