發(fā)布時間：2017-07-20 03:02

  本文關鍵詞：ΔNp73α基因轉染樹突狀細胞抗乳腺癌細胞的免疫效應

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【摘要】：目的研究ΔNp73α基因轉染樹突狀細胞(DC)誘導的特異性抗乳腺癌免疫效應。方法取健康人臍帶血細胞經(jīng)細胞因子粒細胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、白細胞介素-4(rh IL-4)、腫瘤壞死因子(rh TNF-α)誘導培養(yǎng)DC,流式細胞儀(FCM)檢測DC成熟前后特異性抗原CD1a、CD83的表達變化情況。利用脂質體lipofectamine2000將ΔNp73α轉染至DC,經(jīng)Western blot檢測轉染后蛋白表達情況。將轉染DC與自體T細胞共培養(yǎng)誘導特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)。FCM檢測轉染DC與T細胞共培養(yǎng)前后的淋巴細胞亞群變化情況;ELISA法檢測活化T細胞分泌IFN-γ水平;乳酸脫氫酶法(LDH)檢測T細胞對乳腺癌MDA-MB-231細胞的殺傷作用。使用SPSS17.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結果1、臍帶血來源的單核細胞(MNC)在細胞因子rh GM-CSF、rh IL-4、rh TNF-α誘導下,于第7天分化為成熟DC。2、成熟DC的特異性抗原CD1a表達約占58.78%,CD83約占76.61%,分別與未成熟DC的CD1a陽性率20.34%及CD83陽性率15.13%比較,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。3、Western blot檢測到ΔNp73α轉染組有一條特異性條帶表達。4、T-DC組、T-DC-ΔNp73α組CD4+T淋巴細胞陽性率分別為(29.12±0.61)%、(31.52±0.97)%,CD8+T淋巴細胞的陽性率分別為(18.82±1.29)%、(45.71±0.74)%,都高于T淋巴細胞組CD4+T陽性率(18.31±1.81)%及CD8+T陽性率(18.59±2.18)%,并且T-DC組與T-DC-ΔNp73α組中CD4+占CD3+T細胞含量比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),而CD8+占CD3+T細胞含量比較差異顯著(P0.01)。5、轉染ΔNp73α的DC與T細胞共培養(yǎng)誘導的特異性CTL對乳腺癌細胞MDA-MB-231殺傷作用高于DC組(P0.05),分泌IFN-γ的水平升高,與pc DNA組及DC組比較均有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論1、MNC經(jīng)細胞因子誘導成功培養(yǎng)出成熟DC細胞。ΔNp73α轉入DC細胞并獲得表達,說明制備ΔNp73α-DC疫苗的可行性。2、以ΔNp73α轉染DC制備的DC疫苗,具有顯著誘導CTL殺傷乳腺癌細胞的作用,進一步說明制備ΔNp73α-DC疫苗的有效性。
【關鍵詞】：ΔNp73α DC 淋巴細胞毒性T細胞 疫苗
【學位授予單位】：遼寧醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-8
• 英文縮略語8-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-21
• 結果21-25
• 討論25-28
• 結論28-29
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價29-30
• 參考文獻30-33
• 附錄33-45
• 一、文獻綜述33-42
• 參考文獻39-42
• 二、在學期間科研成績42-43
• 三、致謝43-44
• 四、個人簡介44-45

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