發(fā)布時(shí)間：2017-07-08 13:01

  本文關(guān)鍵詞：四氫吲唑酮取代的苯甲酰胺化合物W-H4體外抗急性髓性白血病作用及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 苯甲酰胺化合物 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期 細(xì)胞自噬

【摘要】：四氫吲唑酮取代的苯甲酰胺化合物SNX-2112是Hsp90抑制劑。為了提高其抗腫瘤的活性,前期我們合成了一系列四氫吲唑酮取代的苯甲酰胺化合物,然后通過(guò)一系列腫瘤細(xì)胞模型篩選出具有較好體外抗腫瘤活性的化合物W-H4。我們研究了苯甲酰胺化合物W-H4體外抗急性髓性白血病的作用及其機(jī)制,為W-H4治療急性髓性白血病提供了理論依據(jù)。首先我們通過(guò)一系列腫瘤細(xì)胞模型篩選出具有良好抗腫瘤作用的化合物W-H4;然后選取兩株急性髓性白血病細(xì)胞HL60和KG-1a作為研究對(duì)象,通過(guò)CCK8的方法檢測(cè)了W-H4對(duì)兩株細(xì)胞的IC50值;通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了W-H4引起HL60和KG-1a細(xì)胞凋亡以及周期阻滯的情況;通過(guò)JC-1探針檢測(cè)了W-H4引起的HL60和KG-1a細(xì)胞線粒體膜電位的變化;通過(guò)Westen Blot檢測(cè)了W-H4對(duì)凋亡相關(guān)蛋白、周期相關(guān)蛋白、Hsp90客戶蛋白以及自噬相關(guān)通路的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)W-H4能夠明顯地抑制急性髓性白血病細(xì)胞的增殖,W-H4作用HL60和KG-1a兩株細(xì)胞48h的IC50值分別為0.48μM和0.38μM,并且能夠呈濃度依賴性地抑制HL60和KG-1a兩株細(xì)胞的生長(zhǎng);W-H4能夠下調(diào)HL60和KG-1a細(xì)胞中Hsp90客戶蛋白的表達(dá)水平;W-H4能濃度依賴性地誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并且引起Caspase3、8、9以及PARP的切割活化;W-H4能使HL60和KG-1a細(xì)胞線粒體膜電位下降,并使抗凋亡蛋白bcl-2的表達(dá)水平降低;W-H4能將兩株細(xì)胞阻滯在G1期,影響細(xì)胞中相關(guān)周期蛋白的表達(dá)水平;并且W-H4還能誘導(dǎo)兩株細(xì)胞發(fā)生自噬,并且抑制AKT/mTOR信號(hào)通路。綜上所述,W-H4能抑制急性髓性白血病細(xì)胞的增殖,通過(guò)多種途徑誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,在體外表現(xiàn)出很強(qiáng)的抗急性髓性白血病活性。
【關(guān)鍵詞】：苯甲酰胺化合物 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期 細(xì)胞自噬
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R733.71
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-5
• 縮寫(xiě)詞及中英文對(duì)照5-8
• 第一章 緒論8-16
• 1.1 急性髓性白血病研究進(jìn)展概述8-9
• 1.2 熱休克蛋白 909-15
• 1.2.1 Hsp90概述9
• 1.2.2 Hsp90的分類及結(jié)構(gòu)9-10
• 1.2.3 Hsp90的生物學(xué)功能10-11
• 1.2.4 Hsp90與腫瘤的關(guān)系11-12
• 1.2.5 Hsp90抑制劑的研究進(jìn)展12-15
• 1.3 本論文的研究意義15-16
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備16-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料16-19
• 2.2 細(xì)胞株來(lái)源19
• 2.3 常用試劑配制19-22
• 2.3.1 細(xì)胞體外培養(yǎng)相關(guān)試劑19-20
• 2.3.2 苯甲酰胺化合物母液20
• 2.3.3 Western blot相關(guān)試劑20-22
• 2.4 儀器設(shè)備22-24
• 第三章 實(shí)驗(yàn)方法與步驟24-29
• 3.1 細(xì)胞培養(yǎng)24
• 3.2 CCK8實(shí)驗(yàn)24
• 3.3 Annexin V /P I聯(lián)合染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡24-25
• 3.4 PI單染法測(cè)定細(xì)胞周期25
• 3.5 JC-1 染色檢測(cè)線粒體膜電位25-26
• 3.6 Western Blot檢測(cè)26-28
• 3.6.1 細(xì)胞蛋白的提取和濃度測(cè)定26
• 3.6.2 蛋白樣品的檢測(cè)26-28
• 3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理28-29
• 第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-42
• 4.1 四氫吲唑酮取代的苯甲酰胺化合物抑制腫瘤細(xì)胞增殖的活性29-31
• 4.2 W-H4對(duì)急性髓性白血病細(xì)胞HL60、KG-1a體外增殖的影響31-32
• 4.3 比較W-H4、17-AAG對(duì)急性髓性白血病細(xì)胞株HL60、KG-1a體外增殖的影響32-33
• 4.4 W-H4對(duì)HL60、KG-1a細(xì)胞中Hsp90客戶蛋白的影響33-34
• 4.5 W-H4誘導(dǎo)急性髓性白血病細(xì)胞株HL60、KG-1a細(xì)胞發(fā)生凋亡34-35
• 4.6 W-H4誘導(dǎo)HL60、KG-1a細(xì)胞caspase家族以及PARP的活化35-36
• 4.7 W-H4對(duì)Bcl-2 家族蛋白的影響36
• 4.8 W-H4誘導(dǎo)HL60、KG-1a細(xì)胞發(fā)生線粒體損傷36-37
• 4.9 W-H4誘導(dǎo)HL60、KG-1a細(xì)胞發(fā)生周期阻滯37-38
• 4.10 W-H4對(duì)HL60、KG-1a細(xì)胞周期蛋白的影響38-40
• 4.11 W-H4誘導(dǎo)急性髓性白血病細(xì)胞株HL60、KG-1a細(xì)胞中LC3-II的積累40-41
• 4.12 W-H4對(duì)自噬調(diào)控信號(hào)通路的影響41-42
• 第五章 討論與總結(jié)42-45
• 5.1 討論42-44
• 5.2 總結(jié)與展望44-45
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 碩士期間已發(fā)表的論文和申請(qǐng)的專利50-51
• 致謝51

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 原希榮,徐光娟;兒童t(8;21)急性髓性白血病臨床特征和預(yù)后因素與成人的比較[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2001年09期

2 小茹;治療急性髓性白血病的新藥[J];中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報(bào);2002年19期

3 ;“解碼”癌癥基因[J];臨床薈萃;2010年12期

4 王學(xué)文;;長(zhǎng)期生存的急性髓性白血病:一個(gè)國(guó)際性的協(xié)作研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊(cè));1982年06期

5 Barmen E ,方炳木 ,劉英;新藥在急性髓性白血病中的應(yīng)用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1993年01期

6 羅玉芳;急性髓性白血病2例的聲像圖特征[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;1994年12期

7 王衛(wèi)東,柴文華;急性髓性白血病亞型轉(zhuǎn)變1例[J];白血病;1999年02期

8 余河慶,劉艷杰,肖大為,劉葳,張昕;10a中5次復(fù)發(fā)仍存活急性髓性白血病1例[J];白血病;1999年05期

9 顧龍;肖蕓;呂曉楠;葉輝銘;劉祝君;曾驥孟;;廈門(mén)大學(xué)附屬中山醫(yī)院2005～2012年新發(fā)急性髓性白血病初步分析[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年24期

10 史亦謙,鄧e，

本文編號(hào)：534614