本文關(guān)鍵詞：量子點(diǎn)免疫層析試紙和磁分選細(xì)胞在肺癌診斷上的研究

  更多相關(guān)文章： 量子點(diǎn) 肺癌 臨床診斷 磁珠 循環(huán)腫瘤細(xì)胞 靈敏度 特異性

【摘要】：納米科技作為一種新興科技,自產(chǎn)生開(kāi)始就得到了快速的發(fā)展和廣泛的關(guān)注。其中,量子點(diǎn)因其量子限域效應(yīng)、尺寸效應(yīng)等四大效應(yīng),磁珠因其比表面積大、超順磁性等優(yōu)點(diǎn),都受到了研究工作者的重視,在細(xì)胞的分離富集,蛋白質(zhì)的標(biāo)記和檢測(cè),靶向給藥和治療等方面中發(fā)揮著日益重要的作用。肺癌是我國(guó)第一大腫瘤,對(duì)于人們的生命健康正產(chǎn)生著巨大的威脅,絕大部分肺癌患者在確診時(shí)已處于肺癌晚期,極大的增大了治愈肺癌的難度,減少了病人的存活時(shí)間。因此,臨床上肺癌的早期診斷對(duì)提高肺癌治愈的可能性和增加肺癌患者的存活時(shí)間具有至關(guān)重要的作用,這對(duì)早期肺癌的診斷方法帶來(lái)很大的挑戰(zhàn),同時(shí)也促進(jìn)了肺癌腫瘤標(biāo)記物研究的快速發(fā)展。腫瘤標(biāo)志物是存在于癌癥病人體內(nèi)的某些特定的蛋白,其含量的變化對(duì)于病人的早期診斷、病情監(jiān)測(cè)、治療效果及預(yù)后的評(píng)價(jià)具有非常重要的意義。目前在臨床上,腫瘤標(biāo)志物已經(jīng)成為評(píng)價(jià)腫瘤患者病況的一項(xiàng)重要檢測(cè)指標(biāo)。循環(huán)腫瘤細(xì)胞是由原發(fā)灶腫瘤上的腫瘤細(xì)胞脫落入侵進(jìn)入血管中形成的,在血液的運(yùn)輸下,進(jìn)入身體的其他部位,是腫瘤擴(kuò)散的根本原因。循環(huán)腫瘤細(xì)胞的數(shù)量與癌癥患者體內(nèi)腫瘤所處的階段密切相關(guān),對(duì)于腫瘤的早期診斷,癌癥的病況監(jiān)測(cè)和治療方案的選擇有著極為重要的臨床價(jià)值。本論文分別從分子水平對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)和細(xì)胞水平對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),探索肺癌早期診斷新途徑。1.本文對(duì)肺癌的檢測(cè)利用了量子點(diǎn)在紫外光激發(fā)下具有明亮熒光的特點(diǎn),制備了量子點(diǎn)免疫層析檢測(cè)卡,成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和癌胚抗原(CEA)的檢測(cè),且該檢測(cè)卡具有良好的特異性,檢測(cè)限可低至2ng/m L,檢測(cè)靈敏度優(yōu)于膠體金對(duì)NSE的檢測(cè)限,可方便、快速、靈敏、批量的檢測(cè),具有良好的應(yīng)用價(jià)值。2.針對(duì)血液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)量極少,很難被監(jiān)測(cè)到等特點(diǎn),通過(guò)免疫磁珠對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行分離富集,并進(jìn)行熒光標(biāo)記技術(shù)對(duì)捕獲的循環(huán)腫瘤細(xì)胞熒光標(biāo)記,成功的從大量干擾細(xì)胞中把少量的循環(huán)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行分離富集,并通過(guò)電化學(xué)阻抗技術(shù)和熒光強(qiáng)度對(duì)捕獲的細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行定性定量檢測(cè)。該方法具有靈敏度高、特異性好等特點(diǎn),在肺癌的臨床診斷方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：量子點(diǎn) 肺癌 臨床診斷 磁珠 循環(huán)腫瘤細(xì)胞 靈敏度 特異性
【學(xué)位授予單位】：上海師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R734.2;TB383.1
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第1章 緒論10-25
• 1.1 研究意義10-12
• 1.2 研究進(jìn)展12-16
• 1.2.1 體外診斷試劑12-13
• 1.2.2 肺癌的常見(jiàn)診斷方法13-14
• 1.2.3 量子點(diǎn)的性質(zhì)、制備以及應(yīng)用14-15
• 1.2.4 磁珠的性質(zhì)、制備以及應(yīng)用15-16
• 1.3 量子點(diǎn)免疫層析方法16-20
• 1.3.1 免疫量子點(diǎn)的制備16-18
• 1.3.2 硝酸纖維素膜的選擇18
• 1.3.3 競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗夾心法18-20
• 1.3.4 量子點(diǎn)免疫層析方法的發(fā)展趨勢(shì)20
• 1.4 富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞的分離富集和檢測(cè)20-23
