本文關(guān)鍵詞：膀胱癌BIU-87細(xì)胞株導(dǎo)向肽NYZL1靶向特異性的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:通過(guò)體內(nèi)、外檢測(cè)技術(shù)驗(yàn)證腫瘤導(dǎo)向肽NYZL1與膀胱癌BIU-87細(xì)胞及其移植瘤結(jié)合的靶向特異性,為膀胱癌的分子靶向診療奠定理論基礎(chǔ)。方法:首先采用多肽固相合成法合成導(dǎo)向肽NYZL1及其陰性對(duì)照肽sv NYZL1,用異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)修飾,制備實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組熒光分子探針;然后向膀胱癌BIU-87細(xì)胞懸液中分別加入兩種探針?lè)跤?流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度值,明確探針與細(xì)胞的親和作用;再將膀胱癌BIU-87細(xì)胞爬片,分別加入兩種探針?lè)跤?激光共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察探針與細(xì)胞結(jié)合的熒光圖像,明確其親和作用特異性;最后選取16只SPF級(jí)BALB/c-nu雄性裸鼠。3~4周齡。體質(zhì)量15~18g。成功構(gòu)建膀胱癌BIU-87細(xì)胞荷瘤裸鼠模型。采用完全隨機(jī)分組法分為2組,每組8只,尾靜脈分別注入兩種探針,4 h后,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各取5只荷瘤裸鼠,完整剖取腫瘤組織、心、肝、脾、肺、腎、膀胱和膽囊,光學(xué)分子成像系統(tǒng)觀察腫瘤及各組織的熒光圖像;24 h后,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各取3只荷瘤裸鼠,完整剖取腫瘤組織、心、肝、脾、肺、腎和膀胱,制作冰凍切片,LSCM觀察腫瘤及各組織的熒光圖像。結(jié)果:1、成功合成實(shí)驗(yàn)組探針FITC-氨基己酸-CSSPIGRHC(FITC-NYZL1),對(duì)照組探針FITC-氨基己酸-CRIGSPHSC(FITC-sv NYZL1)。2、體外研究發(fā)現(xiàn),FCM檢測(cè)體外實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組探針標(biāo)記BIU-87細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度值分別為50.34±3.63和17.72±1.57,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。LSCM觀察實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞可見(jiàn)明顯的綠色熒光圖像,而對(duì)照組細(xì)胞未見(jiàn)明顯的綠色熒光圖像。兩組細(xì)胞FITC的平均熒光強(qiáng)度值分別為864.41±188.47和53.57±17.50,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn),光學(xué)分子成像系統(tǒng)觀察下,腫瘤組織、膽囊及膀胱可見(jiàn)明顯熒光;其余器官如心、肝、脾、肺和腎等未見(jiàn)明顯熒光。LSCM觀察下,實(shí)驗(yàn)組的腫瘤組織中可見(jiàn)明顯綠色熒光,而實(shí)驗(yàn)組其他器官(心、肝、脾、肺、腎和膀胱)和對(duì)照組腫瘤組織和其他器官中未見(jiàn)綠色熒光。結(jié)論:膀胱腫瘤導(dǎo)向肽NYZL1能夠與膀胱癌BIU-87細(xì)胞及其移植瘤靶向特異性結(jié)合,并可攜帶熒光素標(biāo)記腫瘤組織。腫瘤導(dǎo)向肽NYZL1可能成為膀胱癌分子靶向診斷的重要載體,為膀胱癌的分子靶向診療奠定了一定理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 腫瘤導(dǎo)向肽 光學(xué)分子影像 靶向性
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對(duì)照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-18
• 1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器12-14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-18
• 2 結(jié)果18-25
• 2.1 細(xì)胞體外培養(yǎng)18
• 2.2 裸鼠膀胱癌移植瘤模型的建立18-19
• 2.3 熒光分子探針FITC-NYZL1 和FITC-svNYZL1 的制備合成19-20
• 2.4 FCM檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度值20-21
• 2.5 LSCM觀察熒光分子探針與細(xì)胞的結(jié)合并檢測(cè)FITC的平均熒光強(qiáng)度值21-22
• 2.6 光學(xué)分子成像系統(tǒng)觀察探針在體內(nèi)器官的分布情況22-23
• 2.7 LSCM觀察探針在組織中的分布情況23-25
• 3 討論25-27
• 4 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 綜述30-41
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 致謝41-42
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果42-43
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷43

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 王磊;王玨;范晉海;;新型膀胱腫瘤光學(xué)診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2013年02期

2 梁朝朝;周駿;;3D腹腔鏡技術(shù)在泌尿外科的初步應(yīng)用[J];中華腔鏡泌尿外科雜志(電子版);2013年06期

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本文編號(hào)：535939