本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷聯(lián)合吉西他濱對(duì)鼠T細(xì)胞淋巴瘤體內(nèi)外作用研究

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【摘要】：目的： 通過(guò)MTT法檢測(cè)三氧化二砷(Arsenic Trioxide，ATO)和吉西他濱(Gemcitabine，GEM)單藥及聯(lián)合用藥對(duì)鼠源性T細(xì)胞淋巴瘤系EL-4細(xì)胞株增殖的體外抑制作用；復(fù)制C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤皮下移植瘤動(dòng)物模型，研究三氧化二砷和吉西他濱單藥及聯(lián)合用藥對(duì)該小鼠淋巴瘤模型的生長(zhǎng)抑制作用并探討可能的作用機(jī)制，為T細(xì)胞淋巴瘤的治療模式提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)及科學(xué)依據(jù)。 方法： (1)采用MTT法分別檢測(cè)ATO和GEM單藥及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系EL-4細(xì)胞株的增殖抑制作用；(2)復(fù)制C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為ATO單藥組、GEM單藥組及ATO與GEM聯(lián)合用藥組，，單藥組均選擇高、低劑量?jī)煞N藥物劑量，并設(shè)定生理鹽水為陰性對(duì)照組，分別于第8天和第15天進(jìn)行處死。給藥期間觀察各組小鼠的生存狀態(tài)，測(cè)量小鼠體重。處死小鼠后，稱量腫瘤組織，計(jì)算抑瘤率；留取腫瘤組織、淋巴結(jié)、肝臟及脾臟，固定、制片，對(duì)腫瘤組織行CD3免疫組化染色驗(yàn)證腫物為T細(xì)胞淋巴瘤，然后進(jìn)行HE染色觀察藥物作用下淋巴瘤的病理形態(tài)及淋巴瘤是否存在淋巴結(jié)、肝、脾的轉(zhuǎn)移，并對(duì)腫瘤組織進(jìn)行TUNEL法組織細(xì)胞凋亡檢測(cè)。 結(jié)果： (1)藥物ATO和GEM單藥及聯(lián)合用藥對(duì)EL-4細(xì)胞的作用： ATO單藥在2.5μmol/L~40μmol/L濃度范圍下，隨著藥物濃度的增加，抑制細(xì)胞增殖作用明顯增強(qiáng)。并且ATO濃度高于20μmol/L時(shí)，對(duì)細(xì)胞抑制作用隨著時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增強(qiáng)。 GEM單藥在0.78125ug/L~50ug/L濃度范圍內(nèi)，隨著藥物濃度的增加細(xì)胞增殖的抑制作用明顯增強(qiáng)。此外，在GEM濃度1.5625ug/L~50ug/L范圍內(nèi)，隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞的抑制作用逐漸增強(qiáng)。 ATO和GEM聯(lián)合用藥結(jié)果顯示，同一作用時(shí)間的同一濃度ATO和GEM1.5625ug/L聯(lián)合用藥組的細(xì)胞抑制作用比GEM0.78125ug/L聯(lián)合用藥組明顯增強(qiáng)，此外，隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)而抑制率逐漸增高。聯(lián)合用藥組抑制率均高于ATO和GEM單藥組。④經(jīng)公式計(jì)算得出兩藥聯(lián)合效應(yīng)在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)條件下為協(xié)同作用。(2)藥物ATO和GEM單藥及聯(lián)合用藥對(duì)T細(xì)胞淋巴瘤小鼠的體內(nèi)作用：復(fù)制T細(xì)胞淋巴瘤EL-4細(xì)胞荷瘤C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型，腫瘤組織行CD3免疫組化染色顯示CD3彌漫性胞膜強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)驗(yàn)證腫物為T細(xì)胞淋巴瘤，成瘤率為100%。抑制腫瘤作用最強(qiáng)的為第8天處死的ATO與GEM聯(lián)合用藥組，抑瘤率為49.65%，優(yōu)于第8天處死的ATO低劑量組及GEM低劑量組。此外，第15天處死的荷瘤鼠抑瘤率低于第8天。經(jīng)公式計(jì)算得出兩藥聯(lián)合效應(yīng)在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)條件下為相加作用。腫瘤組織、淋巴結(jié)、肝臟、脾臟進(jìn)行HE染色結(jié)果顯示各實(shí)驗(yàn)組小鼠均存在上肢淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，但下肢淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定差異，第15天處死小鼠轉(zhuǎn)移率明顯高于第8天。