本文關(guān)鍵詞：骨肉瘤中WIF-1基因啟動子區(qū)異常甲基化及mRNA的表達研究

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【摘要】：目的:WIF-1作為Wnt家族成員之一,通過結(jié)合Wnt蛋白來抑制Wnt信號通路的傳導,影響細胞內(nèi)基因表達。本實驗通過檢測骨肉瘤中WIF-1啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)及m RNA的表達水平,探討兩者與骨肉瘤臨床病理關(guān)系,為骨肉瘤患者的臨床治療奠定理論基礎(chǔ)。方法:搜集從2008年到2014年青島大學附屬醫(yī)院病理科石蠟包埋骨肉瘤組織標本以及手術(shù)切除置于-70℃保存的骨肉瘤組織40例為實驗組,石蠟包埋骨軟骨瘤組織以及手術(shù)切除置于-70℃保存的骨軟骨瘤組織20例為對照組,并采集患者就醫(yī)材料以及病理診斷信息。通過利用甲基化特異性PCR技術(shù)(methylation specific PCR,MSP)檢測骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織中Wl F-1基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài),研究Wl F-1基因甲基化狀態(tài)與臨床病理學之間的相關(guān)性。應(yīng)用實時熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測WIF-1基因m RNA在骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織的表達水平,研究m RNA的相對表達量在骨肉瘤組織及骨軟骨肉瘤組織的表達差異以及其與臨床病理學之間的關(guān)系。綜上所述,分析骨肉瘤中WIF-1基因甲基化率與m RNA相對表達量之間的關(guān)系,探討兩者在骨肉瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用。采用SPSSl9.0統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理,運用X2檢驗或Fisher精確概率法,t檢驗等統(tǒng)計學方法,均用雙側(cè)檢驗的方法,以P0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.Wl F-1基因在骨肉瘤組織中甲基化率55%(22/40)明顯比骨軟骨瘤組織甲基化率高20%(4/20)(P0.05)。WIF-1基因甲基化陽性率與年齡、性別等無相關(guān)性(P0.05),但是在骨肉瘤病理低分化組甲基化所占比例82.61%(19/23)明顯高于骨肉瘤高分化組甲基化所占比例17.65%(3/17)(P0.05)。2.WIF-1基因m RNA的相對表達量在骨肉瘤組和骨軟骨肉瘤組分別是(0.361±0.303)和(0.760±0.256)(P0.001)。WIF-1基因m RNA的相對表達量與年齡、性別等無相關(guān)性(P0.05),但是在病理低分化組為(0.201±0.233)明顯低于高分化組甲(0.578±0.250)(P0.001)。3.骨肉瘤中WIF-1啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)的mRNA相對表達量(0.139±0.131)明顯低于非甲基化狀態(tài)的m RNA的相對表達量(0.642±0.188)(P0.001)。結(jié)論:WIF-1基因啟動子區(qū)甲基化可能異常激活經(jīng)典和非經(jīng)典Wnt信號通路,影響m RNA相對表達量,從而影響骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展過程。
【關(guān)鍵詞】：骨肉瘤 WIF-1基因 甲基化 實時熒光定量RT-PCR
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R738.1
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料與方法10-17
• 1.1 實驗材料10-11
• 1.1.1 實驗標本10
• 1.1.2 實驗試劑10-11
• 1.2 實驗過程及方法11-16
• 1.2.1 檢測標本中WIF-1 基因啟動子區(qū)甲基化情況11-13
• 1.2.2 實時熒光定量RT-PCR檢測WIF-1 基因的表達13-16
• 1.3 結(jié)果統(tǒng)計學分析16-17
• 第二章 實驗結(jié)果與分析17-21
• 2.1 骨肉瘤與骨軟骨瘤組織中WIF-1 啟動子區(qū)甲基化分析17
• 2.2 骨肉瘤與骨軟骨瘤組織中WIF-1 基因mRNA的表達情況17
• 2.3 骨肉瘤中WIF-1 甲基化與mRNA的表達之間的關(guān)系17-21
• 第三章 討論21-24
• 結(jié)論24-25
• 參考文獻25-29
• 綜述29-41
• 參考文獻36-41
• 攻讀學位期間的研究成果41-42
• 致謝42-43

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任杰;周清華;;WIF-1研究進展[J];中國肺癌雜志;2007年03期

2 齊健;朱尤慶;羅峻;陶文惠;;分泌型Wnt拮抗基因甲基化在結(jié)直腸腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用[J];中華醫(yī)學雜志;2007年28期

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本文編號：513341