本文關(guān)鍵詞：辣椒素對(duì)人乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響以及機(jī)制的研究

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【摘要】：乳腺癌是女性中常見(jiàn)的腫瘤疾病,根據(jù)研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),我國(guó)每年有新增乳腺癌患者16.9萬(wàn)名。乳腺癌發(fā)現(xiàn)及時(shí),可以采取手術(shù)治療的方法,能夠有效的延長(zhǎng)患者的生命。但是有相當(dāng)數(shù)量的乳腺癌患者在確診時(shí),腫瘤細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生了轉(zhuǎn)移。目前對(duì)于癌癥轉(zhuǎn)移的治療效果不佳,很多腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者往往很快被癌癥奪走了生命。因此,關(guān)于抗腫瘤轉(zhuǎn)移的治療是一直以來(lái)都是研究的重點(diǎn)。辣椒素主要提取于紅辣椒,是辣椒辣味的主要來(lái)源。有關(guān)辣椒素的應(yīng)用十分廣泛,從日常調(diào)味品的辣椒到警察手中的辣椒噴霧。而在臨床方面,辣椒素被發(fā)現(xiàn)能夠?qū)ρ仔蕴弁吹扔芯徑庑Ч?因此作為鎮(zhèn)痛劑被廣泛應(yīng)用。目前很多研究發(fā)現(xiàn),辣椒素能夠抑制腫瘤的發(fā)展。在結(jié)腸癌、前列腺癌、乳腺癌等癌癥組織中都有實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)辣椒素能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡,抑制腫瘤的發(fā)展。但是辣椒素抗腫瘤的研究中,辣椒素能否對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力產(chǎn)生影響的研究相對(duì)較少。因此本實(shí)驗(yàn)從這個(gè)角度出發(fā),去探究辣椒素對(duì)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲能力的影響。首先,我們選擇高轉(zhuǎn)移性的乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)細(xì)胞創(chuàng)口愈合、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)等去探究辣椒素對(duì)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,辣椒素能夠明顯抑制乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移。那么辣椒素如何影響到乳腺癌細(xì)胞的呢?我們提出假設(shè)辣椒素通過(guò)辣椒素受體發(fā)揮抗腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。為了證明這個(gè)假設(shè),我們?cè)O(shè)計(jì)用Capsazepine阻斷辣椒素受體后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),辣椒素發(fā)揮抗腫瘤作用與辣椒素受體無(wú)關(guān),因?yàn)槔苯匪厥荏w被阻斷并不能逆轉(zhuǎn)辣椒素對(duì)乳腺癌細(xì)胞的影響。為了繼續(xù)探究辣椒素如何發(fā)揮作用,我們通過(guò)腫瘤轉(zhuǎn)移PCR的方法,發(fā)現(xiàn)辣椒素能夠調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá),辣椒素刺激后MTSS1、KISS1、BRMS1等抑癌基因的表達(dá)上調(diào),MMP9、MMP11等基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)下調(diào)。為了進(jìn)一步研究,我們通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法,研究轉(zhuǎn)錄因子AP-1的變化,AP-1是調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶等促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移、增殖重要轉(zhuǎn)錄因子,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明辣椒素刺激后轉(zhuǎn)錄因子AP-1的表達(dá)降低。因此,通過(guò)這些結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)辣椒素可能通過(guò)影響AP-1等轉(zhuǎn)錄因子活性,調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá),最終發(fā)揮抗腫瘤轉(zhuǎn)移侵襲的作用。
【關(guān)鍵詞】：辣椒素 乳腺癌 癌癥轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-9
• 文獻(xiàn)綜述9-17
• 1. 辣椒素9-10
• 2. 辣椒素與辣椒素受體10-11
• 3. 辣椒素與腫瘤11-14
• 4. 辣椒素抗腫瘤作用可能存在的機(jī)制14-17
• 前言17-19
• 第一章 辣椒素對(duì)乳腺癌細(xì)胞活力以及細(xì)胞周期的影響19-27
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與試劑19
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法19-22
• 2.1 人乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)19-20
• 2.2 MTT實(shí)驗(yàn)20
• 2.3 細(xì)胞周期分析實(shí)驗(yàn)20-22
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-26
• 3.1 辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響22-24
• 3.2 辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞周期的影響24-26
• 4. 本章小結(jié)26-27
• 第二章 辣椒素對(duì)人乳腺癌細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響27-35
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與試劑27
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法27-30
• 2.1 人乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)27
• 2.2 細(xì)胞創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)27-28
• 2.3 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)28-29
• 2.4 軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)29-30
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-34
• 3.1 辣椒素刺激對(duì)人乳腺癌細(xì)胞遷移能力的影響30-32
• 3.2 辣椒素刺激對(duì)人乳腺癌細(xì)胞侵襲能力的影響32-33
• 3.3 辣椒素刺激對(duì)人乳腺癌細(xì)胞非錨定生長(zhǎng)能力的影響33-34
• 4. 本章小結(jié)34-35
• 第三章 辣椒素受體的研究35-41
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與試劑35
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法35-36
• 2.1 人乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)35
• 2.2 TRPV1封閉實(shí)驗(yàn)35
• 2.3 MTT實(shí)驗(yàn)35-36
• 2.4 細(xì)胞創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)36
• 2.5 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)36
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-40
• 3.1 TRPV1被阻斷后，辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響36-37
• 3.2 TRPV1被阻斷后，辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移能力的影響37-39
• 3.3 TRPV1被阻斷后，辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲能力的影響39-40
• 4. 本章小結(jié)40-41
• 第四章 辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá)的影響41-45
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與試劑41
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法41-42
• 2.1 人乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)41
• 2.2 腫瘤轉(zhuǎn)移PCR Array41-42
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-43
• 4. 本章小結(jié)43-45
• 第五章 辣椒素刺激對(duì)乳腺癌細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子AP-1 的影響45-49
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與試劑45
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法45-47
• 2.1 人乳腺癌細(xì)胞株的培養(yǎng)45-46
• 2.2 cDNA的制備46
• 2.3 Real-Time PCR46-47
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-48
• 4. 本章小結(jié)48-49
• 討論49-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 附錄1 主要儀器設(shè)備58-59
• 附錄2 英文縮寫(xiě)詞59-60
• 致謝60

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本文編號(hào)：568089