• 1.4.1 磁珠的制備、修飾和免疫化20-21
• 1.4.2 免疫磁珠分離富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞21-22
• 1.4.3 循環(huán)腫瘤細(xì)胞的多種檢測(cè)方法22-23
• 1.4.4 磁分選技術(shù)分離富集CTC的發(fā)展趨勢(shì)23
• 1.5 本論文研究的目的和內(nèi)容23-25
• 第2章 量子點(diǎn)免疫層析試紙檢測(cè)肺癌腫瘤標(biāo)志物NSE25-39
• 2.1 引言25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分26-30
• 2.2.1 試劑與儀器26
• 2.2.2 QDs-COOH探針熒光強(qiáng)度，Zeta電位和粒徑的測(cè)定26
• 2.2.3 QDs-COOH探針偶聯(lián)抗體條件的優(yōu)化26-27
• 2.2.4 量子點(diǎn)免疫層析試紙的結(jié)構(gòu)27
• 2.2.5 量子點(diǎn)免疫層析試紙的制備27-28
• 2.2.6 免疫層析試紙檢測(cè)NSE抗原的原理及結(jié)果判定28-29
• 2.2.7 對(duì)NSE抗原的標(biāo)準(zhǔn)溶液的檢測(cè)及檢測(cè)限的確定29
• 2.2.8 免疫層析試紙的特異性實(shí)驗(yàn)29
• 2.2.9 免疫層析試紙的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)29
• 2.2.10 免疫層析試紙聯(lián)合檢測(cè)NSE和CEA抗原29-30
• 2.3 結(jié)果與討論30-38
• 2.3.1 QDs-COOH偶聯(lián)抗體條件的優(yōu)化30-33
• 2.3.2 量子點(diǎn)偶聯(lián)抗體前后的水合粒徑33
• 2.3.3 對(duì)NSE抗原的標(biāo)準(zhǔn)溶液的定性檢測(cè)及檢測(cè)限的確定33-34
• 2.3.4 免疫層析試紙的特異性實(shí)驗(yàn)34-35
• 2.3.5 免疫層析試紙的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)35-37
• 2.3.6 免疫層析試紙聯(lián)合檢測(cè)NSE和CEA抗原37-38
• 2.4 本章小結(jié)38-39
• 第3章 磁性Fe_3O_4納米粒子的制備及表面修飾39-52
• 3.1 引言39
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分39-42
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器39-40
• 3.2.2 磁性Fe_3O_4納米粒子的制備40
• 3.2.3 檸檬酸鈉分散磁性納米粒子和鹽酸純化40
• 3.2.4 二氧化硅包覆磁性納米粒子40
• 3.2.5 磁珠表面氨基的修飾40-41
• 3.2.6 抗體偶聯(lián)磁珠條件的優(yōu)化41-42
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析42-51
• 3.3.1 裸磁珠的表征42-43
• 3.3.2 包覆檸檬酸鈉的磁性Fe_3O_4納米粒子的表征43-44
• 3.3.3 包覆Si O_2的磁性Fe_3O_4納米粒子的表征44-46
• 3.3.4 磁性Fe_3O_4納米粒子表面修飾氨基46-47
• 3.3.5 磁珠固含量的測(cè)定47-48
• 3.3.6 抗體偶聯(lián)條件的優(yōu)化48-51
• 3.4 本章小結(jié)51-52
• 第4章 循環(huán)腫瘤細(xì)胞的磁分離富集和檢測(cè)52-66
• 4.1 引言52
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分52-56
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器52
• 4.2.2 細(xì)胞的處理52-54
• 4.2.3 免疫磁珠捕獲細(xì)胞54
• 4.2.4 免疫磁珠偶聯(lián)抗體種類(lèi)的優(yōu)化54
• 4.2.5 免疫磁珠加入量的優(yōu)化54-55
• 4.2.6 磁珠捕獲細(xì)胞的特異性實(shí)驗(yàn)55
• 4.2.7 磁珠捕獲細(xì)胞的靈敏度實(shí)驗(yàn)55
• 4.2.8 被捕獲細(xì)胞的電化學(xué)阻抗檢測(cè)55-56
• 4.2.9 被捕獲細(xì)胞的熒光發(fā)光強(qiáng)度檢測(cè)56
• 4.3 結(jié)果與討論56-64
• 4.3.1 偶聯(lián)不同種類(lèi)抗體的免疫磁珠對(duì)CTC的捕獲56-57
• 4.3.2 不同量的磁珠對(duì)CTC的捕獲57-59
• 4.3.3 免疫磁珠對(duì)CTC捕獲的特異性實(shí)驗(yàn)59-61
• 4.3.4 免疫磁珠捕獲CTC的靈敏度實(shí)驗(yàn)61-62
• 4.3.5 CTC捕獲的電化學(xué)阻抗定性檢測(cè)62-63
• 4.3.6 CTC捕獲的熒光強(qiáng)度定量檢測(cè)63-64
• 4.4 本章小結(jié)64-66
• 參考文獻(xiàn)66-70
• 碩士期間獲得的研究成果70-71
• 致謝71

