本文關(guān)鍵詞：低氧與二甲雙胍對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

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【摘要】：目的:觀察低氧與二甲雙胍對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞(SACC)生物學(xué)行為的影響并探討其作用機(jī)制,為臨床腫瘤的防治提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.SACC-83細(xì)胞在常氧(21%O2)和低氧(15%、10%、5%和1%O2)環(huán)境中培養(yǎng)8、24和48 h,CCK法檢測(cè)細(xì)胞增殖;加入0、5、10、20和40 m M二甲雙胍,分別在常氧和5%氧環(huán)境中培養(yǎng)48 h,同法比較細(xì)胞增殖能力的變化。2.加入0、20和40 m M二甲雙胍,分別在常氧和5%氧環(huán)境中培養(yǎng)48 h,采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室方法,比較觀察SACC-83細(xì)胞遷移、侵襲能力的變化。3.與以上相同的實(shí)驗(yàn)條件下,運(yùn)用western blot、real-time PCR方法,比較觀察SACC-83細(xì)胞HIF-1α、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白及m RNA表達(dá)水平的變化。結(jié)果:1.SACC-83細(xì)胞的增殖能力隨氧濃度降低而減弱,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而減弱,隨二甲雙胍濃度增加而降低;低氧環(huán)境中20、40 m M二甲雙胍組的細(xì)胞增殖均明顯高于常氧(P0.05)各組。提示二甲雙胍的增殖抑制效應(yīng)在低氧環(huán)境下減弱。2.與常氧相比,SACC-83細(xì)胞在單純低氧環(huán)境下的遷移能力減弱,而侵襲能力增高;相同氧環(huán)境中,細(xì)胞的遷移、侵襲能力隨二甲雙胍濃度增加而減弱(P0.01,P0.05,vs 0 m M);常氧環(huán)境中僅20 m M二甲雙胍即可明顯抑制細(xì)胞遷移、侵襲能力,而低氧環(huán)境中需40 m M二甲雙胍才能抑制細(xì)胞遷移、侵襲能力(P0.01,vs 0 m M)。提示二甲雙胍的抗遷移、侵襲作用在低氧環(huán)境下減弱。3.SACC-83細(xì)胞中HIF-1α、VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白及m RNA表達(dá)均隨二甲雙胍濃度的增加而降低(P0.01,vs 0 m M),但低氧各組的表達(dá)水平均明顯高于常氧各組(P0.05),表明低氧可上調(diào)HIF-1α、VEGF、MMP-2和MMP-9的表達(dá)。結(jié)論:低氧可拮抗二甲雙胍的抑瘤效應(yīng),增強(qiáng)SACC-83細(xì)胞的侵襲能力,其作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控HIF-1α、VEGF、MMP-2和MMP-9的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：低氧 二甲雙胍 涎腺腺樣囊性癌
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.87
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-13
• 1.1 微環(huán)境缺氧促進(jìn)腫瘤增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移10-11
• 1.2 二甲雙胍抑制腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展11-12
• 1.3 本課題的意義與設(shè)想12-13
• 第2章 材料與方法13-31
• 2.1 材料13-19
• 2.1.1 細(xì)胞株13
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑13-15
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制方法16-19
• 2.2 研究方法及內(nèi)容19-31
• 2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇19
• 2.2.2 細(xì)胞傳代培養(yǎng)19-20
• 2.2.3 細(xì)胞凍存20
• 2.2.4 細(xì)胞接種20-21
• 2.2.5 培養(yǎng)箱低氧環(huán)境控制措施21
• 2.2.6 低氧環(huán)境對(duì) SACC-83 細(xì)胞增殖能力的影響21-22
• 2.2.7 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì) SACC-83 細(xì)胞增殖能力的影響22
• 2.2.8 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) SACC-83 細(xì)胞的遷移能力22-23
• 2.2.9 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SACC-83 細(xì)胞的侵襲能力23
• 2.2.10 細(xì)胞蛋白提取、濃度測(cè)定與保存23-25
• 2.2.11 Western blot檢測(cè)SACC-83 細(xì)胞株中HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP25-27
• 2.2.12 Real-time PCR檢測(cè)SACC-83 細(xì)胞株中HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9的m RNA表達(dá)27-30
• 2.2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析30-31
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-45
• 3.1 不同氧環(huán)境對(duì)SACC-83 細(xì)胞增殖能力的影響31-32
• 3.2 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞增殖能力的影響32-33
• 3.3 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞遷移能力的影響33-34
• 3.4 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞侵襲能力的影響34-35
• 3.5 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9蛋白表達(dá)水平的影響35-39
• 3.6 低氧環(huán)境中二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9m RNA表達(dá)水平的影響39-45
• 3.6.1 RNA純度鑒定39
• 3.6.2 RNA完整性鑒定39-40
• 3.6.3 Real-time PCR測(cè)定GAPDH、HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9m RNA的溶解曲線40-41
• 3.6.4 Real-time PCR測(cè)定GAPDH、HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9m RNA的擴(kuò)增曲線41
• 3.6.5 Real-time PCR測(cè)定HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9 m RNA的表達(dá)水平41-45
• 第4章 討論45-49
• 4.1 低氧與二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞增殖的影響45
• 4.2 低氧與二甲雙胍對(duì)SACC-83 細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響45-46
• 4.3 低氧與二甲雙胍對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為影響的可能機(jī)制46-49
• 第5章 結(jié)論49-50
• 致謝50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果55-56
• 綜述56-67
• 參考文獻(xiàn)62-67

