發(fā)布時(shí)間：2017-07-03 10:27

  本文關(guān)鍵詞：骨肉瘤中WIF-1基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化及mRNA的表達(dá)研究

  更多相關(guān)文章： 骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR

【摘要】：目的:WIF-1作為Wnt家族成員之一,通過(guò)結(jié)合Wnt蛋白來(lái)抑制Wnt信號(hào)通路的傳導(dǎo),影響細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)骨肉瘤中WIF-1啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)及m RNA的表達(dá)水平,探討兩者與骨肉瘤臨床病理關(guān)系,為骨肉瘤患者的臨床治療奠定理論基礎(chǔ)。方法:搜集從2008年到2014年青島大學(xué)附屬醫(yī)院病理科石蠟包埋骨肉瘤組織標(biāo)本以及手術(shù)切除置于-70℃保存的骨肉瘤組織40例為實(shí)驗(yàn)組,石蠟包埋骨軟骨瘤組織以及手術(shù)切除置于-70℃保存的骨軟骨瘤組織20例為對(duì)照組,并采集患者就醫(yī)材料以及病理診斷信息。通過(guò)利用甲基化特異性PCR技術(shù)(methylation specific PCR,MSP)檢測(cè)骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織中Wl F-1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài),研究Wl F-1基因甲基化狀態(tài)與臨床病理學(xué)之間的相關(guān)性。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)WIF-1基因m RNA在骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織的表達(dá)水平,研究m RNA的相對(duì)表達(dá)量在骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織的表達(dá)差異以及其與臨床病理學(xué)之間的關(guān)系。綜上所述,分析骨肉瘤中WIF-1基因甲基化率與m RNA相對(duì)表達(dá)量之間的關(guān)系,探討兩者在骨肉瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。采用SPSSl9.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,運(yùn)用X2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法,t檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,均用雙側(cè)檢驗(yàn)的方法,以P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.Wl F-1基因在骨肉瘤組織中甲基化率55%(22/40)明顯比骨軟骨瘤組織甲基化率高20%(4/20)(P0.05)。WIF-1基因甲基化陽(yáng)性率與年齡、性別等無(wú)相關(guān)性(P0.05),但是在骨肉瘤病理低分化組甲基化所占比例82.61%(19/23)明顯高于骨肉瘤高分化組甲基化所占比例17.65%(3/17)(P0.05)。2.WIF-1基因m RNA的相對(duì)表達(dá)量在骨肉瘤組和骨軟骨肉瘤組分別是(0.361±0.303)和(0.760±0.256)(P0.001)。WIF-1基因m RNA的相對(duì)表達(dá)量與年齡、性別等無(wú)相關(guān)性(P0.05),但是在病理低分化組為(0.201±0.233)明顯低于高分化組甲(0.578±0.250)(P0.001)。3.骨肉瘤中WIF-1啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的mRNA相對(duì)表達(dá)量(0.139±0.131)明顯低于非甲基化狀態(tài)的m RNA的相對(duì)表達(dá)量(0.642±0.188)(P0.001)。結(jié)論:WIF-1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化可能異常激活經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路,影響m RNA相對(duì)表達(dá)量,從而影響骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R738.1
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料與方法10-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料10-11
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本10
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑10-11
• 1.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程及方法11-16
• 1.2.1 檢測(cè)標(biāo)本中WIF-1 基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況11-13
• 1.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)WIF-1 基因的表達(dá)13-16
• 1.3 結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析16-17
• 第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析17-21
• 2.1 骨肉瘤與骨軟骨瘤組織中WIF-1 啟動(dòng)子區(qū)甲基化分析17
• 2.2 骨肉瘤與骨軟骨瘤組織中WIF-1 基因mRNA的表達(dá)情況17
• 2.3 骨肉瘤中WIF-1 甲基化與mRNA的表達(dá)之間的關(guān)系17-21
• 第三章 討論21-24
• 結(jié)論24-25
• 參考文獻(xiàn)25-29
• 綜述29-41
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果41-42
• 致謝42-43

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 任杰;周清華;;WIF-1研究進(jìn)展[J];中國(guó)肺癌雜志;2007年03期

2 齊健;朱尤慶;羅峻;陶文惠;;分泌型Wnt拮抗基因甲基化在結(jié)直腸腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年28期

  本文關(guān)鍵詞：骨肉瘤中WIF-1基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化及mRNA的表達(dá)研究

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本文編號(hào)：513341