本文關(guān)鍵詞：肌醇六磷酸對裸鼠皮下SKOV3細(xì)胞移植瘤的抑制作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究肌醇六磷酸(inositol hexaphosphoric acid,IP6)對裸鼠皮下SKOV3細(xì)胞移植瘤的生長、增殖抑制作用及其可能的機(jī)制。方法:1 細(xì)胞培養(yǎng):將SKOV3細(xì)胞系置于含10%新生牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中,在37℃、5%CO_2的飽和濕度培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。2 裸鼠皮下SKOV3細(xì)胞移植瘤模型的建立與實(shí)驗(yàn)分組:將對數(shù)生長期的SKOV3細(xì)胞接種于裸鼠的背側(cè)近前肢處的皮下,于種瘤第5天選擇生長出移植瘤且直徑在3~5mm的裸鼠入組實(shí)驗(yàn),裸鼠隨機(jī)分為對照組、IP6低劑量組、IP6高劑量組、順鉑組及IP6低劑量+順鉑聯(lián)合組,每組6只裸鼠。3 實(shí)驗(yàn)藥物的制備:IP6和肌醇的混合物溶于0.9%氯化鈉注射液中,配成含IP6為3mg/ml、6mg/ml的溶液;順鉑溶于0.9%氯化鈉注射液中,配成0.3mg/ml的溶液,均現(xiàn)配現(xiàn)用。4 給藥方法:對照組按0.1ml/g 0.9%氯化鈉注射液每天灌胃一次,連續(xù)灌胃28天,前7天同時腹腔注射相同體積0.9%氯化鈉注射液。IP6低劑量組按每天含IP6為300mg/kg灌胃一次,連續(xù)灌胃28天。IP6高劑量組按每天含IP6為600mg/kg灌胃一次,連續(xù)灌胃28天。順鉑組以每天3mg/kg腹腔注射一次,連續(xù)注射7天。聯(lián)合組按每天含IP6為300mg/kg灌胃一次,連續(xù)灌胃28天,前7天同時腹腔注射3mg/kg順鉑溶液。5 裸鼠一般情況、移植瘤體積、重量及抑瘤率:每天觀察裸鼠精神、飲食、活動及二便情況。用藥第1、7、14、21、28天測量裸鼠體重和移植瘤的最長直徑(a)和最短直徑(b),按公式V(mm~3)=ab~2/2計算移植瘤體積。停藥24小時終止觀察,處死裸鼠,剝?nèi)×鼋M織并稱重。按公式抑瘤率IR(%)=(對照組瘤重量-實(shí)驗(yàn)組瘤重量)/對照組瘤重量×100%計算抑瘤率。6 免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織中cyclinD1蛋白的表達(dá)。7 Real Time-PCR法檢測腫瘤組織中miRNA let-7的表達(dá)。8 統(tǒng)計學(xué)方法:采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理及分析,計量資料用x±s描述,資料滿足正態(tài)分布且方差齊性時,采用單因素方差分析,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義時,均數(shù)間的兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。不滿足正態(tài)分布或/和方差齊性的計量資料采用秩轉(zhuǎn)換的Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1 給藥過程順利,用藥兩周后部分裸鼠出現(xiàn)精神萎靡,行動遲緩,飲食量下降,大便雖成型但濕潤度增加的情況,含IP6實(shí)驗(yàn)組較順鉑組裸鼠的一般狀況好。隨著周齡及用藥時間的增加,各組裸鼠重量較前增加,用藥結(jié)束24h后測量各組裸鼠重量,用x±s表示:對照組22.27±2.34g,低劑量組22.42±1.73g,高劑量組22.36±1.67g,順鉑組20.15±0.66g,聯(lián)合組22.00±1.47g,各組裸鼠移植瘤的重量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。用藥期間,每周測量各組裸鼠移植瘤體積,各組裸鼠移植瘤體積較前增長,用藥結(jié)束24h后的移植瘤體積:聯(lián)合組順鉑組高劑量組低劑量組對照組,各組移植瘤體積差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。用藥結(jié)束24h后測量各組裸鼠移植瘤重量,用x±s表示:對照組3.38±0.017g,低劑量組3.11±0.018g,高劑量組2.83±0.017g,順鉑組2.80±0.040g,聯(lián)合組2.63±0.033g,各組裸鼠移植瘤的重量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。抑瘤率:聯(lián)合組順鉑組高劑量組低劑量組。2 裸鼠移植瘤組織中cyclinD1蛋白的表達(dá)情況:所有分組中均有cyclinD1蛋白的表達(dá),在對照組中高表達(dá),實(shí)驗(yàn)組中低表達(dá),表達(dá)量的排列順序?yàn)槁?lián)合組順鉑組高劑量組低劑量組對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3 裸鼠移植瘤組織中miRNA let-7的表達(dá)情況:所有分組中均有miRNA let-7表達(dá),在對照組中低表達(dá),實(shí)驗(yàn)組中高表達(dá),表達(dá)量的排列順序?yàn)槁?lián)合組順鉑組高劑量組低劑量組對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組可以抑制移植瘤的生長。同時發(fā)現(xiàn),與單用順鉑相比,IP6與順鉑聯(lián)用可以更有效地抑制移植瘤生長,同時降低順鉑引起的副反應(yīng)。2 IP6可能通過抑制cyclinD1蛋白表達(dá),阻止腫瘤細(xì)胞周期中的G1/S期轉(zhuǎn)換,抑制腫瘤細(xì)胞增殖從而發(fā)揮抗腫瘤作用。3 IP6可能通過增加miRNA let-7含量而發(fā)揮抑制腫瘤的作用。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 SKOV3細(xì)胞系 IP6 cyclinD1蛋白 miRNA let-7
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-24
• 附表24-29
• 討論29-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述 肌醇六磷酸對多種腫瘤抑制作用的研究進(jìn)展37-47
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 致謝47-48
• 個人簡歷48

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王志敏;許天敏;崔松花;崔滿華;;CyclinD1表達(dá)與中國婦女子宮內(nèi)膜癌關(guān)系的Meta分析[J];中國婦幼保健;2015年13期

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本文編號：548861