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1 成杰;蔡明江;賈永莉;尹照華;;二甲雙胍的應(yīng)用現(xiàn)狀調(diào)查[J];實(shí)用糖尿病雜志;2005年06期

2 潘明政;;二甲雙胍傷腎嗎[J];醫(yī)藥與保健;2008年11期

3 衡先培;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用[J];中國(guó)鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2006年02期

4 H.Mehnert,邵丙揚(yáng);二甲雙胍在糖尿病治療中的地位[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;1999年02期

5 王煜;;二甲雙胍的臨床應(yīng)用療效評(píng)析[J];藥品評(píng)價(jià);2012年10期

6 伍曉玲,梁常禧,羅碧云;諾和靈與甲雙胍強(qiáng)化治療2型糖尿病22例效果觀察及護(hù)理[J];右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年04期

7 陳凌;二甲雙胍的臨床應(yīng)用體會(huì)[J];山東醫(yī)藥;1994年06期

8 趙紅玲;張雪坤;;二甲雙胍的降糖外作用研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐;2011年16期

9 ;古老的藥物 嶄新的應(yīng)用[J];科技傳播;2011年17期

10 鄭媛媛;;甲雙胍通過(guò)改變微生物葉酸和甲硫氨酸的代謝延緩秀麗隱桿線蟲(chóng)的衰老[J];中國(guó)病理生理雜志;2013年10期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 侯沃霖;張丹丹;劉芳;陸蔚;殷峻;李鳴;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;二甲雙胍可降低女性2型糖尿病患者的血清CA125水平[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

2 朱云云;馮怡;沈嵐;王彬;阮克峰;從文娟;;二甲雙胍預(yù)防2型糖尿病的尿液代謝組學(xué)研究[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

3 安慧杰;魏蕊;楊進(jìn);王廣;洪天配;;二甲雙胍促進(jìn)血管內(nèi)皮一氧化氮合酶復(fù)偶聯(lián)的作用及其機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

4 杜云波;趙英萍;;二甲雙胍致糖尿病乳酸性酸中毒12例的臨床分析[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)危重病醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第八屆全國(guó)大會(huì)暨中華呼吸病學(xué)會(huì)呼吸生理和重癥監(jiān)護(hù)學(xué)組年會(huì)論文集[C];2008年

5 郭力;李顯筑;王梅;;二甲雙胍對(duì)糖尿病患者心血管危險(xiǎn)因素的影響及其機(jī)理探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

6 張丹丹;劉芳;唐峻嶺;鄭泰山;陸慧娟;謝君;盧逢娣;包玉倩;賈偉平;;2型糖尿病患者血清CA199水平的性別差異及二甲雙胍對(duì)其影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對(duì)葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];2013年（第三屆）中國(guó)藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

