本文關(guān)鍵詞：胃癌細(xì)胞EMT標(biāo)志物表達(dá)與其侵襲VM形成及化療敏感性的體外研究

  更多相關(guān)文章： 上皮間質(zhì)化 血管生成擬態(tài) 三維培養(yǎng) 遷移

【摘要】：目的:本實驗第一部分通過劃痕、Transwell初步了解三株胃癌細(xì)胞系MGC803、BGC823、SGC7901的遷移侵襲力,基于此探討驗證EMT、VM與胃癌侵襲力的關(guān)系及二者之間是否存在關(guān)聯(lián)性;第二部分探討驗證EMT、VM與胃癌化療敏感性的關(guān)聯(lián)。方法:1、劃出指定區(qū)域,12h后觀察三組胃癌細(xì)胞遷入指定區(qū)域的數(shù)量,了解三組胃癌細(xì)胞的遷移力差異性。2、取濃度為2×105/ml各細(xì)胞懸液30ul加入transwell上室孔,40h通過DAPI染色計數(shù)透膜細(xì)胞數(shù),了解三組胃癌細(xì)胞的侵襲力差異性。3、Western-blot檢測MGC803、BGC823、SGC7901的EMT標(biāo)志物(E-cadherin、Vimentin)表達(dá)差異,據(jù)此評估三組胃癌細(xì)胞EMT差異性。4、將濃度為5×105/ml各細(xì)胞懸液1ml接種于300ul Matrigel膠行三維培養(yǎng),12h觀察有無VM管道形成,后隨機選取5個顯微鏡視野計算VM個數(shù),了解三組胃癌細(xì)胞VM形成有無差異性,綜合本實驗結(jié)果及上述劃痕、Transwell、Western-blot實驗結(jié)果,探討驗證EMT、VM與胃癌侵襲力關(guān)系及二者之間有無關(guān)聯(lián)性。5、取1000個各胃癌細(xì)胞,用1ug/ml、5ug/ml、10ug/ml多西他賽體外處理24h,經(jīng)CCK-8方法測定OD,了解各胃癌細(xì)胞系化療差異性,以期探討EMT、VM與胃癌抗化療關(guān)聯(lián)性。結(jié)果:1、劃痕實驗示MGC803、BGC823、SGC7901遷移力依次下降。2、三組胃癌細(xì)胞透膜個數(shù)依次為:MGC803(72.25±2.75),BGC823(44.25±2.50),SGC7901(22.50±2.08),兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),即MGC803、BGC823、SGC7901侵襲力依次下降。3、MGC803:E-cadherin無表達(dá),Vimentin表達(dá)最高;SGC7901:E-cadherin表達(dá)最高,Vimentin表達(dá)最低。MCG803、BGC823、SGC7901的EMT程度依次降低。4、MGC803、BGC823、SGC7901均能形成VM管道,且三組胃癌細(xì)胞VM管道數(shù)依次為:MGC803(114.20±8.67)、BGC823(102.40±8.41)、SGC7901(91.00±6.82),兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),即MGC803、BGC823、SGC7901的VM形成力依次下降。5、多西他賽體外處理24h后各胃癌細(xì)胞的OD值依次為MGC803:1ug/ml(0.714±0.005)、5ug/ml(0.464±0.008)、10ug/ml(0.352±0.009);BGC823:1ug/ml(0.652±0.009)、5ug/ml(0.432±0.007)、10ug/ml(0.326±0.003);SGC7901:1ug/ml(0.503±0.010)、5ug/ml(0.312±0.005)、10ug/ml(0.226±0.003)。各胃癌細(xì)胞組內(nèi)OD值與多西他賽量呈量-效關(guān)系;同一濃度化療下MGC803、BGC823、SGC7901敏感性依次升高,各胃癌細(xì)胞間化療敏感差異性具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、MGC803、BGC823、SGC7901的遷移侵襲依次下降,EMT、VM與胃瘤的侵襲成正相關(guān)性,且EMT程度高的胃癌細(xì)胞易于形成VM。2、EMT的發(fā)生、VM的形成弱化了胃癌的化療敏感性。
【關(guān)鍵詞】：上皮間質(zhì)化 血管生成擬態(tài) 三維培養(yǎng) 遷移
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 流程圖13-14
• 一、胃癌細(xì)胞系EMT標(biāo)志物與其侵襲、VM形成體外研究14-42
• 1.1 對象和方法14-27
• 1.1.1 研究對象14
• 1.1.2 主要儀器設(shè)備14-15
• 1.1.3 主要試劑15-16
• 1.1.4 主要試劑溶液的配制16-18
• 1.1.5 實驗方法18-26
• 1.1.6 結(jié)果判斷26-27
• 1.1.7 統(tǒng)計學(xué)分析27
• 1.2 結(jié)果27-37
• 1.2.1 MGC803、BGC8、SGC7901細(xì)胞形態(tài)27-28
• 1.2.2 MGC803、BGC823、SGC7901劃痕遷入結(jié)果28-29
• 1.2.3 MGC803、BGC823、SGC7901 Transwell實驗結(jié)果29-31
• 1.2.4 MGC803、BGC823、SGC790所需上樣量31-32
• 1.2.5 Western-blot檢測MGC803、BGC823、SGC7901三胃癌細(xì)胞E-cadherin、Vimentin蛋白表達(dá)水平32
• 1.2.6 MGC803、BGC823、SGC7901三維培養(yǎng)結(jié)果32-37
• 1.3 討論37-40
• 1.4 小結(jié)40-42
• 二、三組胃癌細(xì)胞系對多西他賽化療差異性42-48
• 2.1 對象和方法42-44
• 2.1.1 研究對象42
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備42
• 2.1.3 主要試劑42-43
• 2.1.4 主要的試劑溶液的配制43
• 2.1.5 實驗方法43-44
• 2.1.6 統(tǒng)計學(xué)分析44
• 2.2 結(jié)果44-46
• 2.2.1 CCK-8 測定 10ug/ml、5ug/ml、1ug/ml多西他賽（DOC）對MGC803、BGC823、SGC7901體外處理后OD值44-46
• 2.3 討論46-47
• 2.4 小結(jié)47-48
• 結(jié)論48-50
• 參考文獻50-55
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明55-56
• 綜述 上皮間質(zhì)化、血管生成擬態(tài)與腫瘤的研究進展56-75
• 綜述參考文獻66-75
• 致謝75-76
• 個人簡歷76

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本文編號：535663