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臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)載Reovirus體外殺傷白血病細(xì)胞株的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-07-20 01:22

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【摘要】:目的:本研究模擬人體Reo3抗體存在時(shí),利用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)運(yùn)載呼腸孤病毒III型(Reo3)與白血病細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng),初步探討UC-MSCs運(yùn)載Reo3的可行性及UC-MSCs運(yùn)載Reo3對(duì)Jurkat細(xì)胞凋亡壞死的影響,為白血病及其他腫瘤的治療提供基礎(chǔ)研究依據(jù)。方法:1.UC-MSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定;2.UC-MSCs及Jurkat細(xì)胞表面JAM-A粘附分子的表達(dá);3.高滴度Reo3感染UC-MSCs細(xì)胞內(nèi)部情況的觀察;4.Reo3感染UC-MSCs后,UC-MSCs的相對(duì)增殖情況;5.Reo3感染UC-MSCs后,細(xì)胞裂解液中的Reo3滴度測(cè)定;6.體外共培養(yǎng)體系的建立及體系中Jurkat細(xì)胞凋亡壞死情況分析。結(jié)果:1.利用機(jī)械法從臍帶華通氏膠中分離培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)胞,經(jīng)形態(tài)學(xué)及細(xì)胞表面抗原檢測(cè)鑒定,均符合UC-MSCs的生物學(xué)特性;2.UC-MSCs和Jurkat細(xì)胞表面JAM-A粘附分子表達(dá)量分別為50.7%、41.3%;3.利用高滴度Reo3感染UC-MSCs 72小時(shí)后,可見(jiàn)UC-MSCs細(xì)胞內(nèi)部大量病毒包涵體出現(xiàn),而未感染Reo3的UC-MSCs細(xì)胞內(nèi)部未見(jiàn)病毒包涵體出現(xiàn);4.相比no Reo3組,MOI 1、MOI 2及MOI 3組在24小時(shí)至120小時(shí)內(nèi)UC-MSCs的相對(duì)增殖率均呈現(xiàn)出上升及下降趨勢(shì),且均在72小時(shí)達(dá)到高峰。在120小時(shí)時(shí),與no Reo3組相比,僅MOI 1組其相對(duì)增殖率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒(méi)有顯著性差異,故感染UC-MSCs的最佳Reo3滴度選擇MOI 1;5.48小時(shí)時(shí)UC-MSCs細(xì)胞裂解液中Reo3滴度最高,故感染UC-MSCs的最佳時(shí)間點(diǎn)選擇48小時(shí);6.成功地利用以上條件建立共培養(yǎng)體系24小時(shí)時(shí),發(fā)現(xiàn)Reo3抗體存在時(shí),UC-MSCs仍能運(yùn)載Reo3致Jurkat細(xì)胞凋亡壞死。結(jié)論:1.從臍帶華通氏膠中分離培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)胞經(jīng)形態(tài)學(xué)及細(xì)胞表面分子標(biāo)記物的檢測(cè)鑒定,符合UC-MSCs的生物學(xué)要求;2.UC-MSCs作為Reo3細(xì)胞載體具有可行性;3.在抗體存在的情況下,UC-MSCs運(yùn)載Reo3可以導(dǎo)致Jurkat細(xì)胞凋亡、壞死;4.Reo3作為腫瘤治療新藥有一定的理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:間充質(zhì)干細(xì)胞 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 溶瘤病毒 呼腸孤病毒Ⅲ型 白血病 Jurkat細(xì)胞 凋亡 壞死
【學(xué)位授予單位】:貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R733.7
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • 英文摘要5-8
  • 略縮詞表8-9
  • 引言9-10
  • 材料與方法10-20
  • 結(jié)果20-29
  • 討論29-36
  • 結(jié)論36-38
  • 參考文獻(xiàn)38-44
  • 綜述44-52
  • 參考文獻(xiàn)49-52
  • 作者簡(jiǎn)歷52-53
  • 致謝53-54
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集54

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本文編號(hào):565711

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