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1-甲基乙內(nèi)酰脲抑制INS-1細(xì)胞增殖及胰島素分泌的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-07-08 13:22

  本文關(guān)鍵詞:1-甲基乙內(nèi)酰脲抑制INS-1細(xì)胞增殖及胰島素分泌的研究


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【摘要】:目的:探索1-甲基乙內(nèi)酰脲能否抑制大鼠胰島素瘤INS-1細(xì)胞增殖及激素分泌的作用,探討其可能的機(jī)制,并與生長(zhǎng)抑素類似物奧曲肽進(jìn)行比較方法:采取體外培養(yǎng)的大鼠胰島素瘤INS-1細(xì)胞株。分別用不同濃度的1-甲基乙內(nèi)酰脲及奧曲肽處理72小時(shí)后,通過CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞增殖抑制率,做出生長(zhǎng)曲線圖,并與空白對(duì)照組進(jìn)行比較。FCM流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期分布;放射免疫分析法測(cè)定各組細(xì)胞胰島素分泌水平;Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)cAMP及PKA的表達(dá)。結(jié)果:1.CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:不同濃度的1-甲基乙內(nèi)酰脲以及奧曲肽處理細(xì)胞72h后,均能抑制大鼠胰島素瘤INS-1細(xì)胞的增殖,并且抑制效果隨著濃度的增大逐漸增強(qiáng)。2.FCM及細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示:相比于空白對(duì)照組,1-甲基乙內(nèi)酰脲、奧曲肽各個(gè)濃度組的INS-1細(xì)胞凋亡率明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);相比于空白對(duì)照組,1-甲基乙內(nèi)酰脲、奧曲肽各個(gè)濃度組細(xì)胞處于G0/G1期的細(xì)胞比率均高于正常對(duì)照組。3.放射免疫分析測(cè)定結(jié)果顯示:相比于空白對(duì)照組,1-甲基乙內(nèi)酰脲及奧曲肽各實(shí)驗(yàn)組濃度下均能抑制INS-1細(xì)胞分泌胰島素,且其抑制效果呈濃度依賴關(guān)系,隨著濃度的增加,抑制效果增強(qiáng)。4.Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示:與空白對(duì)照組相比,1-甲基乙內(nèi)酰脲及奧曲肽處理INS-1細(xì)胞后,其細(xì)胞內(nèi)cAMP及PKA均明顯下調(diào),差異具有顯著性(p0.05).結(jié)論:1.1-甲基乙內(nèi)酰脲對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠胰島素瘤INS-1細(xì)胞具有抑制細(xì)胞增殖的作用,其機(jī)制可能與其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及影響細(xì)胞周期有關(guān)。2.1-甲基乙內(nèi)酰脲可以抑制INS-1細(xì)胞分泌胰島素,其抑制激素分泌的作用具有劑量依賴性。1-甲基乙內(nèi)酰脲抑制胰島素分泌可能與其抑制了cAMP-PKA通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:1-甲基乙內(nèi)酰脲 奧曲肽 INS-1細(xì)胞 胰島素分泌
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R736.7
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-8
  • 主要縮略詞中英文對(duì)照索引8-10
  • 第1章 前言10-12
  • 第2章 材料和方法12-24
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14-24
  • 第3章 數(shù)據(jù)處理24-26
  • 第4章 技術(shù)路線圖26-28
  • 第5章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-36
  • 5.1 CCK-8 細(xì)胞增殖率檢測(cè)及 FCM 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布、細(xì)胞凋亡28-33
  • 5.2 碘[~(125)I]胰島素放射免疫法測(cè)定胰島素含量33-34
  • 5.3 Western Blot 檢測(cè)細(xì)胞胰島素分泌相關(guān)蛋白的表達(dá)情況34-36
  • 第6章 討論36-40
  • 第7章 結(jié)論40-42
  • 參考文獻(xiàn)42-46
  • 文獻(xiàn)綜述46-54
  • 參考文獻(xiàn)51-54
  • 致謝54-55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 李衛(wèi);梁慶模;周筱筠;劉龍飛;盧先州;王松;;1-甲基乙內(nèi)酰脲對(duì)SW480細(xì)胞作用的研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2014年09期

2 王順啟,倪虹,王娟,陳力;獨(dú)角蓮對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721細(xì)胞增殖抑制作用機(jī)理的研究[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2003年03期

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本文編號(hào):534759

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