本文關(guān)鍵詞：ΔNp73α基因轉(zhuǎn)染樹(shù)突狀細(xì)胞抗乳腺癌細(xì)胞的免疫效應(yīng)

  更多相關(guān)文章： ΔNp73α DC 淋巴細(xì)胞毒性T細(xì)胞 疫苗

【摘要】：目的研究ΔNp73α基因轉(zhuǎn)染樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)誘導(dǎo)的特異性抗乳腺癌免疫效應(yīng)。方法取健康人臍帶血細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子粒細(xì)胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、白細(xì)胞介素-4(rh IL-4)、腫瘤壞死因子(rh TNF-α)誘導(dǎo)培養(yǎng)DC,流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)DC成熟前后特異性抗原CD1a、CD83的表達(dá)變化情況。利用脂質(zhì)體lipofectamine2000將ΔNp73α轉(zhuǎn)染至DC,經(jīng)Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后蛋白表達(dá)情況。將轉(zhuǎn)染DC與自體T細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)。FCM檢測(cè)轉(zhuǎn)染DC與T細(xì)胞共培養(yǎng)前后的淋巴細(xì)胞亞群變化情況;ELISA法檢測(cè)活化T細(xì)胞分泌IFN-γ水平;乳酸脫氫酶法(LDH)檢測(cè)T細(xì)胞對(duì)乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的殺傷作用。使用SPSS17.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1、臍帶血來(lái)源的單核細(xì)胞(MNC)在細(xì)胞因子rh GM-CSF、rh IL-4、rh TNF-α誘導(dǎo)下,于第7天分化為成熟DC。2、成熟DC的特異性抗原CD1a表達(dá)約占58.78%,CD83約占76.61%,分別與未成熟DC的CD1a陽(yáng)性率20.34%及CD83陽(yáng)性率15.13%比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3、Western blot檢測(cè)到ΔNp73α轉(zhuǎn)染組有一條特異性條帶表達(dá)。4、T-DC組、T-DC-ΔNp73α組CD4+T淋巴細(xì)胞陽(yáng)性率分別為(29.12±0.61)%、(31.52±0.97)%,CD8+T淋巴細(xì)胞的陽(yáng)性率分別為(18.82±1.29)%、(45.71±0.74)%,都高于T淋巴細(xì)胞組CD4+T陽(yáng)性率(18.31±1.81)%及CD8+T陽(yáng)性率(18.59±2.18)%,并且T-DC組與T-DC-ΔNp73α組中CD4+占CD3+T細(xì)胞含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而CD8+占CD3+T細(xì)胞含量比較差異顯著(P0.01)。5、轉(zhuǎn)染ΔNp73α的DC與T細(xì)胞共培養(yǎng)誘導(dǎo)的特異性CTL對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231殺傷作用高于DC組(P0.05),分泌IFN-γ的水平升高,與pc DNA組及DC組比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論1、MNC經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)成功培養(yǎng)出成熟DC細(xì)胞。ΔNp73α轉(zhuǎn)入DC細(xì)胞并獲得表達(dá),說(shuō)明制備ΔNp73α-DC疫苗的可行性。2、以ΔNp73α轉(zhuǎn)染DC制備的DC疫苗,具有顯著誘導(dǎo)CTL殺傷乳腺癌細(xì)胞的作用,進(jìn)一步說(shuō)明制備ΔNp73α-DC疫苗的有效性。
【關(guān)鍵詞】：ΔNp73α DC 淋巴細(xì)胞毒性T細(xì)胞 疫苗
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語(yǔ)8-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-21
• 結(jié)果21-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 附錄33-45
• 一、文獻(xiàn)綜述33-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 二、在學(xué)期間科研成績(jī)42-43
• 三、致謝43-44
• 四、個(gè)人簡(jiǎn)介44-45

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