8 吳加華;周嘉強(qiáng);;二甲雙胍對(duì)葡萄糖-6-磷酸酶基因表達(dá)的抑制作用及其機(jī)制[A];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

9 王述進(jìn);;二甲雙胍對(duì)2型糖尿病患者血清c反應(yīng)蛋白水平的影響[A];全國(guó)首屆代謝綜合征的基礎(chǔ)與臨床專題學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 安慧杰;劉金波;柯靜;王廣;洪天配;;二甲雙胍逆轉(zhuǎn)波動(dòng)性高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)的機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 秦家珍;服二甲雙胍監(jiān)測(cè)腎功能[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

2 健康時(shí)報(bào)實(shí)習(xí)記者 井超;緩釋降糖藥別掰開(kāi)吃[N];健康時(shí)報(bào);2009年

3 錢榮立;二甲雙胍不是減肥藥[N];健康報(bào);2003年

4 王欣;二甲雙胍的臨床新用[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

5 彥珉;二甲雙胍的“后現(xiàn)代生活”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

6 徐述湘;50年應(yīng)用 二甲雙胍成為降糖經(jīng)典藥物[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

7 章潮忠 袁克儉;“老當(dāng)益壯”的二甲雙胍[N];健康報(bào);2006年

8 韓詠霞;五種情況慎用二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

9 裘影萍;特殊人群慎服二甲雙胍[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

10 健康時(shí)報(bào)記者 戴志悅;服二甲雙胍別喝酸奶[N];健康時(shí)報(bào);2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 姚新明;二甲雙胍對(duì)糖尿病腎臟疾病的保護(hù)作用及機(jī)制探討[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

2 許國(guó)順;二甲雙胍對(duì)造血免疫系統(tǒng)輻射損傷防護(hù)作用及分子機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 汪莉;二甲雙胍對(duì)奧氮平致精神分裂癥體重增加者肝臟脂肪含量的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 劉瑛;二甲雙胍通過(guò)mTOR信號(hào)通路對(duì)Hacat角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的影響[D];山東大學(xué);2015年

5 趙彬;二甲雙胍調(diào)節(jié)腦膠質(zhì)瘤周圍腦水腫的機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

6 韋德華;p53、線粒體基因多態(tài)性與二甲雙胍輔助卵巢癌化療增敏關(guān)系研究[D];鄭州大學(xué);2016年

7 張艷飛;二甲雙胍對(duì)2型糖尿病合并結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及其機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

8 張濤;二甲雙胍對(duì)膀胱癌的抑制作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

9 李偉寧;二甲雙胍對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖信號(hào)通路及豚鼠耳銀屑病模型影響研究[D];山東大學(xué);2014年

10 黃為;二甲雙胍對(duì)膽管癌細(xì)胞株RBE的作用及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 許斌斌;二甲雙胍、塞來(lái)昔布對(duì)小鼠結(jié)直腸腫瘤預(yù)防作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王槐文;二甲雙胍聯(lián)合放療誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉佳;二甲雙胍對(duì)糖尿病大鼠的骨保護(hù)作用與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)系[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王靜璐;二甲雙胍通過(guò)調(diào)節(jié)EGFR信號(hào)通路抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

5 史明星;二甲雙胍對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系脂聯(lián)素表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

6 彭錚;二甲雙胍通過(guò)p38MAPK信號(hào)通路抑制ERCC1基因逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞的順鉑耐藥性[D];鄭州大學(xué);2015年

7 王濤;二甲雙胍對(duì)人食管癌細(xì)胞系KYSE450增殖和凋亡的影響及其機(jī)制[D];鄭州大學(xué);2015年

8 馬彥榮;基于Octs和Mate1分別探究阿替洛爾和美托洛爾對(duì)大鼠二甲雙胍藥動(dòng)學(xué)的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

9 孟祥麗;二甲雙胍增加食管鱗癌對(duì)順鉑化療敏感性的機(jī)制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

10 丁躍;二甲雙胍對(duì)人網(wǎng)膜脂肪細(xì)胞中v-SNAREs家族表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

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