④第8天處死的ATO高劑量組凋亡指數(shù)(AI)最高，第15天處死的生理鹽水對(duì)照凋亡指數(shù)最低。凋亡指數(shù)從高到低依次為ATO高劑量組、ATO低劑量組、GEM高劑量組、GEM低劑量組、ATO/GEM聯(lián)合用藥組。 結(jié)論： (1)在一定濃度范圍內(nèi)，三氧化二砷和吉西他濱單藥對(duì)EL-4細(xì)胞增殖均有抑制作用；(2)實(shí)驗(yàn)條件下，三氧化二砷聯(lián)合吉西他濱對(duì)EL-4細(xì)胞增殖均有明顯抑制作用，兩藥聯(lián)合細(xì)胞抑制率高于同濃度單藥，聯(lián)合用藥在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中具有協(xié)同效應(yīng)；(3)三氧化二砷和吉西他濱單藥均可抑制C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤皮下移植瘤生長(zhǎng)，吉西他濱抑瘤作用優(yōu)于三氧化二砷；(4)在實(shí)驗(yàn)條件下，三氧化二砷聯(lián)合吉西他濱對(duì)C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤皮下移植瘤有明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)作用，兩藥聯(lián)合抑瘤率高于同濃度單藥；聯(lián)合用藥在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中具有相加效應(yīng)；(5)三氧化二砷具有促進(jìn)荷瘤鼠T淋巴瘤細(xì)胞凋亡作用。
【關(guān)鍵詞】：三氧化二砷 吉西他濱 淋巴瘤
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 緒論12-17
• 1.1 引言12-14
• 1.2 綜述14-17
• 第2章 材料與方法17-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-20
• 2.1.1 細(xì)胞系17
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)藥物17
• 2.1.4 主要試劑及實(shí)驗(yàn)耗材17-18
• 2.1.5 主要儀器18
• 2.1.6 主要試劑的配制18-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-25
• 2.2.1 ATO 和 GEM 單藥及聯(lián)合用藥對(duì) EL-4 細(xì)胞增殖的影響20-22
• 2.2.2 ATO 和 GEM 單藥及聯(lián)合用藥對(duì) C57BL/6 小鼠 T 細(xì)胞淋巴瘤的體內(nèi)研究22-25
• 第3章 結(jié)果25-38
• 3.1 藥物對(duì) EL-4 細(xì)胞的影響25-29
• 3.1.1 ATO 單藥對(duì) EL-4 細(xì)胞增殖的抑制作用25-26
• 3.1.2 GEM 單藥對(duì) EL-4 細(xì)胞增殖的抑制作用26-27
• 3.1.3 ATO 和 GEM 聯(lián)合用藥對(duì) EL-4 細(xì)胞增殖的抑制作用27-29
• 3.2 ATO 和 GEM 單藥及聯(lián)合用藥對(duì) C57BL/6 小鼠 T 細(xì)胞淋巴瘤的體內(nèi)研究29-38
• 3.2.1 T 細(xì)胞淋巴瘤小鼠模型的復(fù)制及觀察內(nèi)容29-30
• 3.2.2 CD3 免疫組化染色驗(yàn)證腫瘤來(lái)源30
• 3.2.3 荷瘤鼠腫瘤直觀體積30-31
• 3.2.4 荷瘤鼠體重變化31-32
• 3.2.5 ATO 和 GEM 單藥及聯(lián)合用藥腫瘤重量、抑瘤率和兩藥聯(lián)合應(yīng)用效應(yīng)的判定：32-34
• 3.2.6 小鼠腫瘤組織、淋巴結(jié)、肝臟及脾臟病理形態(tài)組織學(xué)改變34-36
• 3.2.7 腫瘤組織原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)36-38
• 第4章 討論38-41
• 第5章 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果47-48
• 致謝48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 高巖;蔡清清;李蘇;卜慶;廖紅;周穎;黃慧強(qiáng);;不同給藥方式下三氧化二砷對(duì)T細(xì)胞淋巴瘤EL4細(xì)胞體內(nèi)及體外抑制作用[J];癌癥;2009年02期

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本文編號(hào)：525453