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳汝福,陳積圣;納米技術(shù)在腫瘤診斷與治療中的應(yīng)用[J];癌癥;2004年12期

2 胡德紅;龔萍;馬軼凡;蔡林濤;;納米技術(shù)在癌癥早期診斷和治療中的研究與展望[J];癌癥;2009年09期

3 鐘巍;王孟昭;陳勇;張力;李龍蕓;;支氣管鏡在肺癌診斷中的應(yīng)用——1315例支氣管鏡檢查結(jié)果分析[J];癌癥進(jìn)展;2009年03期

4 陳萬(wàn)青;張思維;鄒小農(nóng);;中國(guó)肺癌發(fā)病死亡的估計(jì)和流行趨勢(shì)研究[J];中國(guó)肺癌雜志;2010年05期

5 汪樂(lè)余,郭暢,李茂國(guó),許發(fā)功,朱昌青,王倫;功能性硫化鎘納米熒光探針熒光猝滅法測(cè)定核酸[J];分析化學(xué);2003年01期

6 姜學(xué)紅;王瀾;;納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用[J];廣東塑料;2005年03期

7 張春陽(yáng),馬輝,丁堯,金雷,陳瓞延,苗琦,聶書(shū)明;量子點(diǎn)標(biāo)記天花粉蛋白的研究[J];高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào);2001年01期

8 范蓉;錢(qián)和年;;免疫磁珠技術(shù)——一種新的免疫學(xué)技術(shù)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè));1998年01期

9 戚大梁;王強(qiáng);易維京;;循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)方法和技術(shù)研究進(jìn)展[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年24期

10 錢(qián)俊臻;萬(wàn)巧鈴;黃紅稷;;磁性納米粒子的制備及其在分離檢測(cè)上的應(yīng)用[J];四川理工學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年03期

，

本文編號(hào)：521387